当归提取物抗皮肤衰老及美白功效体外实验研究

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1、时珍国医国药２０１０年第２１卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮＭＥＤＩＣＩＮＥＡＮＤＭＡＴＥＲＩＡＭＥＤＩＣＡＲＥＳＥＡＲＣＨ２０１０ＶＯＬ．２１ＮＯ．４当归提取物抗皮肤衰老及美白功效体外实验研究１，２，３３１，２１高瑞英，党志，邹颖楠，傅中（１．广东食品药品职业学院，广东广州５１０５２０；２．广东省中药研究所，广东广州５１０５２０；３．华南理工大学环境科学与工程学院，广东广州５１０００６）摘要：目的验证中药材当归提取物抗皮肤衰老能力和美白功效。方法对当归提取物的自由基清除、亚铁离子络合及酪氨酸酶活性抑制能力进行体外实验。结果各项功效指标

2、与溶剂浓度及提取物浓度有一定的关联，其中当归５０％醇提液自由基清除率最高达到８０．２％，铁离子络合率最高达到４１．４％，酪氨酸酶抑制率最高达到２５．１％。结论当归提取物具有较好的抗皮肤老化和美白双重功效，可用作美白和抗衰老化妆品的天然原料。关键词：当归；抗衰老；美白；体外实验中图分类号：Ｒ１６８文献标识码：Ｂ文章编号：１００８-０８０５（２０１０）０４-０８７４-０２皮肤衰老是人体机体的自然发展规律。随着对皮肤衰老机取，方法同“２．１．１”项。理的深入研究，人们不断的研究和总结预防和延缓皮肤衰老的有２．２抗老化能力的测定效途径和方

3、法。中草药因其独特机理和美容效果已被广泛应用２．２．１ＤＰＰＨ自由基清除能力测定ＤＰＰＨ为含有奇数电子的稳于护肤类化妆品中。定自由基，本方法的原理是利用其甲醇溶液在５１７ｎｍ可见光下当归为伞形科植物当归Angelicasinensis（Ｏｌｉｖ．）Ｄｉｅｌｓ的干具有极强的吸光度，但当其与任一自由基结合或被抗氧化剂还原燥根，是临床常用药，素有“十方九归”之称。性味甘、辛、温，归时，其吸光度会下降；吸光度越低，表示样品清除ＤＰＰＨ的能力越［１］肝、心、脾经。内服有补血活血，调经止痛，润肠通便的功效。强。现代药理学研究进一步发现，当归还

4、具有抗炎、清除氧自由取０．２ｍｌ萃取物、３．８ｍｌ甲醇溶液与１ｍｌ（ＤＰＰＨ）ｒａｄｉｃａｌ甲［２］－４基、增强免疫功能等作用。动物实验研究已表明含复方当归醇溶液（２×１０ｍｏｌ／Ｌ），充分混和均匀，静置３０ｍｉｎ后，以分光［４］提取物水剂型护肤品具有增加小鼠表皮含水量和提高小鼠皮肤光度计测５１７ｎｍ处吸光度，并以公式计算其自由基清除率。细胞ＳＯＤ活性；人体试验研究显示它具有改善人体皮肤颜色，增自由基清除率（％）＝［（Ａｃ－Ａｓ／Ａｃ）］×１００％［３］Ａｓ：含有待测物的样品在５１７ｎｍ处的吸光度；加皮肤白皙、透明效果。这些新的功

5、效在护肤化妆品研发当中得到了重视和应用。Ａｃ：不含待测物的样品在５１７ｎｍ处的吸光度。２＋本研究主要通过体外实验，从自由基捕捉效应、络合亚铁离２．２．２络合亚铁离子能力Ｆｅ通常为较好的促氧化剂，可以促２＋子能力及酪氨酸酶活性抑制三方面对当归提取物抗皮肤老化与使脂质氧化作用的进行。本方法利用Ｆｅ与Ｆｅｒｒｏｚｉｎｅ（菲咯嗪）２＋美白能力进行评估，并对体内实验结果进行检验和佐证。的复合物在５６２ｎｍ处有呈色反应，可测得样品对Ｆｅ的络合能２＋１材料与仪器力。当样品络合Ｆｅ会造成吸光度降低，吸光度越高表示络合［５］能力越好。当归购自广州市

6、清平药材市场，经广东省中药研究所药物研As究室鉴定。络合率（％）＝［１－］×１００％AcＤＰＰＨ（１，１－ｄｉｐｈｅｎｙｌ－２－２－ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌｒａｄｉｃａｌ）、菲咯Ａｓ：含有待测物的样品在５６２ｎｍ处的吸光度；嗪（５ｍｍｏｌ／Ｌ）、酪氨酸酶（用ＰＢＳ配制成相应浓度单位）均为Ａｃ：不含待测物的样品在５６２ｎｍ处的吸光度。ｓｉｇｍａ公司生产。取不同浓度的萃取液加入０．１ｍｌ的ＦｅＣｌ２·４Ｈ２Ｏ（２ｍｍｏｌ／甲醇、ＦｅＣｌ２·４Ｈ２Ｏ（２ｍｍｏｌ／Ｌ）、熊果苷，ＥＤＴＡ，ＶｉｔＥ，磷酸二Ｌ）３０ｓ后再加入０．２ｍｌＦ

7、ｅｒｒｏｚｉｎｅ（５ｍｍｏｌ／Ｌ），反应１０ｍｉｎ后，使氢钠，磷酸氢二钠等试剂均为国产分析纯，配制水均为双蒸水。用分光光度计检测吸光度，空白试验（Ｂｌａｎｋ）以样品溶剂取代样７５２型紫外分光光度计，旋转蒸发仪，恒温水浴锅，真空减压品。泵、中药粉碎机、离心机。２．３美白有效性试验—当归提取物对酪氨酸酶活性抑制的影响２方法２．３．１处理组（萃取液）探讨不同萃取物对抑制酪氨酸酶形成２．１中药的提取Ｄｏｐａｑｕｉｎｏｎｅ的能力，并以维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）作对照组。取１ｍｌ的２．１．１水提法当归１００ｇ→破碎→烘干（８０℃）→粉碎（４０目）中

8、药萃取液，加入０．９ｍｌｐＨ６．８的缓冲液及１ｍｌ０．０３％的酪氨→用双蒸水浸提（分３次进行，３次加水量分别是当归重的１０，６，酸溶液于试管中混和，并置于３７℃的恒温槽中１０ｍｉｎ，再加入４倍；每次浸提温度为１００℃，时间３０ｍｉｎ）→合并３次浸提