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《新的产弹性蛋白酶菌株的筛选与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、微生物学通报SEP20,2009,36(9):1345~1349Microbiology©2009byInstituteofMicrobiology,CAStongbao@im.ac.cn研究报告新的产弹性蛋白酶菌株的筛选与鉴定*刘双发安德荣苟丽霞李娜(西北农林科技大学植保学院与陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100)摘要:本研究从秸秆中分离得到一株弹性蛋白酶高产菌,并对该菌株进行鉴定,以期为实现其工业化生产提供理论依据。采用酪蛋白(脱脂奶粉)进行初筛后,以弹性蛋白(牛筋)进行复筛,并对筛选结果进行检验,然后对所得菌株结合形态、生理生化特性和16SrRNA
2、基因序列进行分类鉴定,得到一株弹性蛋白酶高产菌株LSF-97。结果显示,菌株LSF-97与短小芽孢杆菌同源率达到100%,形态及生理生化特征与模式菌也显示高度一致性,故将其确定为短小芽孢杆菌。关键词:芽孢杆菌,蛋白酶,筛选,鉴定ScreeningandIdentificationofaNewElastase-producingStrain*LIUShuang-FaANDe-RongGOULi-XiaLINa(CollegeofPlantProtectionandShaanxiKeyLaboratoryofMolecularBiologyforAgriculture,N
3、orthwestA&FUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China)Abstract:Thestudyprovideatheoreticalbasisfortheindustrialproductionofaelastase-high-yieldstrainwhichwasisolatedfromthestraw,andtheselectedstrainwasidentified.Thescreeningstrategyincludedcasein(skimmilk)plateselectingandelastin(beeftendo
4、n)re-screening.Andthen,themorphological,physiologicalandbiochemicalcharacteristicsaswellas16SrRNAsequencehomologyoftheselectedstrainwerestudied.Finally,thestrainLSF-97whichhadaexcellentdecomposingabilitytobeeftendonwasob-tained.TheresultsshowedthatthestrainLSF-97isrelativetotheBacillusp
5、umiluswith100%similarinsequenceunderthephylogenetictree,themorphologicalandphysiologicalandbiochemicalcharacteristicsarealsoconsistentwithpatternofbacteria.SoitwasidentifiedasBacilluspumilus.Keywords:Bacillus,Elastase,Screening,Identification弹性蛋白酶(Elastase)是一种以水解不溶性弹性食品、农业、轻工业、服装加工、环保和生
6、物技术[2−6]蛋白为特征的广谱性蛋白水解酶。自从1949年被等领域被广泛运用,并具有极大的开发潜力和[1]Banga发现以来,各国科学家对其的研究便表现商业价值。在我国,弹性蛋白酶的生产还主要是从得十分活跃,从最初的酶源和纯化研究到现今的分猪胰脏中提取,受到脏器资源不足、提取工艺复杂子遗传机理的探索,研究水平越来越深入,很大程等因素的限制,不利于酶制剂的可持续性发展,而度上拓宽了其应用领域。目前,弹性蛋白酶在医药、国外通过微生物发酵生产已取得了巨大的经济效基金项目：国家863计划项目(No.2007AA021503);教育部长江学者和创新团队发展计划资助(No.20
7、0558)*通讯作者：:anderong323@163.com收稿日期：2009-02-13;接受日期：2009-04-151346微生物学通报2009,Vol.36,No.9[7]益。另外,微生物生产弹性蛋白酶技术的开发还存的250mL三角瓶中,按5%接种量接种种子培养液在产物活性不高、性质差异大、基因工程菌不稳定后,在旋转式摇床上38°C、170r/min培养48h。等问题的制约,而筛选出弹性蛋白酶的高产菌株是1.4实验方法解决诸多问题的关键所在。从自然中直接去筛选稳1.4.1初筛:取样品少许剪碎,放入250mL三角瓶定高产菌株无疑是最为直接和行
