食源性低聚肽体外抗氧化活性研究

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1、万方数据食源性低聚肽体外抗氧化活性研究+任玮，金振涛，陈亮，蔡木易，易维学(中国食品发酵工业研究院，北京，100027)摘要对工业化生产的食源性低聚肽进行了清除DPPH自由基、抑制亚油酸自氧化2种体系下的体外抗氧化活性的研究。结果表明：在清除DPPH自由基体系中，卵白肽和大豆肽的抗氧化活性最高，其Ic。分别为5．767，6．268mg／mL。在抑制亚油酸自氧化体系中，大豆肽和海洋胶原肽对于亚油酸自氧化的抑制率分别达到了75．16V00和58．69％。几种食源性低聚肽均有不同程度的抗氧化活性。关键词食源性低聚肽，抗氧化活性，DPPH，亚油酸食源性低聚

2、肽是以食物蛋白为原料，经过酶解制成的新型蛋白水解产品，其中分子量在1000u以下的短肽达90％以上。小分子的肽类不但具有比原蛋白和和游离氨基酸更易被人体吸收的特点一11，而且还具有许多生理活性。食源性低聚肽的抗氧化活性是研究较为普遍的一种生理活性。荣建华等人r2一]发现以大豆分离蛋白为原料，采用酶解、超滤等方法制备出的大豆肽具有还原能力和抗氧化活性，并发现大豆肽在Fenton体系中对·OH的清除效果明显。周之辉等人。们发现，牛初乳提取物(BCE)能提高老年人体内血清总SOD活力与SOD活力，降低脂质过氧化物，增强抗氧化能力，而且初乳制品中的抗衰老作

3、用很可能和活性肽有关。KunioSuetsuna[50发现，经过胃蛋白酶消化制得的对虾多肽有很强的清除自由基能力。郭瑶等人[6]发现罗非鱼皮胶原肽对0z·、·0H和H。O。的清除作用及其还原能力均与浓度呈量效关系，对Fe2+诱发的卵黄脂蛋白的过氧化有较好的抑制作用；对花生油和猪油的氧化也有一定的抑制作用。保健食品原料及终端产品的保健功能检验一般包括动物试验和体外试验。与体内活性试验相比，体外活性试验具有成本低、周期短、简单易行等优点，可以在进行动物和临床试验之前，进行简易预测，避免盲目性，节省试验费用。抗氧化性的体外试验方法主要分为以抗氧化剂抑制脂

4、质氧化为基础的方法和清除自由基的方法两大类[7一，根据不同的试验需求，选择不同的试验底物、检测方法和评价方法。本第一者：硕士研究生(蔡木易教授级高工为通讯作者)。*“863”国家高技术研究发展计划(No．2007AAl02327)．“十一五”国家科技支撑计划项目(No．2006BAD27B08)收稿El期：2008—08—05，改回日期：2008—09～16442Q旦曼!里!曼璺型里：!至!!Q!璺12曼至!研究从清除自由基能力和抑制油脂自氧化能力2方面评价了几种食源性低聚肽的抗氧化活性，并与已知的抗氧化剂进行对比，旨在确立一种对于食源性低聚肽较为

5、通用、快速、准确的抗氧化活性体外评价方法。l材料与方法1．1实验材料海洋胶原肽、海洋骨原肽、海洋蛋白肽、乳清肽、卵白肽：中食海氏(北京)生物技术有限公司；大豆肽：中食都庆(山东)生物技术有限公司；玉米肽：实验室自制。DPPH(二苯代苦味酰基)、亚油酸均购自Sig—Ilia公司；Vc：100mg／片，天津力生制药公司；绿茶提取物(含茶多酚1％～10％)、葡萄籽提取物(含原花青素1％～10％)、大豆异黄酮(40％)：均购自北京嘉康源科技发展有限公司；曲酸：实验室自制。1．2实验方法1．2．1DPPH自由基清除能力测定[8]准确称取20mgDPPH用体积

6、分数95％乙醇溶解并定容于250mI。容量瓶中，则DPPH浓度为2×10～mol／L，取等体积待测液及2×10叫mol／LDP-PH溶液加入同一具塞试管中，摇匀。30min后用95％乙醇做参比在517nm下测定其吸光度Ai，同时测定2×10-4moI／LDPPH溶液与等体积95％乙醇混合液的吸光度Ac，以及待测液与等体积95％乙醇混合液的吸光度Aj。计算清除率：清除率／％一[1一(Ai—Ai)／Ac]×1001．2．2亚油酸乳化体系一硫氰酸铁(FTC)法r9一在10mL具塞玻璃管中，向1．5mL0．05mol／L的PBS(pH7)中加入试样100肛

7、L，再加入100肚L20mmol／I。的亚油酸的乙醇溶液，25"L20mmol／L的FeCl：一EDTA，在漩涡分散器上混匀，于50℃暗处水万方数据浴保温2h。检测时，向2mL75％乙醇中加入100肚L反应液，及100pL30％NH。SCN溶液，最后加人50扯L20mmol／L的FeCI：溶液(用质量分数3．5％HCl溶解)。采用漩涡分散器振荡后，立即计时，3rain后用体积分数75％乙醇作为参比，在480nm处测定溶液的吸光度。抗氧化剂空白的吸光度为A。，加抗氧化剂时吸光度为As，抗氧化活力AA(antioxidativeactivity)可用公

8、式表示：^AA／％一／—4_—o---，!．s×1002结果与讨论2．1食源性低聚肽及对照物对DPPH自由基的清除作用DP