Aβ3-10-KLH多肽疫苗主动免疫tau_APP_PS1三转基因小鼠后对其脑内tau蛋白磷酸化的影响

《Aβ3-10-KLH多肽疫苗主动免疫tau_APP_PS1三转基因小鼠后对其脑内tau蛋白磷酸化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R742单位代码：10159密级：公开学号：201420322硕士学位论文（临床医学硕士学术学位）中文题目：Aβ3-10-KLH多肽疫苗主动免疫tau/APP/PS1三转基因小鼠后对其脑内tau蛋白磷酸化的影响英文题目：EffectofAβ3-10-KLHPolypeptideVaccineontauProteinPhosphorylationintau/APP/PS1TransgenicMice论文作者：温梓辰指导教师：曹云鹏教授学科专业：神经病学完成时间：2018年2月I中国医科大学硕士学位论文Aβ3-10-KLH多肽疫苗主动免疫tau/APP

2、/PS1三转基因小鼠后对其脑内tau蛋白磷酸化的影响EffectofAβ3-10-KLHPolypeptideVaccineontauProteinPhosphorylationintau/APP/PS1TransgenicMice论文作者温梓辰指导教师曹云鹏教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科神经病学研究方向阿尔茨海默病方向论文起止时间2016年7月—2018年2月论文完成时间2018年2月中国医科大学（辽宁）2018年2月I中国医科大学硕士学位论文摘要目的：阿尔茨海默病的主要特征是细胞外Aβ（β-淀粉状蛋白）斑块（老年斑，S

3、P），细胞内高度磷酸化tau蛋白的形成神经元纤维缠结（NeurofibrillaryTangles，NFTs）和中枢胆碱能神经元丢失。其主要临床表现为进行性痴呆，认知功能障碍，智力和行为异常，生活能力下降。尽管学者们对阿尔茨海默病的病因学持有不同的观点，但Aβ假说目前仍然占据着主导地位。随着人均寿命的提高，无论是发达国家还是发展中国家，阿尔茨海默病的患病人数日益增多。目前还没有治愈这种疾病的方法，临床上只能对症治疗，因此进一步研究抗阿尔茨海默病的药物具有重要意义。近年来研究都表明，Aβ和Tau蛋白存在相互作用，β-淀粉样蛋白的生成和清除失衡很可能是导致神经

4、元变性坏死和认知功能障碍发生的起始事件。Aβ沉积可以促进Tau蛋白的异常磷酸化，而过度磷酸化的Tau蛋白则可以加剧Aβ所引起的神经元毒性和微管丢失等效应，从而损伤神经细胞而致记忆认知功能损害和学习行为障碍。目前针对Aβ沉积和Tau蛋白磷酸化在AD中关系和作用的研究日益增多、深入，对于AD的病情发生发展及预后评估有着较为重要的意义。我们在Aβ沉积前开始直至Aβ斑明显沉积并出现认知障碍之间以不同的时间点免疫tau/APP/PS1三转基因鼠，探讨阻止Aβ的沉积，对tau/APP/PS1小鼠脑内tau蛋白磷酸化、神经元纤维缠结形成的影响。方法：我们构建了Aβ3-1

5、0-KLH多肽疫苗，在tau/APP/PS1（3×TgAD）小鼠1月龄时项背部皮下注射3×TgAD小鼠作为实验组，以C57/B6野生型小鼠作为野生对照组，用PBS项背部皮下注射3×TgAD小鼠作为模型对照组。第一次免疫时与等体积完全弗氏佐剂（Freund’sadjuvantcomplete，FCA）混合，项背部皮下注射。第二次免疫开始与等体积的不完全弗氏佐剂（Freund’sadjuvantincomplete，FIA）混合，使其充分乳化，项背部皮下注射。第一次和第二次间隔两周，之后每月一次，共七次。免疫结束后，断头取脑，然后用ELISA方法检测脑内总ta

6、u蛋白的含量，以及用western-blot方法探讨脑内神经元tau蛋白磷酸化情况。结果：1，经过7次免疫后，Aβ3-10-KLH组小鼠血清中的抗Aβ抗体显著高于PBS组，差异具有统计学意义(P<0.05)。2，ELISA检测结果显示，相对于模型对照组，Aβ3-10-KLH组小鼠脑内的总tau蛋白明显减少，差异具有统计学意义(P<0.05)。3，western-blot结果显示，与模型组小鼠相比，给予Aβ3-10-KLH多肽疫苗处理后的3×TgAD小鼠，tau蛋白在Ser202/Thr205和Thr231位点磷酸化表达显著减少，差异具有统计学意义(P<0.

7、05)。III中国医科大学硕士学位论文结论：以上结果表明，在3×TgAD小鼠出现AD病理的早期，多次接种Aβ3-10-KLH疫苗后，脑内的总tau蛋白明显减少，并且tau蛋白在Ser202/Thr205和Thr231位点磷酸化表达显著减少。关键词：阿尔茨海默病；免疫治疗；Aβ3-10-KLH多肽疫苗；tau蛋白；磷酸化IV中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective:ThemainfeaturesofAlzheimer'sdiseaseareextracellularAβ(β-amyloid)plaques(senileplaques,SP)

8、,theformationofhighlyphosphorylat