锶通过Notch信号通路促进脂肪干细胞成骨分化的实验研究

《锶通过Notch信号通路促进脂肪干细胞成骨分化的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：R62单位代码：10159密级：公开学号：201520287硕士学位论文中文题目：锶通过Notch信号通路促进脂肪干细胞成骨分化的实验研究英文题目：Studyofstrontiumpromoteosteogenicdifferentiationofadipose-derivedstemcellsviaNotchsignalingpathway论文作者：陈欣指导教师：郭澍教授学科专业：整形外科完成时间：2018年2月中国医科大学硕士学位论文锶通过Notch信号通路促进脂肪干细胞成骨分化的实验研究Studyofstront

2、iumpromoteosteogenicdifferentiationofadipose-derivedstemcellsviaNotchsignalingpathway论文作者陈欣指导教师郭澍教授申请学位医学硕士培养单位第一临床学院一级学科临床医学二级学科外科学研究方向整形外科学论文起止时间2017年7月—2018年2月论文完成时间2018年2月中国医科大学（辽宁）2018年2月III中国医科大学硕士学位论文摘要目的：本实验从验证锶（Strontium，Sr）促进脂肪干细胞（adipose-derivedstemcells，

3、ADSCs）成骨分化入手，通过对比Notch信号通路阻断前后成骨标志物碱性磷酸酶（Alkalinephosphatase，ALP）活性，及Notch信号通路相关蛋白Notch胞内结构域（Notchintracellulardomain，NICD）表达情况，探讨Notch信号通路与Sr促进ADSCs成骨分化过程的关系。研究方法：首先对ADSCs进行分离、提取、鉴定，然后将所提取的ADSCs体外培养至P3代后进行成骨诱导，根据实验目的分为如下四组：SrCl2组、SrCl2＋DAPT组、DAPT组、Control组。按分组处理共培养

4、6d后，酶标法检测各组ALP活性，Westernblot检测各组NICD表达情况。结果：1、ALP活性：在P3代ADSCs成骨诱导过程中，同时加入终浓度为100�MSrCl2处理6d时，检测发现SrCl2组ALP活性显著升高，与Control组相比差异具有统计学意义（P<0.01）。当在100�MSrCl2培养液中同时加入DAPT，处理细胞6d时，检测发现ALP活性较SrCl2组下降，SrCl2＋DAPT组与SrCl2组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。单纯加入DAPT组与Control组相比ALP活性差异无统计学意义（

5、P>0.05）。2、Notch信号通路相关蛋白NICD表达情况：在P3代ADSCs成骨诱导过程中，同时加入终浓度为100�MSrCl2处理6d时，检测发现SrCl2组Notch信号通路相关蛋白NICD表达量明显上调，与Control组相比差异具有统计学意义（P<0.01）。当在100�MSrCl2培养液中同时加入DAPT，处理细胞6d时，检测发现NICD蛋白表达量较SrCl2组明显下降，NICD蛋白表达被抑制，SrCl2＋DAPT组与SrCl2组相比差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：锶通过激活Notch信号通路促进脂肪

6、干细胞成骨分化。关键词：锶；脂肪干细胞；Notch信号通路；成骨分化III中国医科大学硕士学位论文AbstractObjective:Toinvestigatetheeffectsofstrontiumontheosteogenicdifferentiationofadipose-derivedstemcells(ADSCs),wecomparedtheactivitiesofAlkalinephosphatase(ALP)aswellastheexpressionofNotchintracellulardomain(NICD

7、)inNotchsignalingpathwaybeforeandafterinhibiting.OurobjectiveistoexplorehowSrinteractswiththeNotchsignalingpathwaytopromotetheosteogenicdifferentiationofADSCs.Methods:ADSCswereisolated,extracted,identified,andtheninducedforosteogenesis.Basedondifferentpurposes,theyw

8、eredividedintothefollowingfourgroups:SrCl2group,SrCl2+DAPTgroup,DAPTgroup,andControlgroup.After6daysofco-culture,theactivityofALPwasmeasur