沙眼衣原体感染与精子凋亡关系的初探

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1、沙眼衣原体感染与精子凋亡关系的初探作者：杨丹，郑立宏，高晓勤，石家齐中国编辑。【摘要】目的：探讨精液沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,CT)感染与精子凋亡的关系，为研究男性不育提供新思路。方法：沙眼衣原体的检测用免疫层析法，采用瑞－姬染色精子，观察精子形态变化；用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧核苷酸原位末端标记法检测凋亡精子。结果：精液CT阳性组精子凋亡率％，正常对照组精子凋亡率为％，组间差异显著。结论：精液CT感染导致精子凋亡率增加，CT感染可能是男性不育的重要原因之一。【关键词】精子；衣原体,沙

2、眼；细胞凋亡；不育，男性［Abstract］Objective:ToinvestigatedtherelationshipofChlamydiatrachomatis(CT)infectionwithspermapoptosisthatmightrelatewithmalesterility.Method:ImmunochromatographymethodwasusedtodetectChlamydiatrachomatis;Conventionalcellmorphologystaining(wrightgims

3、astaining),andterminaldeoxynucleotidyltransferaseenzyme(TdT)mediateddeoxynucleotidylinsituandlabeling(TUNEL)wereadoptedforapoptosisdetection.Results:Spermapoptosisrates±%±%inCTinfectiongroupandnormalfertilitygrouprespectively;Therewasdramaticallydifferencebetwee

4、nthetwogroups(P［Keywords］spermatozoa;chlamydiatrachomatis;apoptosis;infertility,male　　男性生殖道的感染是引起男性不育的重要的因素，在症状或非症状男性生殖道感染中，起关键作用的两种生物体是解脲支原体(mycoplasmaurealytium;MU)和沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis;CT)。近年来，关于MU感染与男性不育的关系已有大量的报道，但CT感染对精子及男性不育的影响报道不多[1～3]，CT感染引起男性不育的机

5、制仍不清楚。据WHO报道，每年全球约5亿人新发性传播疾病，其中的18％是由CT感染造成[4，5]。在女性中，年轻、性活跃者是生殖道CT感染的好发人群，在CT的传播中具有重要作用；在男性中，泌尿生殖道CT感染率不易确定，其原因是CT感染不易作微生物学检查或为无症状者。细胞凋亡是细胞在胞外或胞内信号诱导下发生的主动自杀死亡过程，是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞主动死亡过程。关于精子凋亡与男性不育的关系已有报道[6]。为明确CT感染引起男性不育的机制，于XX年对精液CT感染与精子凋亡之间的关系进行了探索。　　

6、1材料与方法研究对象正常对照组15例，有正常生育史，身体健康，精液CT检测阴性，精液常规正常的自愿捐精子者；年龄24～32岁，平均岁。CT阳性组57例，不育门诊就诊者，为婚后同居2年以上，有正常性生活，未采用任何避孕措施，睾丸、附睾、内分泌、染色体等检查无异常；精液CT检测阳性，年龄24～40岁，平均岁，不育年限2～10年，平均年，其配偶检查无异常。1.试剂TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒由南京凯基生物技术有限公司提供，CT快速免疫检测试剂盒由英国Unipath公司提供，1×Earle’s和10×Earle’s液由Si

7、gma公司提供，percoll原液由南京凯基生物技术有限公司提供，TritonX100由北京拜尔迪生物公司提供。1.研究方法所有研究对象均禁欲3～d，手淫法收集全程精液于无菌玻璃容器中，置于3℃恒温恒湿箱中液化。取液化后的精液ml加入底部有ml5%Percoll液的离心管中，000r/min离心10min，精液细胞主要沉积于精浆和45％Percoll液之间，于精浆与45％Percoll液之间用移液器取50μl×5次精液沉淀入另一组离心管中，加入ml生理盐水，充分混匀；100r/min离心10min弃上清液，加入生理盐

8、水ml；充分混匀后，100r/min离心10min，弃上清液，加入生理盐水ml；充分混匀后，100r/min，离心10min弃上清液，加入ml生理盐水，充分混匀，配成一定浓度的细胞悬液。取制备好的精液细胞悬液50μl分别滴加在普通洁净的玻片和多聚赖氨酸防脱玻片上，用采血针推平，弃去多余的细胞悬液，平放、自然凉干。检测取液化后的精液