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时间:2018-09-02
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1、沙眼衣原体感染与精子凋亡关系的初探作者:杨丹,郑立宏,高晓勤,石家齐【摘要】目的:探讨精液沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,CT)感染与精子凋亡的关系,为研究男性不育提供新思路。方法:沙眼衣原体的检测用免疫层析法,采用瑞-姬染色精子,观察精子形态变化;用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡精子。结果:精液CT阳性组精子凋亡率(33.03±14.98)%,正常对照组精子凋亡率为(9.68±2.78)%,组间差异显著(P<0.01)。结论:精液CT感染导致精子凋亡率增加,CT感染可能是男性不育的重要原因之一。【
2、关键词】精子;衣原体,沙眼;细胞凋亡;不育,男性 [Abstract]Objective:ToinvestigatedtherelationshipofChlamydiatrachomatis(CT)infectionwithspermapoptosisthatmightrelatewithmalesterility.Method:ImmunochromatographymethodwasusedtodetectChlamydiatrachomatis;Conventionalcellmorphologystaining(wrightgimsastaining),an
3、dterminaldeoxynucleotidyltransferaseenzyme(TdT)mediateddeoxynucleotidylinsituandlabeling(TUNEL)wereadoptedforapoptosisdetection.Results:Spermapoptosisrateswere33.03±14.98%and9.68±2.78%inCTinfectiongroupandnormalfertilitygrouprespectively;Therewasdramaticallydifferencebetweenthetwogroups(P
4、<0.01),whichshowedthattheCTinfectionofsemencausedincreaseofspermapoptoticrates.Conclusions:CTinfectionmightbeoneofthemostimportantcausesformaleinfertility. [Keywords]spermatozoa;chlamydiatrachomatis;apoptosis;infertility,male 男性生殖道的感染是引起男性不育的重要的因素,在症状或非症状男性生殖道感染中,起关键作用的两种生物体是解脲支原体(my
5、coplasmaurealytium;MU)和沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis;CT)。近年来,关于MU感染与男性不育的关系已有大量的报道,但CT感染对精子及男性不育的影响报道不多[1~3],CT感染引起男性不育的机制仍不清楚。据WHO报道,每年全球约5亿人新发性传播疾病,其中的18%是由CT感染造成[4,5]。在女性中,年轻、性活跃者是生殖道CT感染的好发人群,在CT的传播中具有重要作用;在男性中,泌尿生殖道CT感染率不易确定,其原因是CT感染不易作微生物学检查或为无症状者。细胞凋亡(apoptosis)是细胞在胞外或胞内信号诱导下发生的主动自杀死亡
6、过程,是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞主动死亡过程。关于精子凋亡与男性不育的关系已有报道[6]。为明确CT感染引起男性不育的机制,于2007年对精液CT感染与精子凋亡之间的关系进行了探索。5 1材料与方法 1.1研究对象 正常对照组15例,有正常生育史,身体健康,精液CT检测阴性,精液常规正常的自愿捐精子者;年龄24~32岁,平均(27.73±2.20)岁。CT阳性组57例,不育门诊就诊者,为婚后同居2年以上,有正常性生活,未采用任何避孕措施,睾丸、附睾、内分泌、染色体等检查无异常;精液CT检测阳性,年龄24~40岁,平均(28.81±3.31)岁,
7、不育年限2~10年,平均(4.37±2.70)年,其配偶检查无异常。 1.2试剂 TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒由南京凯基生物技术有限公司提供,CT快速免疫检测试剂盒由英国Unipath公司提供,1×Earle’s和10×Earle’s液由Sigma公司提供,percoll原液由南京凯基生物技术有限公司提供,TritonX100由北京拜尔迪生物公司提供。 1.3研究方法 所有研究对象均禁欲3~5d,手淫法收集全程精液于无菌玻璃容器中,置于35℃恒温恒湿箱中液化。取液化后的精液2ml加入底部有2ml45%Percol
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