碱法提取川芎多糖的研究

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1、碱法提取川芎多糖的研究【摘要】  目的研究碱法提取川芎多糖的最佳工艺条件。方法采用单因素实验和正交设计研究温度、时间、氢氧化钠溶液浓度、料液比对川芎多糖提取的影响。结果提取的最佳工艺条件为:提取温度为95℃,提取时间为150min,氢氧化钠溶液浓度为/L,料液比1∶200。结论碱法提取川芎多糖提取率较低。【关键词】碱法川芎多糖提取Abstract:ObjectiveTostudytheoptimumprocessofextractingpolysaccharideinLigusticumchuanxiongsinglefactorexperim

2、entandorthogonaldesign,theeffectoftemperature,extractiontime,concentrationofNAOHandratioofsolidtoliquorontheextractionofLigusticumchuanxiongHortpolysaccharidewerestudied.ResultsOptimumtechnologicalconditionareasfollows:extractiontemperature5℃,treatmenttime150min,ratioofsolid

3、toliquorat1∶200andconcentrationofNAOHat/productofpolyssacharidesbyalkalineislower.Keywords:Alkaline;LigusticumchuanxiongHort;Polysaccharide;Extraction  川芎LigusticumchuanxiongHort的根茎为其药用部位,具有抗菌、抗放射线辐射、抑制白血病细胞等作用。川芎含有多种有效成分,但对多糖的研究甚少[1]。多糖是自然界中糖类化合物常见的存在形式,主要来源于植物、动物或微生物。多糖用途各

4、种各样,如降血糖及降胆固醇、治疗便秘、免疫促进等作用[2]。因此,有效提取川芎中的多糖,对进一步研究其结构、作用、功能具有重要意义。碱能够破除植物细胞壁中的β-1,4-糖苷键,同时碱法提取设备要求低,方法简便,原料便宜且利于生产。本文主要研究采用碱来提取川芎中多糖的工艺方法,为川芎多糖的研究提供参考。1材料与仪器样品川芎购于成都中药材市场,干燥,粉碎,过40目筛,待用。试剂氢氧化钠,蒽酮,无水乙醇,硫酸,95%乙醇,冰醋酸,石油醚,氯仿,正丁醇,丙酮,葡萄糖,活性炭,各试剂均为国产分析纯。仪器HH-S数显恒温水浴锅;SHB-3循环水多用真空泵;

5、电热恒温鼓风干燥箱和电热恒温培养箱;电子天平;PHS-25型酸度计;centrifuge5810冷冻离心机;78-1磁力加热搅拌器;722光栅分光光度计;FW80型高速万能试样粉碎机。方法.1多糖含量测定方法蒽酮-硫酸法[3]。.2确定氢氧化钠最适作用浓度分别准确称取川芎1g,加入50ml的0.,0.,0.,0.和mol/L氢氧化钠溶液。室温反应30min,用冰醋酸调溶液pH至7,4℃,000r·min-1离心10min,取上清液,与蒽酮-硫酸试剂反应,在620nm测吸光度。为方便起见,用上清液的吸光度来反映多糖溶出率,下面的实验相同。.3确定

6、最佳作用时间分别准确称取川芎1g加入50ml/L氢氧化钠溶液,32℃缓慢振荡30,60,90,120,150,180min。反应完毕后平衡至室温,离心,取上清液,与蒽酮-硫酸试剂反应,在620nm测吸光度。.4确定最佳作用温度分别准确称取川芎1g,加入50ml/L氢氧化钠溶液,在0,60,80,90,95℃加热反应120min。反应完毕后平衡至室温,离心,取上清液,与蒽酮-硫酸试剂反应,在620nm测吸光度。.5确定最佳作用料液比分别准确称取川芎1g,加入50,100,150,200,250ml的/L氢氧化钠溶液,90℃加热120min。反应完

7、毕后平衡至室温,离心,取上清液,与蒽酮-硫酸试剂反应,在620nm测吸光度。.6正交实验本实验以川芎粉末为研究对象,研究用碱法提取川芎多糖的工艺方法,设定实验的影响因素为4个,每个因素取3个水平。见表1。根据表1的设计在不同浓度氢氧化钠溶液、不同料液比、不同温度下,反应不同时间后放置至室温,离心,取上清液,与蒽酮-硫酸试剂反应,在620nm测吸光度。表1正交实验因素设计.7川芎多糖提取率的测定重复3次。准确称取原料1g,加入200ml/L氢氧化钠溶液,在95℃反应150min。反应完毕后,室温平衡,用冰醋酸调节溶液pH值至7,4℃,000r·m

8、in-1离心10min;上清液蒸发浓缩至50ml,再加入ml石油醚,放置30min后蒸馏为恒重为止;按1:5比例和1:1比例分别向溶液中加氯仿和正丁醇

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