医药学医学毕业论文 erk1-2信号通路在egcg抑制mgc-803细胞增殖中的作用

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学医学论文题目：Erk1/2信号通路在EGCG抑制MGC-803细胞增殖中的作用指导老师：XXX二〇一一年十二月十日【摘要】目的探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)对人胃癌MGC-803细胞株增殖的影响及其分子机制。方法采用MTT法测定EGCG对胃癌细胞增殖的抑制作用；运用免疫细胞化学和免疫印迹技术分别检测c-Myc和磷酸化Erk1/2蛋白表达改变。结果EGCG对MGC-803细胞增殖具有抑制作用，

2、呈浓度依赖性。EGCG处理后免疫细胞化学检测c-Myc蛋白的表达下调，免疫印迹检测磷酸化Erk1/2蛋白表达下调。结论EGCG抑制MGC-803细胞增殖，呈浓度依赖性，其抑制肿瘤细胞增殖的效应与抑制Erk1/2蛋白磷酸化及下调c-Myc蛋白有关。【关键词】EGCG；胃肿瘤；c-Myc；Erk1/2【Abstract】ObjectiveToprobetheeffectsofgreenteaextractepigallocatechin-3-gallate(EGCG)onproliferationofhumangastriccancerce

3、lllineMGC-803anditsmolecularmechanisms.MethodsMTTassaywasusedtotesttheinhibitoryeffectsofEGCGonproliferationinMGC-803cells.Expressionofc-MycinMGC-803cellswasdetectedbyimmunocytochemistry.TheexpressionofphosphoratedErk1/2proteininMGC-803cellswasexaminedusingWesternblotana

4、lysis.ResultsMTTassayhasshownthatEGCGsignificantlyinhibitedproliferationofMGC-803cellsinaconcentrationdependentmanner.Immunocytochemistrydetectedtheexpressiondownregulationofc-MycproteinanalysistreatedwithEGCGfor48hoursinMGC-803cells.Westernblotanalysisconfirmedtheexpres

5、sionofphosphorylatedErk1/2proteinsignificantlydownregulated.ConclusionEGCGinhibitsproliferationofMGC-803cellsinaconcentrationdependentmanneranditsmechanismassociatedwiththedownregulationofc-MycandphosphorylatedErk1/2proteinsexpression.【Keywords】EGCG；gastricneoplasm；c-Myc

6、；Erk1/2近年来，研究开发天然植物药抗肿瘤已成为有前景的新领域，并取得了可喜成绩，如：羟基喜树碱、三尖杉酯碱等对肿瘤细胞有明显抑制作用，并已研制出用于临床的制剂［1，2］。茶是一种由山茶科植物的叶片经一定的工艺制作成的饮料。研究发现绿茶及其提取物具有清除氧自由基、抗氧化、抗突变、抗炎抗病毒和抑制肿瘤生长等众多功效［3～5］。流行病学调查表明常饮绿茶与肿瘤的低发生率有关［6］。表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）是绿茶的主要成分之一。本试验观察EGCG对人低分化胃腺癌MGC-803

7、细胞株生长的影响，初步探讨EGCG抑制胃癌细胞增殖的分子机制。1材料与方法1.1药品试剂EGCG（Sigma公司产品，纯度95%）购自北京鼎国生物技术有限责任公司，EGCG用磷酸盐缓冲液溶解，配成5mg/ml，0.22μm微孔滤膜抽滤除菌，4℃保存；培养基RPMI－1640（Gibco公司产品）；小牛血清（杭州四季青生物工程公司产品）；c-Myc抗体、S-P试剂盒、DAB试剂盒均购自福州迈新公司（美国MAXIN公司产品）；Erk1/2抗体、磷酸化Erk1/2抗体购自基因公司（SantaCruz公司产品）。1.2细胞培养人胃癌MGC-80

8、3细胞株，由中南大学湘雅医学院肿瘤所引进，系山东师范大学培育的人胃低分化黏液腺癌。本所保种、传代，培养基为RPMI－1640，抽滤除菌，临用前加10％小牛血清，细胞培养于37℃、5％体积分数CO2培养箱中。