球菌及检验医学ppt

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1、球菌及检验球菌(coccus)是引起人类化脓性感染主要细菌,又称化脓性球菌(pyogeniccoccus)。常见需氧和兼性厌氧球菌包括:革兰阳性球菌奈瑟菌属Neisseria卡他布兰汉菌B.catarrhalis葡萄球菌属Staphylococcus链球菌属Streptococcus肠球菌属Enterococcus革兰阴性球菌葡萄球菌属Staphylococcus一、分类Bergy’s分类32种、15亚种。常见金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、头状葡萄球菌、人葡萄球菌等。凝固酶分类凝固酶阳性:如金黄色葡萄球菌凝固酶阴性:

2、如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌等噬菌体分型将金黄色葡萄球菌分为5群26型。二、细菌特性(一)形态染色革兰阳性球菌,菌体呈球形,散在或呈葡萄状排列(图1、图2),无鞭毛、无芽胞,少数菌株能形成荚膜。在青霉素等药物诱导下可形成L型(图3)。(图1)(图2)(图3)(二)培养特性多数为兼性厌氧,少数为专性厌氧菌;营养要求不高,最适生长温度37℃,最适pH7.4。多数菌株具有耐盐性,能在含10%~15%NaCl的培养基中生长。在肉汤培养基中生长迅速,呈均匀混浊生长血琼脂平板上:菌落中等大小、圆形凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明,呈金黄

3、色、白色或柠檬色。金黄色葡萄球菌(图1)菌落周围有明显的β-溶血环,腐生葡萄球菌(图3)和大多数表皮葡萄球菌(图2)无溶血环。图1图2图3高盐甘露醇平板上:金黄色葡萄球菌分解甘露醇,呈黄色菌落。高盐卵黄琼脂平板上:金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶,分解卵磷脂,在菌落周围形成一圈白色沉淀环。(三)生化试验触酶试验阳性(图1)。分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气(图2)。金黄色葡萄球菌能分解甘露醇,凝固酶试验及耐热DNA酶试验阳性。(图1)(图2)(四)抗原结构主要有两种抗原:1.葡萄球菌A蛋白(SPA)有种、属特异性。2.多糖抗原有型特

4、异性,存在于细胞壁。三、临床意义(一)致病物质外毒素葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1等。侵袭性酶类血浆凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸酶等2.所致疾病皮肤软组织感染疖、痈、毛囊炎、蜂窝组织炎、伤口化脓、脓肿等。组织器官及全身性感染肺炎、心包炎、骨髓炎、脑膜炎、肾盂肾炎、尿道感染、败血症、脓毒血症等。医院感染伪膜性肠炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染等。毒素性疾病食物中毒烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征四、微生物学检验(一)检验程序(二)标本采集根据病变部位不同,采集相应标本。(三)检验方法1.显微

5、镜检查除血液标本外,其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。脓液直接涂片(革兰染色)血标本培养后涂片(革兰染色)2.分离培养血液标本增菌培养分离培养(血平板)一般标本分离培养(血平板)污染标本(粪便、呕吐物等)分离培养(高盐甘露醇平板)3.鉴定(玻片法)(试管法)血浆凝固酶试验胶乳凝集试验新生霉素敏感试验金黄色葡萄球菌与CNS的鉴别方法金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌血浆凝固酶+--耐热核酸酶+--甘露醇发酵+--SPA+--新生霉素敏感试验SSR葡萄球菌属与微球菌属的鉴别方法葡萄球菌属微球菌属形态葡萄状排列为主,菌体较

6、小四联排列为主,菌体较大O-F试验发酵型氧化型链球菌属Streptococcus一、分类Bergy’s分类40个种和亚种溶血现象分类甲型溶血性链球菌α溶血。草绿色链球菌、肺炎链球菌等乙型溶血性链球菌β溶血。化脓性链球菌、无乳链球菌等丙型链球菌γ溶血。牛链球菌Lancefield血清学分类A、B、C、D……20群,最常见A群三、微生物特性(一)形态染色革兰阳性球菌,菌体呈球型或卵圆性,链状排列,无鞭毛、无芽胞,幼龄菌可形成荚膜。肺炎链球菌常呈瓜仁状或矛头状,呈双排列。兼性厌氧,营养要求较高,普通培养基中不能生长,在血琼脂平板上生长良

7、好。最适温度37℃,最适pH7.4~7.6。菌落小、圆形、凸起,表面光滑湿润,边缘整齐,灰白色、半透明或不透明,周围有α、β、γ三种不同的溶血。(二)培养特性肺炎链球菌:菌落扁平,中央呈脐状凹陷,α溶血。(三)生化试验触酶-,能分解多种糖类和蛋白质。肺炎链球菌分解菊糖,胆盐溶解试验阳性和optochin敏感试验阳性,籍此可与草绿色链球菌相区别。(四)抗原结构1.多糖抗原:群特异性抗原,将链球菌分为20群。对人致病的90%属A群。2.蛋白质抗原:具型特异性,与致病性有关的是M抗原。3.荚膜多糖抗原根据荚膜多糖抗原不同,将肺炎链球菌分

8、为85个血清型。三、临床意义(一)致病物质细菌表面结构M蛋白、脂磷壁酸、荚膜外毒素链球菌溶血素O(SLO)、链球菌溶血素S(SLS)、致热外毒素(红疹毒素)侵袭性酶类链激酶、链道酶、透明质酸酶等A群链球菌(化脓性链球菌)约占临床上链球菌感染的90%

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