三氧化二砷载药微球抗肝癌细胞的实验研究

《三氧化二砷载药微球抗肝癌细胞的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学校代码１０４５９４４３７２０学号或申请号２０１５２２０密级开Ｉｆｋ％专业硕士学位论文三氧化二砷载药微球抗肝癌细胞的实验研究作者姓名：赵国瑞导师姓名：任建庄教对授专业学位名称：影像医学与核医学一临床学院培养院系：第２０１８＼完成时间：年４月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityForthedegreeofMasterExperimentalstudyonanti-hepatomacellstreatedwitharseni

2、ctrioxideloadedwithmicrospheresBy:GuoruiZhaoSupervisor:Prof.JianzhuangRenMedicalImagingandNuclearMedicineTheFirstClinicalCollegeofZhengzhouUniversityApril2018摘要三氧化二砷载药微球抗肝癌细胞的实验研究研究生：赵国瑞导师：任建庄影像医学与核医学郑州大学第一附属医院河南郑州450052摘要目的：制备三氧化二砷（ATO）载药微球并研究其缓释特性，以肝癌细胞株

3、HepG2、MHCC97H为研究对象，从细胞增殖、凋亡、侵袭以及VEGF、MMP9mRNA表达水平等方面研究ATO及ATO载药微球在体外对肝癌细胞的作用，为后期动物实验研究奠定理论基础，以期为肝癌的综合介入治疗提供新的思路和理论依据。材料和方法：1.体外制备ATO载药微球，计算其载药量（LE%）和包封率（EE%），以及释药实验了解ATO载药微球的药物缓释规律；2.CCK8检测细胞增殖不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球对肝癌HepG2、MHCC97H细胞作用不同时间(0、12

4、、24、48、72、96h)增殖抑制的影响；3.侵袭实验观察不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理48h后对HepG2、MHCC97H细胞侵袭的影响；4.双染法检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理48h后细胞凋亡；5.RT-PCR检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理24h、48h后VEGF，MMP9mRNA表达水I摘要平；6.Wes

5、ternBlot检测HepG2、MHCC97H细胞经不同浓度(0、5、10、15、20ng/ml)ATO及ATO载药微球处理24h、48h后VEGF蛋白表达量。结果：1.CalliSpheres®可载药栓塞微球（100-300μm）对ATO的最佳载药时间为40min；1g粒径为100-300μm的载药微球，投入60mg（10mg/ml，6ml）的ATO，混合均匀后40min，可检测其内能荷载13.8±1.49mgATO；包封率为25.0±1.34%；2.CalliSpheres®载ATO栓塞微球（100-3

6、00μm）体外药物释放显示30min内呈突释特征，突释量约达药物总量的31.42%，48h时释放量达47.17%；3.ATO组及ATO载药微球组在同一时间内，浓度为0~20ng/ml，随ATO浓度升高，HepG2、MHCC97H细胞的增殖抑制率表现为逐渐升高，两组组内比较差异有统计学意义（P＜0.05）；ATO组及ATO载药微球组在同一浓度内，随作用时间延长，HepG2、MHCC97H细胞的增殖抑制率表现为逐渐升高，但两组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；4.ATO载药微球与单药ATO一样，随浓度增加

7、其抑制HepG2、MHCC97H细胞侵袭能力明显加强；5.同浓度的ATO载药栓塞微球和单药ATO在同等时间内同样能促进HepG2、MHCC97H细胞凋亡；6.同浓度的ATO载药栓塞微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制促血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶9（MMP9）水平。结论：1.CalliSpheres®载药栓塞微球（100-300μm）可加载一定量带正电荷的ATO，具有药物缓释能力；2.同浓度的ATO载药微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制HepG2、MHCC97H细胞增殖，并促进HepG

8、2、MHCC97H细胞凋亡；3.同浓度的ATO载药微球较单药ATO在同等时间内同样能抑制VEGF、MMP9表达。关键词：三氧化二砷，载药微球，肝细胞癌IIAbstractExperimentalstudyonanti-hepatomacellstreatedwitharsenictrioxideloadedwithmicrospheresMedicalImagingandNuclearMedicineTheFir