多重pcr试剂盒论文：多重pcr试剂盒 食源性致病菌 大肠埃希o157h7 单增李斯特菌 志贺氏菌

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1、多重PCR试剂盒论文：食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用【中文摘要】近年来,食品安全事件频发,不仅影响到人们的生活、工作和健康,更是关系到国计民生的大事。在各种食物中毒中,细菌性食物中毒则是食物中毒的主要因素,常见的食源性致病菌包括沙门氏菌属、变形杆菌属、副溶血性弧菌、葡萄球菌及毒素、肉毒梭菌毒素、蜡样芽胞杆菌、韦氏梭菌、弯曲杆菌、李斯特菌、致病性大肠杆菌、结肠炎耶尔森氏菌、志贺氏菌属。本文针对在我国食物中毒中最常见的致病菌进行研究,寻求食物中毒诊断及食品检测的有效方法。本文涉及的食源性致病菌蜡样芽胞杆菌(Bacillus

2、cereus)、沙门氏(Salmonellaspp)、大肠埃希氏菌0157:H7(E.coli-0157:H7)、志贺氏菌(Shigellaspp)、金黄色葡萄球菌(Sta.aureus)、单增李斯特氏杆菌(Listeriamonocytogenes)等菌属或菌。通过大量的文献参考和实验,我们经过筛选挑取种或属间特异的序列及相应引物,然后用这些引物对各种细菌的基因组序列进行PCR扩增检测其特异性,最终决定出用于检测的最优的基因及沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌溶血素hlyA基因和金黄色葡萄球菌耐热核酸酶Nuc基因、志贺氏菌的侵.

3、..【英文摘要】Theproblemoffoodsafetyisbecomingmoreawaredandmoreseriousinmanycountries.It’sassociatedcloselywiththenationaldevelopmentandpeople’shealthandhappiness.Theimmediateandpropertreatmenttopatientswhohaveeatencontaminatedfoodisimportantaswellasthefoodsaftytestingbefore

4、foodaresoldoreatenbypeople.What’surgentnowishowtodetectpathogenicbacteriainfoodandpatients.Todevelopaneffectiveandpracticalwaytodetectfoodbornpathogensinthisstudy,sixs...【关键词】多重PCR试剂盒食源性致病菌大肠埃希O157:H7单增李斯特菌志贺氏菌家禽屠宰市场街道零售商【英文关键词】MultiplexPCRdetectionkitPathogensEcoli-O1

5、57:H7L.monocytogenesShigellaChickenabattoirsstreetvendors【索购全文】联系Q1：138113721Q2：139938848【目录】食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用中文摘要7-9Abstract9-10前言11-261食品安全概述11-122本文所涉及的食源性致病菌12-183致病菌快速检测方法18-253.1免疫学技术18-203.2代谢学技术20-213.3分子生物学技术213.4生物传感技术21-223.5PCR技术22-254肉及肉制品中食源性致病菌PCR检测

6、研究现状25-26研究内容26-571材料26-302方法30-572.1食源性致病菌的培养、分离和鉴定30-472.1.1沙门氏菌的培养、分离和鉴定30-352.1.2志贺氏菌的培养、分离和鉴定35-372.1.3单核细胞增生李斯特氏菌的培养、分离和鉴定37-402.1.4金黄色葡萄球菌的培养、分离和鉴定40-422.1.5大肠埃希氏菌0157:H7的培养、分离和鉴定42-452.1.6蜡样芽孢杆菌的培养、分离和鉴定45-472.2菌体DNA的提取47-492.3目的基因的选择和引物的设计49-502.4阳性对照模板的制备50-5

7、42.5多重PCR扩增条件的优化542.6多重PCR体系的特异性54-552.7多重PCR体系灵敏度55-562.8试剂盒组装及重复性、稳定性和保存期试验562.9山东泰安禽肉市场（屠宰市场，零售商）致病菌流行情况监测调查56-573结果57-693.1DNA模板的提取方法的比较573.2多重PCR引物设计结果573.3多重PCR调试结果57-593.4多重PCR体系特异性59-613.5多重PCR体系的灵敏度61-623.6食品模型试验结果62-653.7试剂盒的组装65-663.8试剂盒重复性、稳定性和保存期试验结果66-673

8、.9山东泰安禽肉市场（屠宰市场，零售商）致病菌流行情况监测调查结果67-694讨论69-73结论73-74参考文献74-81攻读硕士期间研究成果81-82致谢82-83硕士学位论文内容简介及自评83