Bcl-2、Bax及NF-κB在艾迪注射液诱导食管癌凋亡中的作用.doc

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1、Bcl-2、Bax及NF-κB在艾迪注射液诱导食管癌凋亡中的作用【关键词】艾迪注射液艾迪注射液是一种目前临床常用的中药复方精制剂，其主要成分是：黄芪、人参、刺五加、斑蝥等，有益气活血、消瘀散结、清热解毒、扶正化瘀的功效。临床已经证实艾迪注射液对食管癌、原发性肝癌、胃癌、大肠癌等多种肿瘤有明显的疗效［1，2］。近年来，有研究表明艾迪有诱导癌细胞凋亡的作用［3］，Bcl-2、Bax及NF-κBp50是与凋亡调控有关的基因，笔者应用组织芯片技术，采用免疫组化法检测Bcl-2、Bax及NF-κBp50在艾迪组与对照组食管癌组织中的表达，以进一步探索艾迪注射液诱导食管癌细胞凋亡的途径。1材

2、料与方法1.1研究对象本试验研究设计为回顾性研究，共观察江苏省中医院胸外科2003年8月～2005年12月收治的食管鳞状细胞癌手术病人46例，其中艾迪组23例，对照组23例。所有病例术前均经电子内镜及组织病理学检查证实为食管鳞状细胞癌，无远处转移，术前未经放化疗或免疫治疗。1.2临床试验用药及处理方法艾迪注射液：生产厂家为贵州益佰制药有限责任公司，批准文号为国药准字Z52020236。艾迪组术前给予5%葡萄糖注射液500ml+艾迪注射液80ml静滴，每月1次，治疗7天;对照组不用艾迪注射液，其他处理方法相同，均行食管癌根治、胸腹淋巴结清扫术。1.3主要试剂Bcl-2、Bax、NF

3、-κBp50由北京中杉金桥生物技术有限公司提供；即用型快速免疫组化MaxVisionTM试剂盒由福州迈新生物公司提供。1.4试验方法1.4.1标本收集收集2003年8月～2005年12月南京中医药大学附属医院病理科归档食管鳞状细胞癌蜡块，回顾性分析其病历资料，符合艾迪组要求的23例，对照组23例。1.4.2常规病理学检查观察肿瘤的部位、大小、浸润深度、大体类型、淋巴结转移情况，常规HE染色。1.4.3方法每一例均行光镜观察。制作组织芯片，直径均为2mm，46例食管鳞状上皮细胞癌，每例一个组织芯，加上阴性对照（正常食管鳞状上皮），共计47个组织芯。免疫组化染色，检测Bcl-2、Ba

4、x、NF-κBp50。51.5分析方法Bcl-2、Bax、NF-κBp50评分标准是根据食管癌组织中免疫组织化学染色的深浅和阳性细胞百分数进行评分:阳性细胞百分数<25%，浅棕色为阴性；阳性细胞百分数>25%，棕色为阳性。1.6统计学分析两组样本均值的比较采用t检验；采用SPSS12.0统计分析软件进行有关检验，给出检验统计量及其相对的P值，用Fisher精确概率法时直接给出P值。以P≤0.05作为有显著性统计学意义，以P≤0.01作为有高度显著统计学意义。2结果2.1两组病例基本情况比较2.1.1性别、年龄艾迪组男13例，女10例；对照组男17例，女6例；两组差异无

5、统计学意义（P>0.05）。艾迪组平均年龄（59.09±9.075）岁，对照组为（57.48±8.805）岁，两组差异无统计学意义（P>0.05）。2.1.2肿瘤部位及长度艾迪组肿瘤位于食管中段14例，下段9例；对照组中段16例，下段7例，两组差异无统计学意义（P>0.05）。艾迪组肿瘤长度0～3cm为13例，3～6cm为10例；对照组0～3cm为11例，3～6cm为12例，两组差异无统计学意义（P>0.05）。2.1.3肿瘤分化、浸润深度、淋巴结转移艾迪组低分化2例、中低分化5例、中分化8例、中高分化8例、高分化0例；对照组低分化3例、中低分化0例、中分

6、化10例、中高分化8例、高分化2例，两组差异无统计学意义（P>0.05）。艾迪组肿瘤浸润深度位于黏膜层1例、黏膜下层3例、肌层10例、纤维膜9例；对照组黏膜层0例、黏膜下层1例、肌层9例、纤维膜13例，两组差异无统计学意义（P>0.05）。艾迪组有淋巴结转移9例，对照组有淋巴结转移10例，两组差异无统计学意义（P>0.05）。2.2艾迪对食管癌Bcl-2和Bax表达的影响艾迪组Bcl-2阳性率为39.1%（9/23），对照组的阳性率为78.3%（18/23），两组比差异较有统计学意义（P＜0.05）;艾迪组Bax阳性率为56.5%（13/23），对照组的阳性率为

7、17.4%（4/23），两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。2.3艾迪对食管癌NF-κBp50表达的影响艾迪组NF-κBp50阳性率为47.8%（11/23），对照组的阳性率为87.0%（20/23），两组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）2.4NF-κBp50、Bcl-2在食管癌中表达的相关性结果见表1，NF-κBp50、Bcl-2有明显的相关性，呈正相关。表1NF-κBp50、Bcl-2在食管癌中表达的相关性注：rs＝0.358，χ2=5.906，P＝0.015，P