乙肝患者血清病毒标志物和病毒含量之间相关性探索.doc

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1、乙肝患者血清病毒标志物和病毒含量之间相关性探索作者：张德,刘淑会,陶谦,李继广【关键词】乙型肝炎病毒［摘要］目的：探讨乙肝患者血清病毒标志物和病毒含量之间的关系，探索荧光定量PCR在HBVDNA检测方面的临床价值。方法：采用FQPCR和ELISA法分别检测503例血清标本。结果：503例患者血清中，乙型肝炎病毒的阳性率和乙型肝炎病毒血清标志物不同组合之间存在一定的差异。大三阳的病毒检测率为100％，小三阳的检测率为53．4％，其他组合参差不一。结论：乙肝患者血清标志物和病毒含量之间存在着一些必然的相关性，通过

2、探索其规律性的联系，更好地指导临床对疾病的正确诊断和用药。［关键词］乙型肝炎病毒；HBVDNA；荧光定量聚合酶链反应；ELISA乙型肝炎病毒血清标志物是临床判断患者病情和传染性的重要依据之一，随着分子生物学的发展，荧光定量PCR检测技术逐渐应用于临床诊断和治疗。笔者经过检测乙肝患者血清病毒标志物和其血清中病毒的含量，对结果进行多次深入地分析，希望和同道共同探讨出一些规律性的东西，更好地服务于临床。1材料和方法1.1材料标本来源：503份乙肝患者血清。时间：2004年8月至2005年6月。患者来源：来于聊城市第

3、二人民医院就诊的门诊病人和住院病人。年龄为8岁～73岁，男性289名，女性为214名。1.2乙肝病毒标志物的检测仪器：意大利产，型号为ALISEI，采用ELISA法，选用上海科华实业技术公司试剂。1.3HBVDNA定量检测采用荧光定量PCR技术，试剂采用深圳匹基生物技术开发公司，仪器为美国产MJOPTICONⅡ荧光定量PCR分析仪，标准曲线由四点形成，标准品含量分别为5．0E+07copies/ml；5．0E+06copies/ml、5．0E+05copies/ml、5．0E+04copies/ml，测定循环

4、数CT为40，以CT值为横坐标，以HBVDNA的对数值为纵坐标，制定标准曲线。1.4计算方法定量结果采用求对数值的方法计算病毒的拷贝数，统计学方法采用t检验。2结果3根据乙型肝炎病毒血清标志物的不同情况，共分成了九组，同时结合HBVDNA的量，通过列表进行对比，借以找出乙型肝炎病毒血清标志物和HBVDNA数量之间的相关性。表1：检出乙型肝炎病毒标志物和HBVDNA的含量之间的关系测定（略）3讨论大三阳和HBVDNA大三阳指的是“表面抗原”、“e抗原”和“核心抗体”同时阳性，表1中第一组即为大三阳。当病人检测是

5、“大三阳”时，IIBVDNA阳性率可达100%，定量结果对数均值可高达7．1，通常说明乙肝病毒在人体内复制比较活跃，即HBVDNA浓度较高，因此大三阳的病人具有较强的传染性。小三阳和HBVDNA小三阳指的是“表面抗原”、“e抗体”和“核心抗体”同时阳性，表1中第二组即为小三阳。当病人检测是“小三阳”时，HBVDNA阳性率为53.4%，定量结果对数均值为4．6。和第一组相比，HBVDNA浓度较低，乙肝病毒在人体内复制较弱(P<0.05)。HBsAg、HBeAg转阴和HBsAb的出现是机体清除乙型肝炎病毒的

6、标志。表1中第三组、第六组和第七组没有一例在血清中测出乙型肝炎病毒，说明HBsAb在清除乙型肝炎病毒时起了关键性作用。第五组HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBeAb(+)、抗HBc(+)和第八组HBsAg(+)、HBsAb(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)所检测患者全部查出HBVDNA，阳性率可达百分之百。提示在病毒感染的过程中，大三阳是感染的起始模式，感染的清除首先表现为E系统的转换，一般认为HBeAg转阴和HBeAb出现是机体清除乙型肝炎病毒的标志。但HBeAb的出现并不意味着病毒复制的停止或

7、减弱，如二组即小三阳组的病毒阳性率高达53．4％，第五组的阳性率可达百分之百。由此可见HBVDNA与HBeAg存在一定的一致性。有报道分析说HBVDNA与HBeAg二者在量上呈直线相关关系。表1中第四组所示，即使在血清标志物完全为阴的情况下，也不能完全排除乙型肝炎病毒的感染。主要原因是患者处于感染初期，或低水平的HBVDNA感染，或由于某些原因导致血清标志物消失或浓度偏低，ELISA法无法测出乙肝病毒血清标志物，但聚合酶链反应灵敏度高，可检出低浓度的HBVDNA，为乙型肝炎的早期诊断提供灵敏和准确的数据。综上

8、所述，ELISA和PCR两种检测方法均可检测HBV的感染与复制，ELISA方法是诊断乙肝病毒感染的传统手段，检测的是人体对乙肝病毒的免疫反应状态。而荧光定量PCR方法可定量检测HBVDNA的浓度，且能避免产物间的交叉污染，真实反映HBV的感染和复制状况，二者各有其长，又有着必然的联系，只有将两种检测方法有机地结合起来，才能准确地反应HBV在人体内的复制情况和传染性，正确地指导临床对疾病的诊断和用药。