葛根素预处理在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的抗氧化作用.doc

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1、葛根素预处理在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的抗氧化作用【摘要】目的观察葛根素预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的防护作用。方法雄性SD大鼠，建立肝脏缺血再灌注模型(HIR)。随机分为假手术组、HIR组和HIR-葛根素预处理组。黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸比色法分别测定肝组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化，同时分析NO含量的改变。结果肝脏缺血再灌注损伤后，与假手术组比较，肝组织中MDA活性及NO含量均显著增加，而SOD活性显著降低；经40mg/kg剂量的葛根素预处理7d后，与模型组相比，肝组织中MDA活性及NO含量

2、显著降低，而SOD活性增高。结论葛根素预处理对大鼠缺血再灌注肝脏损伤有一定的保护作用。　　【关键词】葛根素；缺血再灌注；肝脏；抗氧化　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheantioxidationeffectofkakkoneinonhepaticischemiareperfusioninjuryinrats．MethodsMaleSprague-Dawleyratswererandomlydividedintothreegroups:pseudo-operationnormalcontrolg

3、roup，hepaticischemiareperfusioninjurymodelgroup,kakkoneingroup.Afterhepaticischemiaandreperfusion,toanalysisthelevelofMDA,SODandNOactivity.ResultsAfterhepaticischemiareperfusion,theMDAandNOlevelincreased,andtheSODactivitydecreasedobviouslycomparingwiththenormalgroup;Co

4、mparingtothehepaticischemiareperfusioninjurymodelgroup,theMDAandNOleveldecreased,andtheSODactivityincreased.ConclusionsTheapigeninhaveaprominentprotectiveeffectonhepaticischemiareperfusioninjuryinrats．　　【Keywords】Kakkonein;Ischemiareperfusion;Liver;Antioxidation　　　　肝

5、脏缺血再灌注损伤是肝脏缺血后重获血流灌注或氧供后，引起或加重肝脏缺血缺氧造成的损伤，是临床肝脏手术过程中常见的一种病理生理变化，可产生氧自由基，引起钙超载等改变，损伤肝细胞超微结构，影响肝脏的功能[1]。因此，如何减轻或防治肝脏缺血再灌注损伤的程度，是目前临床肝脏手术中研究的热点。NO能与含Fe2+血红素基团的蛋白质相结合，产生较稳定的亚硝酰基血红素蛋白复合物。NO与超氧自由基反应生成的过氧亚硝酸根离子，能使各种含铁-硫酶失活，阻断细胞内能量合成及DNA复制，影响细胞的线粒体功能，产生细胞毒性作用[2]。葛根素是一种天然多酚类化合物

6、，结构类似雌二醇，具有某些雌激素样作用，研究发现它是一种天然的抗氧化剂，具有明显的抗氧化作用，可消除体内过多的自由基，保护细胞膜的结构[3]。本实验通过建立大鼠肝脏局部缺血再灌注模型，经葛根素预处理，观察肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性及NO含量的改变，从而探讨葛根素对大鼠缺血再灌注肝脏损伤的保护作用。　　1资料与方法　　1.1资料雄性SD大鼠，体质量190～210g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供；MDA、SOD和NO试剂盒由南京建成生物工程研究所提供；葛根素购自中国药品生物制品检定所。2　

7、　1.2动物分组与模型建立大鼠肝脏缺血再灌注模型建立方法[4]：实验动物，术前24h禁食，自由饮水，乙醚吸入麻醉，腹正中切口，暴露十二指肠韧带及肝门部，分别夹闭肝动脉和门静脉，造成70％肝脏缺血，70min后去除血管夹，恢复肝脏血流。　　实验动物随机分为3组：①假手术组，大鼠给予开腹及暴露肝蒂处理，不阻断肝脏血流；②模型组，夹闭肝动脉和门静脉，缺血70min后，再灌注120min；③葛根素预处理组，术前7d，每天口服灌胃40mg/kg的葛根素，按上述方法建立大鼠肝脏缺血再灌注模型，阻断肝动脉和门静脉，缺血70min后，再灌注120

8、min。　　1.3肝脏组织中MDA、SOD活性及NO含量的变化取出肝脏组织，冰浴中操作，加入1mol/L的HCl，碾磨制成组织匀浆，低温离心机，离心15min，3000转/min，取上清液。参照按试剂盒说明，分别用黄嘌呤氧化酶法测定