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《大鼠肢体缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用机制的初步探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、大鼠肢体缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用机制的初步探讨张冰1通讯作者谭莉莉2杨永丰1张建军1瞿海龙1田古发11河北大学附属医院急诊科河北保定071000;2河北大学附属医院贵宾病房河北保定071000【摘要】目的观察人鼠肢体缺血预处理(limbischemicpreconditioning,UPC)对其肝脏缺血再灌注(ischemiareperfusion,IR)损伤的保护作用及可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠50只，随机分为对照组(control，C)、假手术组(shamoperation，SO)、缺血再灌注组(IR)、肝脏缺血预处理组(hepaticische
2、micpreconditioning,HIPC)、肢体缺血预处理组(limbischemicpreconditioning,LIPC)5组，分别检测ALT、AST水平;脱氧核iff酸末端转移酶介导的缺门末端标记法(terminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)检测肝组织凋亡细胞并计算凋亡指数(apoptosisindex,AI｝。结果IR组、HIPC组、UPC组血清ALT、AST水平较C组、SO组显著升高(P<O05)。其屮IR组转氨酶升高最明显，与HIPC组、UPC组比较差异
3、均有统计学意义(P<O05)。而HIPC与LIPC两组比较差异无统计学意义(P>O05)。凋亡细胞在SO组罕见，IR组、HIPC组和UPC组都有明显增加。其屮IR组凋亡指数增加最明显，与HIPC组、LIPC组比较差异均有统计学意义(P<O05)。HIPC与UPC两组比较差异无统计学意义(P>O05)。结论肢体缺血预处理与肝脏缺血预处理均可减轻肝脏缺血再灌注损伤，其保护作用机制与抑制肝细胞凋亡有关。【关键词】缺血再灌注；预处理；肝脏：肢体；凋亡【中图分类号】R3334【文献标识码】B【文章编号】16748999(2013)12018802缺血预处理(i
4、schemicpreconditioning,IPC)是组织或器官在经过1次或多次短暂缺血后，对随后长吋间的缺血产生耐受的现象。随着缺血预处理研究的进一步深入，发现“远隔器官缺血预处理”现象，即通过对远离靶器官的组织或器官预先进行缺血预处理，同样能够减轻靶器官的缺血再灌注损伤。本研究预先对两组大鼠分别进行肝脏原位缺血预处理和肢体缺血预处理，随后对肝脏实施缺血再灌注，之后对比各组血清转氨酶变化，观察肢体缺血预处理这一远隔器官预处理方式对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用；通过计算肝细胞凋亡指数，初步探讨远隔器官缺血预处理的保护作用机制。1材料与方法11主要试剂AST、ALT检测试剂
5、盒购于南京建成生物工程研究所；TUNEL检测试剂盒购于Roche公司。12实验动物及分组清洁级雄性SD大鼠50只，体重200250g,由河北大学实验动物中心提供，动物合格证号：SCXK(冀)20081003。50只大鼠称重，编号，随机分为5组，每组10只：对照组(control，C)、假手术组(shamoperation,SO)、缺血再灌浊组(ischemiareperfusion，IR)、肝脏缺血预处理组(hepaticischemicpreconditioning,HIPC)、肢体缺血预处理组(limbischemicpreconditioning,UPC)。13动物模
6、型的制备:5组大鼠术前12小吋均禁食，可自由饮水。①C组:3%戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉(40mg/kg),经心脏采集血样待生化检测。②SO组：麻醉同C组，上腹正中开腹，向头侧牵开肝脏，暴露并游离肝十二指肠韧带，腹腔内注射庆大霉素lml、生理盐水2ml，关腹。③IR组：麻醉、开腹、游离肝十二指肠初带均同SO组，以血管夹夹闭肝十二指肠韧带，致肝缺血30min,然后松开血管夹恢复肝脏血流，腹腔内注射庆大霉素lml、生理盐水2ml,关腹。④HIPC组：麻醉、开腹、游离肝十二指肠韧带均同SO组，以血管夹夹闭肝十二指肠初带，致肝缺血10min,再松开血管夹恢复肝脏血流10min,如此反
7、复3次。预处理后随即完成肝脏缺血再灌注，步骤与IR组同。⑤UPC组：麻醉冋SO组。两侧腹股沟区备皮、消毒、铺巾。切皮、游离两侧股动脉，以两枚血管夹同吋夹闭两侧股动脉，致两侧后肢缺血lOmin,再松开血管夹恢复后肢血流lOmin,如此反复3次。预处理组后随即开腹行肝脏缺血再灌注，步骤与IR组同。14标本的制SO组、IR组、HIPC组、LIPC组关腹6h后再次麻醉，经心脏采集血样置于70°C冰箱保存待生化检测；开腹取肝右叶切成约5mm×5mm×lmm的组织块置于4%多聚甲酸溶液中固定，待组织学检
