兔肾VX2移植瘤模型的建立及其超声显像检测.doc

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1、兔肾VX2移植瘤模型的建立及其超声显像检测作者:王子明,佘军军,程伟,李小鹏,李谦,车向明,韩水平,白卓亚【关键词】超声技术摘要:目的比较建立兔肾VX2移植瘤模型的不同方法的优劣。方法分别用瘤液穿刺法、瘤块液种植法、瘤块包埋法建立兔肾VX2癌模型。采用超声技术动态检测肿瘤体积及CDFI的变化,确定该模型最佳实验干预时段及其血流参数范围。比较各自的成瘤率;观测肾脏肿瘤的大小及其回声、瘤内血管生成以及血流阻抗等指标。结果瘤块包埋法可建立稳定的兔肾VX2移植瘤模型。B超可以实时、准确、方便的监测肿瘤体积及血流动力学

2、变化。结论兔肾VX2移植瘤是一种造模方法简便且成瘤率高的肾癌动物模型,采用超声技术能精确、无创的动态监测肿瘤体积变化及血流特征。  关键词:兔;VX2肾癌;超声技术  EstablishingrabbitVX2carcinomamodelandmonitoringit withcolorDopplerenergyultrasoundtechnique  ABSTRACT:ObjectiveTocomparetheadvantagesanddisadvantagesofseveralmethodstoestab

3、lishtherabbitVX2carcinomamodel.MethodsUltrasoundtechniquewasusedtoconfirmthebestperiodsofexperimentontherabbitVX2carcinomamode.TherabbitVX2carcinomamodelwasestablishedbydifferentways,suchastumorcellsfluidsandtumorblocktransplantingguidedbyBultrasound,tumorb

4、locktransplantingbyoperationtocomparetheirsuccessfulrate.Kidneysizeandotherindexswereobserved.ResultsTumorblocktransplantingbyoperationwasthemostsuccessfultoestablishasteadymodel.ConclusionTherabbitVX2carcinomaisoneofthebiggestanimalmodelsforkidneycarcinoma

5、sexperimentalresearch;itissteadyandeasytobemanipulated.  KEYWORDS:rabbit;VX2kindeycarcinoma;Bultrasound  小鼠移植瘤模型常被用于肾癌的实验研究,但动物体型小、抗干预能力差,肿瘤原发部位不在肾脏并且成瘤率低,因而其应用受到限制。VX2肿瘤是由Shope病毒诱发的兔可移植性肿瘤,可接种到不同器官而成兔移植瘤模型。我们旨在寻找建立兔肾VX2移植瘤模型的最佳方法,用B超追踪肿瘤生长特征,确定最佳实验干预时段,为评价

6、肾癌的基础研究及治疗疗效提供依据。5  1材料与方法  1.1实验材料新西兰大白兔45只,体质量2.0-2.5kg,雌雄不限,由西安交通大学医学院实验动物中心提供。VX2瘤株由第四军医大学提供。B超检查用美国Acuson512型彩色多普勒超声诊断仪。日本HitachiH600型电子透射显微镜。  1.2VX2瘤细胞的复苏与培养按照一般细胞培养技术对冰冻VX2瘤细胞悬液进行复苏后离心5min(800r/min),除去上清液,加入PBS液用玻璃棒搅匀。取悬液置于RPMI1640培养液中,台盼蓝染色并做死、活细胞计

7、数,将培养液调制成107/mL活细胞浓度。  1.3动物模型建立将45只兔随机分为A、B、C三组,每组各15只。A组采用瘤细胞悬液接种法。兔清醒状态下B超引导穿刺右肾下级并注入瘤细胞液1mL。B组采用瘤块液穿刺种植法。先将上述瘤细胞液2mL分别注入兔双侧后腿皮下即成为荷瘤种兔,两周后肿瘤形成直径约2cm大小时完整切取,去除包膜及坏死组织,剪取肿瘤边缘生长旺盛部分置于Hanks液中。尽量剪碎约1mm,制成瘤细胞悬液。兔麻醉状态下B超引导16G穿刺针进入右肾下级,注入瘤细胞悬液0.3mL。C组采用瘤块包埋法。兔麻

8、醉后俯卧位固定,取右12肋缘下切口3-4cm,暴露右肾下级后用眼科镊穿刺1.5cm深隧洞。在冰块上将前述荷瘤组织剪为直径0.2-0.3cm的小块后植入。明胶海绵压迫止血,生物胶填塞。各组操作均于1.5h内完成。实验动物肌注青霉素40万单位,连续3d。实验期内无1例兔感染或死亡。  1.4肿瘤的超声检查用AcusonSequoia512型超声仪,15L8W宽频线阵探头(频率为8.0-13.0MHz),

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1、兔肾VX2移植瘤模型的建立及其超声显像检测作者:王子明,佘军军,程伟,李小鹏,李谦,车向明,韩水平,白卓亚【关键词】超声技术摘要:目的比较建立兔肾VX2移植瘤模型的不同方法的优劣。方法分别用瘤液穿刺法、瘤块液种植法、瘤块包埋法建立兔肾VX2癌模型。采用超声技术动态检测肿瘤体积及CDFI的变化,确定该模型最佳实验干预时段及其血流参数范围。比较各自的成瘤率;观测肾脏肿瘤的大小及其回声、瘤内血管生成以及血流阻抗等指标。结果瘤块包埋法可建立稳定的兔肾VX2移植瘤模型。B超可以实时、准确、方便的监测肿瘤体积及血流动力学

2、变化。结论兔肾VX2移植瘤是一种造模方法简便且成瘤率高的肾癌动物模型,采用超声技术能精确、无创的动态监测肿瘤体积变化及血流特征。  关键词:兔;VX2肾癌;超声技术  EstablishingrabbitVX2carcinomamodelandmonitoringit withcolorDopplerenergyultrasoundtechnique  ABSTRACT:ObjectiveTocomparetheadvantagesanddisadvantagesofseveralmethodstoestab

3、lishtherabbitVX2carcinomamodel.MethodsUltrasoundtechniquewasusedtoconfirmthebestperiodsofexperimentontherabbitVX2carcinomamode.TherabbitVX2carcinomamodelwasestablishedbydifferentways,suchastumorcellsfluidsandtumorblocktransplantingguidedbyBultrasound,tumorb

4、locktransplantingbyoperationtocomparetheirsuccessfulrate.Kidneysizeandotherindexswereobserved.ResultsTumorblocktransplantingbyoperationwasthemostsuccessfultoestablishasteadymodel.ConclusionTherabbitVX2carcinomaisoneofthebiggestanimalmodelsforkidneycarcinoma

5、sexperimentalresearch;itissteadyandeasytobemanipulated.  KEYWORDS:rabbit;VX2kindeycarcinoma;Bultrasound  小鼠移植瘤模型常被用于肾癌的实验研究,但动物体型小、抗干预能力差,肿瘤原发部位不在肾脏并且成瘤率低,因而其应用受到限制。VX2肿瘤是由Shope病毒诱发的兔可移植性肿瘤,可接种到不同器官而成兔移植瘤模型。我们旨在寻找建立兔肾VX2移植瘤模型的最佳方法,用B超追踪肿瘤生长特征,确定最佳实验干预时段,为评价

6、肾癌的基础研究及治疗疗效提供依据。5  1材料与方法  1.1实验材料新西兰大白兔45只,体质量2.0-2.5kg,雌雄不限,由西安交通大学医学院实验动物中心提供。VX2瘤株由第四军医大学提供。B超检查用美国Acuson512型彩色多普勒超声诊断仪。日本HitachiH600型电子透射显微镜。  1.2VX2瘤细胞的复苏与培养按照一般细胞培养技术对冰冻VX2瘤细胞悬液进行复苏后离心5min(800r/min),除去上清液,加入PBS液用玻璃棒搅匀。取悬液置于RPMI1640培养液中,台盼蓝染色并做死、活细胞计

7、数,将培养液调制成107/mL活细胞浓度。  1.3动物模型建立将45只兔随机分为A、B、C三组,每组各15只。A组采用瘤细胞悬液接种法。兔清醒状态下B超引导穿刺右肾下级并注入瘤细胞液1mL。B组采用瘤块液穿刺种植法。先将上述瘤细胞液2mL分别注入兔双侧后腿皮下即成为荷瘤种兔,两周后肿瘤形成直径约2cm大小时完整切取,去除包膜及坏死组织,剪取肿瘤边缘生长旺盛部分置于Hanks液中。尽量剪碎约1mm,制成瘤细胞悬液。兔麻醉状态下B超引导16G穿刺针进入右肾下级,注入瘤细胞悬液0.3mL。C组采用瘤块包埋法。兔麻

8、醉后俯卧位固定,取右12肋缘下切口3-4cm,暴露右肾下级后用眼科镊穿刺1.5cm深隧洞。在冰块上将前述荷瘤组织剪为直径0.2-0.3cm的小块后植入。明胶海绵压迫止血,生物胶填塞。各组操作均于1.5h内完成。实验动物肌注青霉素40万单位,连续3d。实验期内无1例兔感染或死亡。  1.4肿瘤的超声检查用AcusonSequoia512型超声仪,15L8W宽频线阵探头(频率为8.0-13.0MHz),

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