细菌感染的诊断和治疗

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1、细菌感染的诊断和治疗第一节细菌感染的诊断标本采集时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。根据不同疾病以及同一疾病不同时期采取不同标本。应在使用抗菌药物前采集标本，否则在培养时应加入药物拮抗剂。采集局部不得使用消毒剂。标本必须新鲜，采集后尽快送检。尽可能采集病变明显部位的材料。送检过程中要采取适当的保存方式。（冷藏、保温、保湿、甘油缓冲液等）标本做好标记，写明检验目的、标本种类等。一标本的采集和送检原则二病原菌的检验程序（一）病原学诊断（二）病原菌成分检测（三）血清学诊断1.细菌的形态结构观察2.分离培养3.生化试验4.血清学试验5.动物试验6.药物敏感试验（一）病原学诊断大小、形态、

2、排列、染色、及其有无特殊结构程序：涂片染色镜检(1)不染色标本的检查(2)染色标本的检查1.细菌的形态结构观察(1)不染色标本的检查不染色标本一般用于观察细菌动力及运动情况(因为不染色标本直接在普通光学显微镜下，无色透明,不能清楚看到细菌的形态与结构特征,主要靠细菌的折射率与周围环境不同进行观察)。有鞭毛的细菌在镜下呈活泼有方向的运动，无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。(不停地做无规则运动的现象)(2)染色标本的检查无色透明,直接不易观察其形态结构;染料带电荷;细菌的等电点在pH2-5之间,通常带负电;常用的染色单染法复染法特殊染色法a.单染法简单染色通常只用一种染色剂，使细菌整个

3、细胞染上颜色。常用染料:美蓝、结晶紫或石碳酸复红等碱性染料因为看不清结构。所以只便于检查细菌的形态、大小和排列方式等。不能观察其特殊构造和属性鉴定.b.复染色法用两种或两种以上的染料染色的方法，称为复染色法或鉴别染色法①革兰氏染色法:最经典的方法②抗酸染色：是检查结核分枝杆菌和麻风杆菌的重要方法。①细菌的革兰氏染色法革兰氏染色是细菌鉴定上一个最重要和广泛应用的方法。染色步骤:初染-媒染-脱色-复染理论和实际意义分为G+和G-细菌了解细菌的致病性指导临床用药②抗酸染色抗酸染色原理:分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸

4、性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。步骤:苯酚复红染色,加温促使菌体着色;3%盐酸乙醇脱色;吕氏美蓝复染,未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌,脱色经复染呈蓝色的细菌为非抗酸性细菌。只要用于结核杆菌和麻风杆菌c.特殊染色芽孢鞭毛荚膜等特殊结构的观察大多需特殊染色荧光染色法2.分离培养分离培养：所有标本均应作分离培养获得纯培养后进一步鉴定.培养后根据菌落的大小、形态、颜色、表面性状、透明度和溶血性做出初步判断。3.生化试验：各种细菌所具有的酶不完全相同，对营养物质的分解能力亦不一致，因而其代谢产物有别，藉此可对不同致病菌进行鉴别（如肠道杆菌）4.血清学试验：含特

5、异抗体的免疫血清＋未知纯种细菌进行血清学实验，可确定致病菌的种和型。常见有凝集试验、沉淀反应等。5.动物试验：主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等。常用动物：小鼠、豚鼠、家兔接种途径：皮内、皮下、腹腔、肌肉、静脉等6.药物敏感试验：测定标本中致病菌对药物的敏感程度。对指导临床用药及控制感染有重要意义。常用纸碟法和试管稀释法。1.抗原检测：免疫学技术2.核酸检测(1)核酸杂交技术：分为固相和液相。有原位杂交、检测DNA的Southern印迹，检测RNA的Northern印迹(2)PCR技术：快速、灵敏、特异性强。(3)DNA指纹：染色体和质粒指纹或图谱分析(4)其它成分的检测

6、：利用气液相色谱法检测细菌的代谢产物等。（二）病原菌成分检测（三)血清学诊断用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。主要适用于抗原性较强的致病菌和病程较长的感染性疾病。常用有：直接凝集实验、沉淀实验、补体结合实验、中和试验、ELISA等。自然主动免疫：患病、隐性感染主动免疫人工主动免疫：接种疫苗、类毒素等自然被动免疫：通过胎盘、初乳被动免疫人工被动免疫：注射抗毒素、丙种球蛋白、转移因子第三节细菌感染的特异性防治获得性免疫的产生方式一、人工主动免疫概念：人工主动免疫是人为地将疫苗或类毒素接种于人体，使机体主动产生特异

7、性免疫力的过程。是一种防治微生物感染的措施，主要用于预防。常用的人工自动免疫制剂有以下2种：(一)疫苗(二)类毒素（一）疫苗1死疫苗：用理化方法将免疫原性强的细菌杀死制成的。如百日咳、伤寒、霍乱、斑疹伤寒、流行性脑膜炎、钩端螺旋体病等2活疫苗：用减度或无毒的病原体制成,如BCG、鼠疫和炭疽等的疫苗活疫苗与死疫苗的比较活疫苗灭活疫苗接种次数1次2-3次接种量小较大接种反应轻重免疫效果较好,维持1-5年差,维持0.5-1年毒力回升有可能不可能安全性有潜在危险性安全性好疫苗