代谢工程改造酿酒酵母生产_胡萝卜素

代谢工程改造酿酒酵母生产_胡萝卜素

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1、1204生物工程学报ChineseJournalofBiotechnology王贝贝等/代谢工程改造酿酒酵母生产β-胡萝卜素http://journals.im.ac.cn/cjbcnAugust25,2014,30(8):1204−1216DOI:10.13345/j.cjb.130582©2014ChinJBiotech,Allrightsreserved工业生物技术代谢工程改造酿酒酵母生产β-胡萝卜素王贝贝1,2,3,施明雨1,2,3,王冬1,2,3,许骄阳2,3,刘怡2,3,杨洪江1,戴住波2,3,张学礼2,31天津科技大学生物工程学院,天津3004572中国科学院

2、天津工业生物技术研究所,天津3003083中国科学院系统微生物工程重点实验室,天津300308王贝贝,施明雨,王冬,等.代谢工程改造酿酒酵母生产β-胡萝卜素.生物工程学报,2014,30(8):1204−1216.WangBB,ShiMY,WangD,etal.Productionofβ-carotenebymetabolicallyengineeredSaccharomycescerevisiae.ChinJBiotech,2014,30(8):1204−1216.摘要:β-胡萝卜素在食品、药品和化妆品领域有广泛用途。为获得生产β-胡萝卜素的微生物细胞工厂,本研究首先在酿酒

3、酵母BY4742中过表达甲羟戊酸(MVA)途径的限速酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因及二萜化合物合成的关键酶牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶(GGPS)基因,来提高牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(GGPP)的供给。在酿酒酵母底盘菌BY4742-T2的基础上整合来源于成团泛菌和红法夫酵母的β-胡萝卜素合成基因,比较酿酒酵母工程菌生产β-胡萝卜素的差别。结果表明提高酿酒酵母中HMGR和GGPS酶基因的表达能将工程菌中β-胡萝卜素的产量提高26.0倍。另外,来源于真核生物红法夫酵母的合成基因相比成团泛菌,更有利于酿酒酵母生产β-胡萝卜素。最终获得的酿酒酵母工程菌BW02能生

4、产1.56mg/g细胞干重的β-胡萝卜素,为进一步获得高产β-胡萝卜素细胞工厂提供基础。关键词:β-胡萝卜素,成团泛菌,红法夫酵母,酿酒酵母Received:November18,2013;Accepted:January22,2014Supportedby:NationalHighTechnologyResearchandDevelopmentProgram(863Program)(No.2012AA02A704),NationalNaturalScienceFoundationofChina(No.81202864),NationalBasicResearchProgra

5、mofChina(973Program)(No.2011CBA00800),HundredTalentProgramoftheChineseAcademyofSciences.Correspondingauthor:XueliZhang.Tel/Fax:+86-22-84861983;E-mail:zhang_xl@tib.cas.cnZhuboDai.Tel/Fax:+86-22-84861946;E-mail:dai_zb@tib.cas.cn国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2012AA02A704),国家自然科学基金(No.81202864),国家重点基础研

6、究发展计划(973计划)(No.2011CBA00800),中国科学院百人计划资助。网络出版时间:2014-03-10网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/doi/10.13345/j.cjb.130582.htmlProductionofβ-carotenebymetabolicallyengineeredSaccharomycescerevisiaeBeibeiWang1,2,3,MingyuShi1,2,3,DongWang1,2,3,JiaoyangXu2,3,YiLiu2,3,HongjiangYang1,ZhuboDai2,3,andXu

7、eliZhang2,31CollegeofBiotechnology,TianjinUniversityofScience&Technology,Tianjin300457,China2TianjinInstituteofIndustrialBiotechnology,ChineseAcademyofSciences,Tianjin300308,China3KeyLaboratoryofSystemsMicrobialBiotechnology,ChineseAcademyofSciences,Tian

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