人参皂甙单体rh_2对人脑胶质瘤细胞u251增殖和凋亡的影响及其机制探讨

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1、山东医药2010年第50卷第22期人参皂甙单体Rh2对人脑胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响及其机制探讨张继全,邱建武3,关宁,张晓健(辽宁医学院,辽宁锦州121001)摘要:目的观察人参皂甙单体Rh2(GS2Rh2)对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法用GS2Rh2处理人脑胶质瘤U251细胞,采用MTT法检测U251细胞增殖抑制率,流式细胞仪和AnnexinV2FITC/PI双染法观察U251细胞凋亡情况,TRAP2ELISA法检测U251细胞端粒酶活性,RT2PCR法检测U251细胞人端

2、粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达。结果5、10、20、40、80μg/mlGS2Rh2组U251细胞增殖抑制率分别为20.42%、32.19%、45.09%、57.37%、73.82%。根据细胞增殖抑制曲线计算出IC30、IC50、IC70值分别为9.7、25.2、68.4μg/ml。FITC和PI荧光双参数点图显示实验组细胞分布区域与对照组相比出现明显改变,随着药物浓度的增加,早期凋亡、晚期凋亡或坏死的区域细胞数量逐渐增多。9.7、25.2、68.4μg/mlGS2Rh2处理12、24、48、72h后U2

3、51细胞端粒酶活性随GS2Rh2浓度增加和作用时间的延长而降低。浓度为25.2μg/mlGS2Rh2作用24、48、72h的U251细胞hTERTmRNA与β2actin灰度值比为0.9649±0.0042、0.4018±0.0014、0.2978±0.0018,对照组为0.9764±0.0051。作用48、72hU251细胞hTERTmRNA与β2actin灰度值比与对照组相比P均<0.05;作用48、72h者相比P<0.05。结论GS2Rh2能够诱导人脑胶质瘤U25l细胞凋亡,抑制U25l细胞增殖。其机制与其抑

4、制hTERT基因表达,降低端粒酶活性有关。关键词:人参皂甙单体Rh2;胶质瘤;细胞增殖;细胞凋亡;端粒酶;人端粒酶逆转录酶中图分类号:R739.41文献标志码:A文章编号:10022266X(2010)2220016203Effectandmechanismofginsenoside2Rh2onhumangliomaU251cellproliferationandapoptosisZHANGJi2quan,QIUJian2wu,GUANNing,ZHANGXiao2jian(LiaoningMedicalUnive

5、rsity,Jinzhou121001,P.R.China)Abstract:ObjectiveToobservetheeffectandmechanismofginsenoside2Rh2(GS2Rh2)onhumangliomaU251cellproliferationandapoptosis.MethodsHumangliomaU251cellsweretreatedwithGS2Rh2,theinhibitoryeffectwasexam2inedwithMTT.StainingwithAnnexinV2F

6、ITC/PIandflowcytometryanalysiswereusedtodetecttheapoptoticcells.TRAP2ELISAwasusedtodetectedtelomeraseactivityandRT2PCRwasusedtodetecttheexpressionofhTERTgene.Re2sultsTheapoptoticratewas20.42%inthegroupwith5μg/mlGS2Rh2,32.19%inthegroupwith10μg/mlGS2Rh2,45.09%in

7、thegroupwith20μg/mlGS2Rh2,57.37%inthegroupwith40μg/mlGS2Rh2,73.82%inthegroupwith80μg/mlGS2Rh2.ThevalueofIC30,IC50,IC70were9.7,25.2,68.4μg/mlrespectively.FITCandPIfluorescencedual2pa2rameterpointmapshowedthattherewasasignificantlychangebetweentheregionaldistrib

8、utionofexperimentalcellscom2paredwithcontrolgroup,andearlyapoptosis,lateapoptosisornecrosisofregionalcellsgraduallyincreasedwiththein2creaseofdrugconcentration.Thetelomeraseactivit

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