大肠癌患者外周血cd4

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1、大肠癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达及临床意义康文喜樊静河北省秦皇岛市肿瘤医院，邮编：066001【摘要】目的：探讨CD4+CD25+CD127-调节性T在大肠癌患者外周血中的水平及临床意义。方法：应用流式细胞仪分析了200例大肠癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞的百分比，并进行比较。结果：大肠癌患者外周血CD4+CD25+CD127-占CD4+T细胞为(4.84±1.35)%，明显高于健康对照组（0.86±0.25)%，P＜0.05，差异具有明显统计学意义。本研究提示大肠

2、癌患者外周血调节性T细胞的比例与患者的病理类型无关，但与组织的分化程度、淋巴结转移情况和临床分期有关。高分化者3.92±0.41%，中分化者4.03±0.37%，低分化者4.21±0.42%（P＜0.01）；有淋巴转移者4.57±1.44%，无淋巴转移者2.36±0.68%（P＜0.05）；TNMⅠ—Ⅱ期1.90±0.86%，Ⅲ期3.53±1.41%，Ⅳ期4.38±1.32%（P＜0.01）,差异具有统计学意义。结论:大肠癌患者中的CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞的比例明显升高，可能在大肠癌的免疫耐受中发挥重要

3、作用,检测其结果对于判断大肠癌的病程进展及预后有一定参考价值。【关键词】：大肠癌CD4+CD25+CD127-调节性T细胞流式细胞术CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）是人体内重要的免疫调节细胞，最先由日本学者Sakaguchi等［1］发现，免疫抑制性调节是Treg独特的免疫调节特性。研究表明，许多肿瘤可诱导Treg增高，而Treg在肿瘤免疫耐受中起重要作用。CD127主要表达于B细胞前体和成熟的T细胞。目前认为CD4＋CD25＋CD127low是较CD4＋CD25＋Foxp3＋更具代表性的Treg特异性表面分子标志［2］本研究采

4、用流式细胞仪分析大肠癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞分布？，探讨其与肿瘤病程演变及预后的相关性。1.资料方法1.1临床资料：本文收集2008年3月-2010年12月我院收治的200例大肠癌患者，其中男性130例，女性70例，年龄41~67岁，平均年龄（51.23±6.71）岁。入选患者均经病理学诊断证实为大肠癌。其中盲肠癌16例，升结肠癌57例，横结肠癌23例，降结肠癌23例，直肠癌61例。组织分化程度：高分化115例，中分化65例，低分化18例，未分化2例。有淋巴结转移者124例，无淋巴结转移者76例。对照组均为

5、健康体检者共30例。1.2主要仪器：流式细胞仪（EPICSXL）为美国贝克曼库尔特公司生产。1.3主要试剂：鼠抗人单克隆抗体CD4-PC5、CD25-FITC、CD127-PE；同型对照IgG1-PC5、IgG1-FITC、IgG1-PE、红细胞裂解液均由美国贝克曼库尔特公司生产。1.4方法：大肠癌患者外周血均在手术后首个疗程化疗前清晨空腹第一次采集静脉血2ml，经EDTA-2K抗凝；然后进行化疗，患者在化疗后一周第二次采集静脉血2ml，经EDTA-2K抗凝。采集30例健康人的外周血作为对照。1.5流式细胞仪检测：采集的大肠癌患者及对照

6、组的EDTA-2K抗凝静脉血，每个试验管100μl，加单克隆抗体CD4-PC5、CD25-FITC、CD127-PE及同型对照各20μl，混匀，室温避光孵育15min；再加入红细胞裂解液500μl，避光孵育10分钟；加入PBS洗2次，离心1500转/5分钟，弃上清后加入适量的PBS，上机检测。1.1统计学处理应用SPPS12.0统计软件分析，进行t检验，数据以（x-±s）表示，P＜0.05为差异有统计学意义。2.结果2.1大肠癌患者外周血调节性T细胞比例与健康者的比较通过流式细胞仪检测法分析,大肠癌患者外周血CD4+CD25highCD

7、127-Treg占总CD4+T细胞的比例为4.84%±1.35%,健康对照组为0.85%±0.25%，大肠癌患者外周血Treg比例较健康对照组显著增高(P<0.05)。表1.大肠癌患者与健康者CD4+CD25+highCD127-/CD4+T比例的比较类别NCD4+CD25+CD127-/CD4+T（%）P健康对照组300.86±0.25＜0.05大肠癌患者2004.84±1.352.2大肠癌患者外周血调节性T细胞比率与癌组织分化程度和淋巴结转移情况的关系不同分化程度和是否有淋巴结转移的大肠癌患者外周血调节性T细胞比例对比见表2。数据显

8、示，大肠癌患者外周血Treg细胞比例低分化者明显高于高分化者，P＜0.05；有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者，P＜0.05。分析对象NCD4+CD25+CD127-/CD4+T（%）P组织分化程度高分化