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1、论文：人SonicHedgehog基因远距离增强子ZRS调节基因表达机制的初步研究【中文摘要】SonicHedge基因在动物个体发育过程中起到形态发生素的作用,在多种器官和组织形成中发挥效用,如大脑,脊髓,丘脑,肢芽,上皮组织等,目前研究已经表明,在不同的组织中shh(SonicHedgehog)基因的表达是由不同的增强子序列调节起作用的。在肢芽中,shh的表达受到距离其上游1Mb远的一段保守序列ZRS(ZPAregulatorysequence)的调节,而当该序列内部出现点突变时,shh在肢芽部分的表达
2、会发生变化,从而导致轴前多指畸形(PPD)这种严重遗传病的出现。ZRS序列本身非常保守,在人、小鼠、大鼠、鸡、河豚中,目前已经有报道10个以上的点突变会引发肢芽部分的发育异常。本实验从病人样本的基因组中筛选到了一个没有被报道过的点突变(3C>G),PCR扩增了两种长度的含有点突变的DNA序列,并通过使用荧光素酶报告基因活性检测系统,在HEK-293A细胞中,发现具有点突变的ZRS序列和野生型的ZRS序列均具有增强子活性,而且活性是突变型的高于野生型的序列。对于这个突变体的生物信息学分析发现,该点突变可能会
3、改变这段增强子序列的转录因子结合位点,因此使Shh基因的表达出现了异常。...【英文摘要】SonicHedgehogworkslikeamorphogenduringtheanimalindividualdevelopment.Itfunctionsinmanyorgans,suchasbrain,spinalcord,thalamus,limbbudandepitheliallocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassas
4、sination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcamecells.Recentlyreportsshowthatindifferenttissues,differenttissuespecificityenhancersregulateshhexpression.Duringlimbbudsh
5、aping,theconservedZRSsequencelocatingIMbpupstreamoftheshhproximalpromoterregulatesshhexpressionasalong-rangeenhancer.AndpointmutationinthisZRSsequencewouldcausethepreaxialp...【关键词】【英文关键词】SonichedgehogZRSDAPALuciferaseReporterAssaySystemPointMutation【索购全文】
6、联系Q1：138113721Q2：139938848【目录】人SonicHedgehog基因远距离增强子ZRS调节基因表达机制的初步研究中文摘要4-5Abstract5-6缩略词10-11第1章前言11-161.1SonicHedgehog基因简介11-131.2shh基因表达调控模式简介13-151.3本课题的实验目的、意义和研究策略15-161.3.1实验目的和意义151.3.2研究策略15-16第2章实验材料和方法16-292.1实验材料16-192.1.1菌种和载体162.1.2人血液样本162.
7、1.3细胞系和细胞培养基162.1.4工具酶,试剂(盒)16-172.1.5试剂的配制17-192.2locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame实验仪器
8、192.3实验方法19-292.3.1提取质粒DNA202.3.2切胶回收DNA20-212.3.3纯化PCR产物及酶切产物21-222.3.4提取血液中的基因组DNA22-232.3.5连接反应232.3.6质粒DNA及连接产物转化感受态细胞23-242.3.7菌落PCR鉴定阳性克隆242.3.8SDS-PAGE电泳24-252.3.9细胞复苏25-262.3.11细胞冻存262.3.12细胞计数26-272.3.13HEK
