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1、生物化学论文化工分离工程论文——野芝麻中萜类化合物的提取分离与生物合成研究 【摘要】：野芝麻(Lamiumbarbatum)系唇形科野芝麻属植物,产于东北,华北各省区以及陕西,甘肃,湖北,湖南等地。虽然研究者已经对野芝麻属的几种植物(如L.album,L.maculatum等)进行过成分分析,但目前还没有发现对L.barbatum化学成分的报道。在本研究中,我们将野芝麻提取物利用各种色谱等方法进行分离纯化,利用MS、1H-NMR以及13C-NMR进行化学成分鉴定,初步鉴定出6种化合物,其中包括两种蜕皮甾酮类物质与两种环烯醚
2、萜苷,以及两种糖苷。两种蜕皮甾酮为20-羟基蜕皮甾酮(20-hydroxyecdysone)与鹿根甾酮B(rapisteroneB),而环烯醚萜甙为lamalbid与山栀苷甲酯(shanzhisidemethylester),两种糖苷则为乙基-D-呋喃果糖苷(ethyl-D-fructofuranoside)以及乙基-D-吡喃葡萄糖苷(ethyl-D-glucopyranoside)。萜类化合物在高等植物中具有两条生物合成途径,甲羟戊酸途径(MVA),以及非甲羟戊酸途径(MEP)。通常认为,MVA途径存在于植物细胞的细胞质
3、中,主要合成倍半萜、甾体及三萜等化合物,而MEP途径存在于植物细胞的质体 中,主要合成单萜、二萜、环烯醚萜、胡萝卜素、叶绿素侧链以及维生素E等。研究显示,在高等植物合成自身所需的萜类化合物的过程中,这两条途径之间相互关系似乎存在植物种属的依赖性(speciesdependence),但目前尚无明确结论。在本研究的第二部分中,我们利用MVA途径的关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的特效抑制剂洛伐他汀(lovastatin)处理植物野芝麻,在该植物中MVA途径被抑制时,观察其中单萜化合物环烯醚萜苷(MEP途
4、径产物)与甾体化合物蜕皮甾酮(MVA途径产物)的生物合成情况,从而得出野芝麻中两条生物合成途径在萜类合成中所占的地位。研究结果显示在该植物中,MVA途径不仅可以合成蜕皮甾酮,同样可以合成环烯醚萜苷。而MEP途径在MVA途经受到抑制时,亦可以合成蜕皮甾酮类物质。【关键词】：野芝麻环烯醚萜苷蜕皮甾酮MVA途径MEP途径【学位授予单位】：西北大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010 【作者】：杨少青【索取全文】Q联系Q：138113721Q联系Q:139938848【目录】：·中文摘要3-4·Abstract4-5·目录
5、5-8·缩略语表8-9·第一章文献综述9-24·1野芝麻概述9·2野芝麻属化学成分研究现状9-11·3萜类化合物简介11-16·3.1萜类化合物的特点11-12·3.2萜类化合物的分类12-14·3.2.1单萜13·3.2.2倍半萜13-14·3.2.3二萜14·3.2.4三萜14·3.3萜类化合物的生物活性与医学价值14-16·3.3.1抑菌作用14-15· 3.3.2消炎、镇静作用15·3.3.3抗过敏作用15·3.3.4抗肿瘤作用15-16·3.3.5抗病毒作用16·3.3.6抗疟原虫作用16·3.3.7抗偏头痛作用
6、16·3.3.8保肝作用16·4萜类化合物生物合成途径研究进展16-24·4.1MVA途径简述17-18·4.2MEP途径简述18-19·4.3两条途径的抑制剂19-20·4.4高等植物中两条途径相互关系的研究进展20-24·第二章野芝麻中萜类化合物的提取分离与鉴定24-36·1实验材料24-25·1.1主要实验仪器24·1.2原料与试剂24-25·2实验方法25-30·2.1薄层色谱条件选择25·2.1.1展开条件的选择25·2.1.2显色剂的选择25· 2.2柱色谱条件的选择25-26·2.2.1装柱方法25-26·2
7、.2.2洗脱剂的选择26·2.3野芝麻的粗提26·2.4野芝麻提取液的萃取26·2.5乙酸乙酯提取物的分离26-27·2.6正丁醇提取物的分离27·2.7HPLC分析以及制备乙酸乙酯以及正丁醇提取物27-28·2.8水相提取物的分离纯化与鉴定28-29·2.9石油醚提取物的分离29-30· 3结果与分析30-35·3.1环烯醚萜苷成分鉴定30-31·3.2蜕皮甾酮成分鉴定31-34·3.3其他成分鉴定34-35·4讨论35-36·第三章野芝麻中萜类化合物生物合成途径间相互关系的研究36-50·1实验材料36-37·1.1主
8、要实验仪器36·1.2原料与试剂36-37·2实验方法37-40·2.1野芝麻中环烯醚萜苷与蜕皮甾酮含量测定方法的建立37·2.2lamalbid与20-羟基蜕皮甾酮标准曲线的建立37-38·2.3洛伐他汀对野芝麻萜类生物合成代谢的影响38-40·2.3.1初步探索实验38-39·2.3.2实验条件优化
