枸杞多糖对地塞米松诱导的小鼠脾脏细胞凋亡的影响.doc

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1、枸杞多糖对地塞米松诱导的小鼠脾脏细胞凋亡的影响【摘要】目的探讨枸杞多糖（LBP）对地塞米松（DEX）诱导的小鼠脾脏细胞凋亡的影响。方法以水提取-乙醇沉淀法制备LBP，分别给予实验小鼠每天口服LBP25、50、100mg,10d后体外实验取小鼠脾脏细胞与10-5、10-6、10-7mol／L的DEX共同孵育，6h后检测细胞凋亡率；体内实验给予小鼠腹腔注射DEX（25mg/kg），10h后取脾脏细胞直接检测凋亡率。结果实验动物预先口服LPB10d后，可使DEX诱导的小鼠脾脏细胞凋亡率显著降低，并呈现量效关系。结论LPB的免疫调节和促进作用与其对免疫细胞的保护、降低免疫细胞

2、凋亡有关。【关键词】枸杞多糖;脾脏细胞;凋亡;小鼠　　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofpolysaccharidefromlyciumbarbarum(LBP)onspleencellapoptosisinducedwithdexamethasoneinmice.MethodsTheKunmingmicewereorallyadministratedwith25,50,and100mgLPBeverydayrespectivelyfor10days.Thenthemiceweredividedintotwogroups(Agro

3、upsforinvivoexperimentandBgroupsforinvitroexperiment).SpleencellswhichwasseparatedfrommiceingroupAwasincubatedwithdexamethasoneatthedosesof10-5,10-6,and10-7mol／Lfor6hours,thentheratesofapoptosisweredetected.10hoursafterintraperitonealinjectionofdexamethasoneatthedoseof25mg/kginmiceingro

4、upB,spleencellswereseparatedandtheratesofapoptosisweredetectedimmediately.ResultsOraladministrationwithLBPfor10dayscouldsignificantlylowertheapoptosisratesofspleencellsofmiceinducedwithdexamethasonewithdosedependenteffects.ConclusionTheupregulationofLBPonimmunofunctionisrelatedtoitse

5、ffectsoflowcellapoptosis.　　Keywords:lyciumbarbarum;polysaccharide;spleencell;apoptosis　　细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡，是细胞生理性死亡的主要形式，在控制细胞增殖和分化、肿瘤的发生和生长等方面都起着重要的作用，也是机体免疫衰老过程中重要的分子机制之一。可以诱发细胞发生凋亡的因素很多，本研究以地塞米松与小鼠脾脏细胞共同孵育，诱发脾脏细胞凋亡为模型，探讨枸杞多糖（lyciumbarbariumpalysacharides,LBP）在体外和体内对大鼠脾脏细胞凋亡的影响，

6、现报道如下。　　1材料与方法　　1.1材料与主要试剂4　　　　枸杞多糖（LBP）：宁夏枸杞，购自广州市药材公司，乙醇回流提取，LBP含量为48.6%,冷冻干燥备用。　　　　24孔平底细胞培养板：德国Greiner公司。　　　　实验动物：健康成年昆明种小鼠,体质量18～22g，由中山大学实验动物中心提供，雌雄兼用,合格证号99A057。　　1.2方法　　1.2.1实验分组适应性喂养5d后将小鼠分为两组：A正常对照组：普通饲料喂养，每天胃饲生理盐水0.2mL；B枸杞多糖组：饲料同上，每天胃饲不同浓度的枸杞多糖0.2mL，枸杞多糖含量分别为25、50、100mg。连续喂养1

7、0d后分再分体外实验和体内实验两部分进行。体外实验：脱颈椎处死小鼠，无菌操作取出脾脏，按常规制成脾脏细胞悬液，台盼蓝检查细胞活性，计数并调整细胞至1×107／mL，加入地塞米松并使其终浓度分别为10-5、10-6、10-7mol／L。每组均做双份，另设空白对照（不加DEX）。各取2mL细胞悬液置细胞培养孔，5％CO2、37℃孵育6h后，分别作形态学观察和流式细胞术检测细胞凋亡情况。体内实验：于小鼠腹腔注射地塞米松（25mg/kg），10h后取出小鼠脾脏，分离细胞并制成细胞悬液，直接进行检测。　　1.2.2形态学观察按常规方法，4％甲醛室温下固定细胞1