细菌代谢产物中小分子有机酸的高效毛细管电泳分析

《细菌代谢产物中小分子有机酸的高效毛细管电泳分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、细菌代谢产物中小分子有机酸的高效毛细管电泳分析来源：中国论文下载中心    [10-10-2811:53:00]    编辑：studa20     -                      作者：胡耀华,钟文彬,周林,黄树林【摘要】 　　目的建立高效毛细管电泳法测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸的分析方法，测定细菌代谢产物中的小分子有机酸。方法采用毛细管：Beckmancoulter未涂层50μm×60cm(有效长度50cm);缓冲溶液：pH10.5的10mmol/L(含0.5mmol/LCTA

2、B)的硼砂溶液;检测波长214nm，分离电压-20kV，进样压力为1.0psi，进样时间为10s。结果4min内甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸得到基线分离。线性范围分别为：甲酸3.8～30.7mg/L(r=0.9971);乙酸3.3～52.5mg/L(r=0.9961);丙酸3.1～49.5mg/L(r=0.9993);丁酸3～48mg/L(r=0.9925);乳酸7.5～60.5mg/L(r=0.9995)。平均回收率分别为:甲酸99.29%(RSD=0.67%);乙酸98.90%(RSD=1.36

3、%);丙酸99.65%(RSD=0.65%);丁酸99.35%(RSD=0.42%);乳酸98.06%(RSD=1.44%)。结论该方法简单、快速、准确，可用于细菌发酵液中代谢产物有机酸的检测。【关键词】 细菌代谢产物小分子有机酸高效毛细管电泳Abstract:ObjectiveToestablishamethodfordeterminingformicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidinbacterialmetabolit

4、esbythehighperformancecapillaryelectrophoresis.MethodsSampleswereanalyzedonaBeckmanCoulter(50μm×50cm)uncoatedfusedsilicacapillaryusing10mmol/Lboratebuffer(pH10.5,containing0.5mmol/LCTAB).TheUVdetectionwavelengthwas214nm,theseparationvoltage-20kVandin

5、jectionpressure1.0psi×10s.ResultsStandardsamplesofformicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidwereseparatedwellin4minutes,andtheirlinearrangeswere3.8-30.7mg/L(r=0.9971),3.3-52.5mg/L(r=0.9961),3.1-49.5mg/L(r=0.9993),3.0-48.0mg/L(r=0.9925

6、),7.5-60.5mg/L(r=0.9995),respectively,theiraveragerecoverieswere99.29%,98.90%,99.65%,99.35%and98.06%,respectively.TheRSDvalues(n=6)offormicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidwere0.67%,1.36%,0.65%,0.42%,1.44%,respectively.ConclusionTh

7、emethodissimple,rapidandaccuratefordetectingtheorganicacidsinbacterialmetabolitesinfermentationliquor.　　Keywords:metabolicproduct;organicacid;highperformancecapillaryelectrophoresis　代谢流量是细胞生理学的一个基本决定因素，也是代谢途径中最重要的参数。对细菌进行代谢流量分析，特别是代谢产物中小分子有机酸的分析，有助于通过

8、基因工程手段定向地、有目的地改变限制细胞代谢的关键途径，以更好地理解和利用细胞代谢进行化学转化、能量转导和活性产物表达[1]。在发酵过程中，产酸发酵细菌能将有机物转化为以脂肪酸和醇为主的末端产物，同时生成新的细胞物质。产酸发酵速率较快，末端产物主要有甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、乳酸等脂肪酸以及醇类(乙醇等)、二氧化碳、氢气、氨、氮气等[2]。通过分析这些发酵末端产物可以了解细菌的代谢途径，而代谢通量的分析可以使所需要的一些关键操作单元协调运行，从而达到副产物最