细菌代谢产物中小分子有机酸的高效毛细管电泳分析的论文

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1、细菌代谢产物中小分子有机酸的高效毛细管电泳分析的论文作者：胡耀华,钟文彬,周林,黄树林【摘要】　　目的建立高效毛细管电泳法测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸的分析方法，测定细菌代谢产物中的小分子有机酸。方法采用毛细管：beckmancoulter未涂层50μm×60cm(有效长度50cm);缓冲溶液：ph10.5的10mmol/l(含0.5mmol/lctab)的硼砂溶液;检测波长214nm，分离电压-20kv，进样压力为1.0psi，进样时间为10s。结果4min内甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸得到基线分离。线性范围分别为：甲

2、酸3.8～30.7mg/l(r=0.9971);乙酸3.3～52.5mg/l(r=0.9961);丙酸3.1～49.5mg/l(r=0.9993);丁酸3～48mg/l(r=0.9925);乳酸7.5～60.5mg/l(r=0.9995)。平均回收率分别为:甲酸99.29%(rsd=0.67%);乙酸98.90%(rsd=1.36%);丙酸99.65%(rsd=0.65%);丁酸99.35%(rsd=0.42%);乳酸98.06%(rsd=1.44%)。Www.11665.CoM结论该方法简单、快速、准确，可用于细菌发酵液中

3、代谢产物有机酸的检测。【关键词】细菌代谢产物小分子有机酸高效毛细管电泳abstract:objectivetoestablishamethodfordeterminingformicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidinbacterialmetabolitesbythehighperformancecapillaryelectrophoresis.methodssampleswereanalyzedonabeckmancoulter(50μm×50c

4、m)uncoatedfusedsilicacapillaryusing10mmol/lboratebuffer(ph10.5,containing0.5mmol/lctab).theuvdetectionwavelengthwas214nm,theseparationvoltage-20kvandinjectionpressure1.0psi×10s.resultsstandardsamplesofformicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidwer

5、eseparatedwellin4minutes,andtheirlinearrangeswere3.8-30.7mg/l(r=0.9971),3.3-52.5mg/l(r=0.9961),3.1-49.5mg/l(r=0.9993),3.0-48.0mg/l(r=0.9925),7.5-60.5mg/l(r=0.9995),respectively,theiraveragerecoverieswere99.29%,98.90%,99.65%,99.35%and98.06%,respectively.thersdvalues

6、(n=6)offormicacid,aceticacid,propionicacid,butyricacidandlacticacidwere0.67%,1.36%,0.65%,0.42%,1.44%,respectively.conclusionthemethodissimple,rapidandaccuratefordetectingtheorganicacidsinbacterialmetabolitesinfermentationliquor.　　keywords:metabolicproduct;organicac

7、id;highperformancecapillaryelectrophoresis　代谢流量是细胞生理学的一个基本决定因素，也是代谢途径中最重要的参数。对细菌进行代谢流量分析，特别是代谢产物中小分子有机酸的分析，有助于通过基因工程手段定向地、有目的地改变限制细胞代谢的关键途径，以更好地理解和利用细胞代谢进行化学转化、能量转导和活性产物表达[1]。在发酵过程中，产酸发酵细菌能将有机物转化为以脂肪酸和醇为主的末端产物，同时生成新的细胞物质。产酸发酵速率较快，末端产物主要有甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、乳酸等脂肪酸以及醇

8、类(乙醇等)、二氧化碳、氢气、氨、氮气等[2]。通过分析这些发酵末端产物可以了解细菌的代谢途径，而代谢通量的分析可以使所需要的一些关键操作单元协调运行，从而达到副产物最小而产率最优的目的[3]。　　毛细管电泳(ce)是一类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术，具