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1、时间分辨免疫荧光与化学发光法、酶联免疫法测定乙肝标志物的比较作者：不详 来源：本站 发布时间：2006-11-1521:26:33 浏览：43字号选择〖 大中小 〗摘 要目的:比较化学发光免疫测定（CL）、酶联免疫（EIA）与时间分辨免疫荧光（TRFIA）三种方法检测乙肝病毒免疫标志物的优缺点。方法:用上述三种方法的检测试剂及仪器对189例临床血清标本分别进行检测，然后进行结果分析。结果:三者对乙肝表面抗原的检测灵敏度均达到了0.1ng/ml。对HBcAb的测定，以CL的灵敏度最高，ELISA最低。对表面抗体、E抗原及E抗体的检测，
2、相互符合率均在95%以上，但对核心抗体的检测符合率，TRFIA与CL为83.23%，TRFIA与EIA为85.19%。结论:三种方法的检测性能相差不大，但操作性各有特点，应按各实验室具体情况加以选择。 关键词：化学发光法，酶联免疫试验，时间分辨荧光免疫测定 本文作者:肖征周薇薇 白立彦 赵莉萍 Comparisonofchemiluminescence,ELISAandtime-resolvedfluoroimmunoassayindetectingHepatitisBmarkers肖征，副主任医师，副教授周薇薇，主管技师白立彦，主
3、管技师赵莉萍，主管技师解放军总医院微生物科，100853北京ZhengXiao,WeiweiZhou,LiyanBai,LipingZhaoGeneralHospitalofPLA,Beijing,100853PRC AbstractSubject:TocomparethreedeferentassaystoseetheirabilitiesindetectinghepatitisBmarkers. Methods：ByusingChemiluminescence(CL),ELISAandTime-resolvedfluoroimmun
4、oassay(TRFIA),189serumsamplesweretestedforhepatitisBmarkers,thentheresultswereanalyzed. Results:Thethreeassaysallcandetectaslowas0.1ng/mlofHBsAg.ButinHBcAb,TheCLshowedthehighestsensitivity,ELISAshowedthelowestsensitivity.ThecoincidencesofthethreemethodsindetectingHBsAb,H
5、BeAg,andHBeAbarenormallyabove95%,butforHBcAb,thecoincidencewas83.23%betweenTRIFandCL,and85.19%betweenTRIFAandEIA. Conclusion:TherewerenotmuchdifferenceamongthesethreemethodsregardingtheirabilitiesindetectinghepatitisBmarkers,butthemaneuverflexibilitiesofeachmethoddiffere
6、dalot.Oneshouldconsiderhisownlab'ssituationbeforemakingchoice. Keywords:chemiluminescence,ELISA,time-resolvedfluoroimmunoassay 自二十世纪七十年代以来，许多高灵敏度的测定方法应用于临床免疫学检测。其中，酶联免疫法应用最广。近年来发展起来的CL与TRFIA测定据称是灵敏度非常高的方法[1,2,3]。本文就这三种方法对乙肝免疫标志物的测定作一比较，以下结果供大家参考。 材料与方法1.试剂与器材：时间分辨免疫荧光测
7、定为上海新波生物公司生产的乙肝两对半测定试剂盒，及由该公司提供的洗板机、孵育器和时间分辨免疫荧光测定仪以及分析判定结果软件系统。 酶联免疫方法试剂为SORIN公司（HBsAg）、科华公司（HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）产品；仪器有洗板机（WELLWASH4）、酶标比色仪（READER230S），部分试验在FAME（全自动开放式酶免分析仪）上进行。 化学发光法为强生公司VitrosEci化学发光免疫测定系统及配套的专门试剂盒。 标本为临床检测乙肝标志物的血液标本，分离血清，-20℃保存备用。HBsAg标准品购自北京市
8、临床检验中心（2ng/ml）,使用时稀释至所需浓度。2.方法 ELISA按产品说明书进行。主要步骤有：加样、孵育、洗板、加酶或底物、显色、比色。其中HBcAb测定的样本经1：30稀释。 C
