（0805）《园艺植物生物技术》网上作业题及答案

《（0805）《园艺植物生物技术》网上作业题及答案》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、（0805）《园艺植物生物技术》网上作业题及答案1：第一批作业2：第二批作业3：第三批作业4：第四批作业5：第五批作业6：第六批作业1：[论述题]5、如何对转入植物基因组中的外源目的基因进行检测？  参考答案：答：（1）对转入的目的基因序列片段进行检测。包括两种手段：一是PCR方法检测外源基因；二是用Southern杂交方法，以目的基因DNA为探针，检测植物基因组中与其同源的部分。常见有Southern斑点杂交和Southern印迹杂交两种。（2）转入目的基因的RNA转录水平检测。包括两种方式：一是Northern杂交,通过总

2、RNA或mRNA与探针的杂交来分析；二是RT-PCR，以植物总RNA或mRNA为模板进行反转录，然后经PCR扩增目的基因特异条带。（3）外源基因表达蛋白的检测。外源基因编码蛋白在转基因植物中能够正常表达并表现出应有的功能乃是植物基因转化的最终目的。外源基因表达蛋白检测主要利用免疫学原理，主要采用ELISA检测、Western杂交检测。ELISA检测程序包括抗体制备、抗体或抗原的包被、免疫反应及检出三个阶段。Western杂交程序包括转基因植株蛋白提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质、蛋白质条带印迹、探针制备、杂交检出五个

3、步骤。2：[论述题]4、分子标记主要在园艺植物哪些方面应用？  参考答案：第12页共12页答：（1）种质资源的遗传多样性分析及亲缘关系研究。采用比较植物学特征并结合细胞学、孢粉学和同工酶学等方法进行评价和分类都有其局限性。近十多年来发展起来的分子标记技术为种质资源的遗传多样性分析及亲缘关系研究开辟了广阔的前景。（2）遗传图的构建和基因定位。遗传图谱是遗传研究的重要内容，又是种质资源、育种及基因克隆等许多应用研究的理论依据和基础。分子标记为构建高饱和度的连锁图提供了有力的工具。（3）分子标记辅助选择育种，提高育种效率。（4）核心

4、种质筛选。分子标记可以在DNA水平上直接反映种质资源的基因型和遗传结构，具有受环境影响较小、检测快速、多态性高等优点，在园艺植物核心种质构建中得到了越来越多的应用。（5）品种鉴定与纯度分析。分子标记是在基因水平上的品种鉴定和种子纯度检验无组织器官特异性，不受环境的影响，准确度高、重复性好。3：[论述题]3、一个完整的组织培养室由哪些部分所构成？  参考答案：答：（1）洗涤室。洗涤室用于组织培养用的玻璃器皿、塑料器皿和其他实验用具清洗。（2）储存室。用于各类器皿和用具的存放与保管。配备各种规格的货架、货柜、塑料框等。（3）培养基

5、配制室。培养基配制室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作，如药品的称量、溶解，培养基的配制和分装等。（4）灭菌室。灭菌室用于培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。（5）接种室。（6）培养室。培养室要求卫生清洁、保温和隔热效果要好。窗户用双层玻璃，以利于隔热保温，还可防止灰尘、昆虫及微生物的进入，达到清洁效果。（7）研究室。研究室用于对培养材料及培养结果进行观察、鉴定、记录和分析。（8）温室或苗圃。温室用来对培养的再生植株的驯化和移栽。4：[论述题]2、cDNA文库的构建包括哪些步骤？  参考答案：第12页共12页答：（1）、RN

6、A提取及mRNA分离和纯化。首先进行总RNA的提取，该步骤关键的因素是要抑制RNA酶的活性，建立一个无RNA酶的环境和抑制材料内部RNA酶的活性对于制备优质RNA十分重要。总RNA的提取后进行mRNA分离和纯化，通过亲和层析的方法将mRNA同其他的RNA分离开来。（2）、cDNA合成。cDNA第一链合成可用人工合成的2-20个核苷酸长的oligo(dT)为引物或长度为6-10核苷酸，由4种碱基随机组成的DNA片段(混合物)，作为合成第一链cDNA的引物。cDNA第二链合成可利用cDNA第一链末端(3'端)常常出现发夹环的特征进

7、行第二链的合成或用大肠杆菌RNaseH(核糖核酸酶H)降解取代法。（3）、将cDNA装配到载体上。用于构建cDNA文库的载体主要有质粒、噬菌体和柯斯质粒，其中质粒载体可插入片段较小，而噬菌体和柯斯质粒可以插入较大的外源DNA片段。（4）、文库滴度测定和扩增。噬菌体文库在建成后要进行库容量检测和进一步扩增保存。1个完整的cDNA文库至少应含有1×106个克隆才能保证其中含有每一个单拷贝的mRNA。文库扩增便于多次使用或相互交流。5：[论述题]1、植物培养基由哪些成分构成，具有何作用？  参考答案：（1）、无机营养成分。主要包括氮

8、、磷、硫、钾、钙、镁、铁、锰、铜、锌、硼、钼及碳、氢、氧等大量元素与微量元素。（2）、有机成分。为了不同的培养目的往往要加入一些有机物如维生素类和氨基酸类等有机成分，以利培养材料的快速生长。离体培养的植物材料常用的碳源是蔗糖。（3）、生长激素。植物组织培养细胞分裂的启动、愈伤