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时间:2018-08-04
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1、RNA生物合成1.复制和转录过程有什么相似之处?又各有什么特点?相同点:(1)都以DNA为模板。(2)都需依赖DNA的聚合酶。(3)聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键。(4)都从5’→3’方向延伸成新链多聚核苷酸。(5)都遵从碱基配对规律。不同点是:复制转录模板两股链均复制模板链转录(不对称转录)原料dNTPNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶(RNA-pol)产物子代双链DNA(半保留复制 )mRNA,tRNA,rRNA配对A-T,G-CA-U,T-A,G-C2.讨论并比较原核生物的转录起始的异同。1)真核生物DNA上有TATA盒子作为识别起始的位点,原核没有。2)真核基因调控
2、序列与起始序列分开,原核不分。3)参与的酶不同。原核生物的转录起始过程比较简单。只有一种RNApolymerase,在染色质上寻找到符合转录条件(启动子、增强子、起始密码子)的位置,结合在上面然后转录开始。真核比较复杂,除了多种RNAP转录不同类型的RNA外,它的rnap是有很多亚基组成的复杂的复合体,并在多种因子的调控下协调有序的组装在RNA起始位置上形成转录起始复合物。细菌中,DNA指导的RNA聚合酶核心酶由四个亚基组成(两个α亚基,一个β亚基,一个β’亚基),核心酶与σ亚基结合产生全酶。核心酶可以催化NTP的聚合,但只有全酶能够引发转录的开始。主要的步骤是:具有特异识别能
3、力的。亚基识别转录起,始点上游的启动子特异同源序列,这样可以使全酶与启动子序列结合力增加,形成封闭的二元复合物。关键的作用是RNA聚合酶与DNA的相互作用。真核生物中,当含TBP的转录因子与DNA相互作用时,其他因子也结合上来,形成起始复合体,这一复合体再与RNA聚合酶结合,因此主要是RNA聚合酶与蛋白质之间的作用。1.说明原核生物的转录过程:转录的起始,转录空泡,Pribnow盒(TATA盒);转录的延长,σ-(sigma)亚基的作用;转录终止,Rho因子的作用(1)起始:RNA聚合酶结合到DNA双链的特定部位,局部解开双螺旋,第一个核苷酸掺入转录起始位点,从此开始RNA链的
4、延伸。在新合成的RNA链的5’末端,通常为带有三个磷酸基团的鸟苷或腺苷(pppG或pppA),即合成的第一个底物是GTP或ATP。起始过程中,σ因子起关键作用,它能使聚合酶迅速地与DNA的启动子结合,σ亚基与β’结合时,β’亚基的构象有利于核心酶与启动子紧密结合。(2)延长:转录起始后,σ亚基释放,离开核心酶,使核心酶的β’亚基构象变化,与DNA模板亲和力下降,在DNA上移动速度加快,使RNA链不断延长。(3)终止:RNA聚合酶到达转录终止点时,在终止辅助因子的帮助下,聚合反应停止,RNA链和聚合酶脱离DNA模板链。2.说明真核生物mRNA的转录后加工过程。mRNA转录后修饰:
5、(1)剪接(切除内含子,连接外显子)。(2)加帽(5’-GpppmG)。(3)加尾(3’-polyA)。(4)碱基修饰(甲基化等)。tRNA转录后修饰:(1)切除3’或5’端的多余核苷酸。(2)3’末端加上CCA。(3)稀有碱基的生成(甲基化,还原反应,转位反应,脱氨反应)。rRNA转录后修饰:(1)剪接。(2)甲基化修饰等。3.使用RNA合成的原理解释抗生素利福霉素和利福平的抗菌机制。利福平专一性的与敏感细菌的DNA依赖性RNA多聚酶的β-亚单位结合,抑制细菌的RNA合成起始阶段。阻断mRNA的合成。蛋白质的生物合成及合成后的修饰1、说出核糖体的活性位点及其功能A位:结合氨基
6、酰-tRNA的氨基酰位P位:结合肽酰-tRNA的肽酰位E位:排出卸载tRNA的排出位2、简述密码子的特点(1)连续性:编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码间既无间断也无交叉。如基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失,可能导致框移突变,造成下游翻译产物氨基酸序列的改变。(2)简并性:每组密码仅编码一种氨基酸,但除甲硫氨酸和色氨酸只对应一个密码子外,其他氨基酸都有2、3、4或6个密码子为之编码,称为遗传密码的简并性。比较编码同一氨基酸的几组三联体简并密码可发现:密码第一、二位碱基多相同,前2位碱基决定编码氨基酸的特异性,而仅第三位碱基差异,这些位置碱基的突
7、变并不影响所翻译的氨基酸种类。但不同生物在翻译中,对同一氨基酸的几组密码,可表现选择某些密码优先使用的特性,即对密码的“偏爱性”。(3)通用性:蛋白质生物合成的整套密码,从原核生物到人类都通用。仅发现少数例外,如动物细胞的线粒体中存在独立的基因表达体系,翻译使用的密码和通用密码间有一定差别。(4)摆动性:转运氨基酸的tRNA的反密码需要通过碱基互补与mRNA上的遗传密码反向配对结合,但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律,称为摆动配对。按从5’→3’阅读密码规则,摆动配对在反密码的1位
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