构树叶活性成分的的分析及抑菌作用的研究

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1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进

2、行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日华中科技大学硕士学位论文构树叶活性成分分析及抑菌作用研究硕士研究生：李万仓指导老师：摘曹玉广教授要目的：我国是世界上植物资源最为丰富的国家之一，但我国中药的贸易，在市场上仅占较小的份额。因此，大力推进中药资源的现代开发研究，不仅包括应用现代科学技术进行资源规划、活性成分提取分析、效用评价等，以研发出新的产品；还包括开发出天然

3、防腐剂及化妆品等，以较好的利用我国的植物资源。本研究是从构树叶中提取活性成分，对其活性成分用高效液相色谱测定，探讨对浅部真菌作用效果和用作天然的食品防腐剂的效果，以便合理的开发利用我国的构树资源。方法：采于湖北黄冈的构树叶经日照晒干，用75%乙醇提取24h，共3次，收集混合液。（1）对收集的混合液，经石油醚萃取、水解、过滤等方法，用高效液相色谱测定其黄酮类化合物。（2）对收集的混合液，经醇碱皂化、石油醚萃取（除去杂质）、减压浓缩、层析分离、过滤等手段，用高效液相色谱测定辅酶Q10。（3）对构树叶中提取物用平皿药基法进行对红色毛癣菌、断发毛癣菌、絮

4、状表皮癣菌和白色念珠菌的抗真菌试验。4）对构树叶中提取物添加到生酱油中，并进行了标准对照与空白对照，定性与定量观察防腐效果，并进行了一次加菌28天的微生物挑战性实验。结果：(1)经高效液相色谱测定，构树叶中含有的黄酮类化合物分别是槲皮素、异甘草素、胡萝卜苷。1.0Kg构树叶中含有的黄酮类化合物其含量分别是6.51g，7.06g，1.74g；其总黄酮含量为15.31g。槲皮素、异甘草素、胡萝卜苷分别在3.1~25.0µg/mL,2.5~50.0µg/mL,2.5~50.0µg/mL范围内具有良好的线性关系，平均加样回收率(以槲皮素计）为99.91%

5、，相对标准偏差（RSD）为0.91%（n=6）。(2)1.0kg构树提取物中辅酶Q10的平均含量为0.66g。辅酶Q10在4.0~64.0µg/ml(r=0.9997)范围内具有良好的线性关系。平均加样回收率为98.66%，RSD为0.97%（n=6）。构树叶中辅酶Q10的最低检测限为10ng/ml（S/N=3）。(3)通过对红色毛癣菌、断发毛癣菌、絮状表皮癣菌和白色念珠菌的抑菌试验表明，构树叶提取物1（华中科技大学硕士学位论文具有较好的抗真菌作用，体外抗浅部真菌试验均表明构树叶不同溶剂提取物具有明显的抗真菌作用，其提取物的最低抑菌浓度低于目前公认

6、的抗真菌中药的最低抑菌浓度。（4）构树叶提取物中的活性成分黄酮类化合物具有较强的防腐效果。在37℃和室温下培养2周，0.5%浓度及以上均可抑制细菌和霉菌生长；在微生物挑战性实验中，1.0%浓度的构树叶提取物就可通过微生物挑战性实验，其效果优于浓度为0.1%的苯甲酸钠。从以上结果可以得出，构树叶提取物中的活性成分黄酮类化合物具有很好的抑菌和防腐效果。结论：高效液相色谱法测定黄酮类化合物和辅酶Q10灵敏，快速，结果准确，可用于构树叶提取物中黄酮类化合物和辅酶Q10的分析。通过初步抑菌和防腐试验表明，构树叶提取物中活性成分黄酮类化合物具有一定的抗浅部真

7、菌作用和防腐效果，为进一步开发与利用我国的植物资源打下基础。构树叶资源丰富，提示可作为广谱抗浅部真菌中草药，以冀开发出新的抗真菌中药；且构树叶提取物中的黄酮类化合物可作为一种食品的天然防腐剂，值得我们去开发与利用。关键词：构树叶；黄酮类化合物；辅酶Q10；浅部真菌；微生物挑战性实验2华中科技大学硕士学位论文StudyofactiveingredientsofBroussonetiaPapyriferaleavesandeffectsofbacteriostasisPostgraduate:LiWan-cangTutor:CaoYu-guangAbs

8、tractObjective:Ourcountryisoneofthemostabundantplantresources