动物实验的基本方法

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1、第六章动物实验的基本技术方法一.动物实验前的准备动物实验前的理论准备:实验动物方面的基础知识;选题;方案的制订;方法的选定动物实验前的条件准备:实验仪器、药品、试剂、实验动物预备实验二动物实验的设计与分组1.设计原则：对照性原则：设对照组，应有可比性，分为自体对照和组间对照一致性原则：对照组和试验组除处理因素外，其他因素保持一致重复性原则同一处理要设多个样本例数，为估计试验误差、降低试验误差、增强代表性，提高实验结果的精确度随机性原则：随机分组客观性原则实验设计、选择观察指标以及结果判断要客观2.差异的控制：差异的来源：⑴实验者；⑵动物；

2、⑶动物与环境的相互作用实验者带来的差异实验过程的实施：不准确的测量动物固有的差异动物来源不一饲养管理的差别动物生活环境不同动物健康状况动物与环境相互作用引起的差异群居因素，每个笼盒饲养动物数量动物与实验操作过程之间的相互作用引起饲养操作与实验操作的顺序实验操作引发的动物之间的影响三.实验动物的领取明确实验所用动物的品种、品系、规格、等级、以及实验的大致时间表填写动物申领计划表，教研室主任签字生效填写动物领用表,确定所领动物的品种、品系、规格、数量四.实验动物的抓取和固定小鼠的抓取和固定抓取方法图6—1小鼠抓取固定方法:徒手固定;固定板固定

3、;固定架固定;简易固定图小鼠保定大鼠的抓取与固定抓取方法固定方法:徒手固定;固定板固定;卵圆钳固定豚鼠的抓取与固定抓取方法固定方法徒手固定固定板固定图豚鼠抓取和保定家兔的抓取与固定抓取方法固定方法徒手固定;盒式固定;台式固定图兔抓取和保定犬的抓取与固定抓取方法固定方法慢性试验中犬的固定方法急性试验中犬的固定方法:头部的固定;四肢固定图狗嘴捆绑保定的方法猪的抓取与固定抓取方法固定方法猴的抓取和固定抓取方法固定方法五.动物的编号、标记及去毛方法动物的编号与标记：常用的标记液：①3%~5%苦味酸溶液（黄色）②0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）

4、③2%硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照10分钟）④煤焦油酒精溶液（黑色）图个体染色标记法编号原则：先左后右，从前到后。左前肢记为1号，左侧腹部为2号，左后肢3号，头顶部为4号，腰背部5号，尾基部6号，右前肢7号，右侧腹部8号，右后肢9号。编号超过10时，可使用两种不同颜色的溶液，把一种颜色作为个位数，另一种为十位数。六.实验动物被毛的去除方法1.剪毛法2.拔毛法3.剃毛法4.脱毛法常用的化学药品：硫化钡（BaS）、硫化钠（NaS）、硫化钙（CaS）七.动物的麻醉方法常用的麻醉剂1.挥发性麻醉剂:乙醚、氯仿等2.非挥发性麻醉剂：苯巴比妥钠、戊

5、巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，盐酸氯胺酮、水合氯醛等3.中药麻醉剂：洋金花、东莨菪碱等其他麻醉辅助用试剂：镇痛剂：芬太尼、埃托菲等镇静剂：氟阿尼酮、乙酚丙嗪等抗胆碱药：阿托品、格隆溴铵等肌松剂：筒箭毒碱、泮库溴铵等其它：α-2激动剂——美托咪定，对狗、猫、兔及大多数啮齿类动物可产生良好的镇静和镇痛效果动物的麻醉方法1．全身麻醉①吸入法:②腹腔和静脉给药麻醉法2.局部麻醉:盐酸普鲁卡因、盐酸可卡因、利多卡因麻醉注意事项:①静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，停止注射。②麻醉时

6、要注意保温。保温方法有：实验桌内装灯，电褥，台灯照射等③作慢性实验时，在寒冷季节，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。④注意保持动物的呼吸道的通畅，麻醉前禁食.八.动物的给药途径和方法实验动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，注射法又分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射等方法，投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入以及经口腔投入。小鼠的给药途径和方法灌胃（i.g）:动物要固定好；头颈部保持平展；要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决不

7、可进针不顺就硬向里插。皮下注射（s.c）:常选用颈背部皮肤。图大小鼠的灌胃皮内注射（i.d）:观察皮肤血管的通透性变化及观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄性较雌性皮肤紧密，注射难度大。肌肉注射（i.m）：较少应用腹腔注射（i.p）:静脉注射（i.v）：一般采用尾静脉注射。小鼠尾部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。图小鼠腹腔注射图　小鼠尾静脉注射大鼠的给药途径和方法灌胃:左手按徒手固定方式固定大鼠,使大鼠伸开两前肢,手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。皮下注射：常选在左侧下腹部或后腿皮肤处，方法同小鼠。皮内注射：常选用背部脊柱两侧的皮肤

8、，方法同小鼠。肌肉注射：一般选择股二头肌注射，但应避免伤及坐骨神经，否则会导致后肢瘫痪腹腔注射：用左手的大拇指、食指和中指从大鼠的前肢和头部后面抓住大鼠，同时用身体抵住大鼠的两后肢使之固定，使