动物实验基本操作方法

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1、第八章动物实验的基本操作方法动物实验的基本操作方法，包括实验动物的抓取、固定、编号、标记、麻醉、去毛、给药、采血、采集体液、常见手术操作、处死等操作方法。第一节实验动物的抓取、固定、编号、标记方法一、小鼠的抓取与固定二、大鼠的抓取与固定抓取与固定方法同小鼠,但要防止被大鼠咬伤.三、豚鼠的抓取与固定四、家兔的抓取与固定五、犬、猫等的抓取与固定视频六、实验动物的编号与标记方法在动物实验中，必须对实验动物进行编号、标记以示区别。标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、易认和适用的要求，现介绍几种常用的标记方法。1.染色法：染色法是用毛笔或棉签蘸取有色化学染料，在实验动物体表

2、不同部位涂上斑点，以示不同编号。编号的一般原则是：“先左后右，先上后下。”2.耳缘剪孔法3.烙印法4.挂牌法第二节实验动物的麻醉方法全身麻醉局部麻醉在实施全身麻醉时，应注意以下几个问题：①猫、犬、猪或非人灵长类大动物禁食10～12h，不能少于8h。家兔或啮齿类动物无呕吐反射，术前无须禁食。被手术的动物在麻醉前可给予一定量饮水。②麻醉前不能使用泻剂。因为泻剂可导致血液的碱储降低，从而增加血液和组织的酸度，在麻醉和失血情况下，易发生酸中毒，并能降低损伤组织的抗感染能力。③麻醉后的动物必须保持气道的通畅和组织(眼球、舌、肠等器官)的营养。④犬做长时间实验前1h应灌肠排除积

3、粪。⑤应检查麻醉剂质量、数量是否满足要求，麻醉固定器具是否有破损(漏气或堵塞)，有关麻醉中毒急救品和器材是否准备齐妥，以应急需。（一）麻醉前的准备一、全身麻醉方法全身麻醉的常用方法主要有吸入麻醉和非吸入麻醉。1．吸入麻醉吸入麻醉是将挥发性麻醉剂或气体麻醉剂经呼吸道吸人动物体内，从而产生麻醉效果的方法。吸入麻醉常用的挥发性麻醉剂有乙醚、氯仿、氟烷、甲氧氟烷等。气气麻醉剂常用氧化亚氮、环丙烷等。乙醚的麻醉作用主要是抑制中枢神经系统，适用于中、小型实验动物全身麻醉。先将浸润了乙醚的棉球(或海绵)放入小烧杯，再将小烧杯放入相应大小密封的麻醉盒内(可用大烧杯代替)，再将动物放

4、入，通过透明的麻醉盒观察动物的行为。开始时，动物出现兴奋，进而出现抑制，自行倒下，呼吸由快变慢，当角膜反射迟钝，肌张力下降，即可取出动物。实验过程中，应注意动物的反应，适时追加乙醚吸人量，维持其麻醉深度和时间。（二）麻醉的方法2．非吸入麻醉非吸人麻醉的给药常用注射方法，如静脉注射、肌内注射、皮下注射、腹腔内注射等。常用的麻醉药有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯等。戊巴比妥钠是常用的一种动物麻醉剂，白色粉末，安全范围大，毒性小，麻醉潜伏期短，维持时间较长。一般用生理盐水配制。大鼠、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射；犬、猫、兔等动物既可腹腔注射，又可静脉注射。操作时，一般先推

5、入麻醉药总量的2／3，密切观察动物生命体征的变化，若已达到所需麻醉的深度，余下的麻醉药则不用。以避免麻醉过深抑制延髓呼吸中枢导致动物死亡。在实验过程中，若动物出现苏醒行为时，可追加麻醉药，或吸入乙醚辅助麻醉。常用实验动物全身麻醉药用法及剂量药品动物给药途径剂量（mg/kg）浓度(%)用药量(mL/kg)麻醉时间戊巴比妥钠氨基甲酸乙酯（乌拉坦）硫喷妥钠氯仿乙醚犬、猫、兔豚鼠大鼠、小鼠犬、猫、兔豚鼠大鼠、小鼠犬、猫、兔大鼠各种动物ivipipIpip、ivImimiv、ipiv、ip吸入3040~5040~5045750~10001350135025~5050~1003

6、322252020211.01.4~1.72.0~2.52.33~47.07.01.3~255.0~10.02~4h2~4h15~30min二、局部麻醉方法局部麻醉操作方法很多，可分为表面麻醉、局部浸润麻醉、区域阻滞麻醉以及神经干(丛)阻滞麻醉等。1．表面麻醉：利用局部麻醉药的组织穿透作用，透过粘膜，阻滞浅表的神经末梢。常用麻醉药为利多卡因等。眼部用药点滴，鼻内用药涂敷，咽喉气管用药喷雾，尿道灌注给药。2．区域阻滞麻醉：在手术区四周和底部注射麻醉药阻断疼痛的向心性传导。常用药为普鲁卡因。3．神经干(丛)阻滞麻醉：在神经干(丛)的周围注射麻醉药，阻滞其传导，使其支配的

7、区域无疼痛。常用药为利多卡因。4．局部浸润麻醉：沿手术切口逐层注射局部麻醉药，阻滞组织中的神经末梢。常用药为普鲁卡因。5．椎管内麻醉：在椎管内注射麻醉药，阻滞脊神经的传导，使其支配的区域无疼痛。常适用于大型动物(如猪、马、牛、羊等)，常用药为普鲁卡因、可卡因等。三、动物麻醉的注意事项1．有些麻醉药物，如乙醚，是挥发性很强的液体，易燃易爆，使用时应远离火源。平时应装在棕色玻璃瓶中，储存阴凉处，不宜放在冰箱中，以免遇电火花而引起爆炸。2．所有麻醉药使用过量均可引起中毒，应特别注意各种麻醉药的剂量和给药途径，应准确按体重计算麻醉剂量。由于动物存在个体差异，文献介绍的剂