动物实验基本技术和方法

《动物实验基本技术和方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、动物实验基本技术和方法广东药学院实验动物中心主要内容一、实验前准备二、实验动物抓取与固定三、年龄的大致判断四、性别、发情、与妊娠鉴定五、编号和标记六、分组七、去毛八、给药途径与方法九、采血方法十、其他体液采集十一、麻醉方法十二、处死方法十三、动物病理检查一、实验前准备理论准备：了解动物实验基础知识制定研究计划和方案查阅关于实验方法的参考文献条件准备：仪器、器械、药品运输动物实验和饲养场所二、实验动物抓取和固定（一）小鼠小鼠固定器固定（二）大鼠大鼠固定盒固定（三）豚鼠（四）家兔兔子固定器固定狗钳狗的抓取固定（五）犬犬嘴固定方法猫的抓取犬固定（六）猴抓取与保定猴徒手固定三、年龄的大致判断（一

2、）大、小鼠1、根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样）日龄/d外观形态特征1仔鼠裸体鲜红3耳壳露出表皮4脐带瘢痕脱落5能翻身8能爬行日龄/d外观形态特征10能听到声音9～11全身被白毛，门齿长出13～15眼皮张开，能跳跃，能抓取东西18以后能自行采食，独立生活2.根据体重鉴定日龄⑴小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生51015202530体重/g1.84.06.011.015.021.024.0⑵大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生10203040体重/g6～717～2535～5055～90100～150日龄/d50607080体重/g150～210170～240210～270240～320（二

3、）豚鼠一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日龄/d初生7203060体重/g60～80100～120150～200170～220240～300日龄/d90120180体重/g330～400400～470520～600（三）家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列

4、不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。（四）犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿→犬齿→臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8～l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的

5、杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。年龄犬齿更换和磨损情况2个月以下仅有乳齿(白、细、尖)2～4个月更换门齿4～6个月更换犬齿(白，牙尖圆钝)6～10个月更换臼齿1岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2岁下门齿尖突部分磨乎3岁上、下门齿尖突大部分磨平4～5岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6～8岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9～10岁唇部、胡须发白10岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白四、性别、发情、与妊娠鉴定（一）大、小鼠的性别鉴定初生兔仔如阴部孔洞扁圆而略大于肛门，且与肛门相向、距离较近的是母兔；孔洞呈圆形而略小于肛门，孔洞向前而距肛门

6、较远的是公兔。三月龄以上的兔子，只要看有无阴囊即可区别公母。（二）兔的性别鉴定FemaleMale（三）大、小鼠发情鉴定小鼠性周期阴道分泌物涂片变化阶段持续时间（h）涂片可见卵巢变化动情前期9-18大量有核上皮细胞少量角化上皮细胞卵泡加速生长动情期6-12满视野角化上皮细胞，少量有核上皮细胞卵泡成熟、排卵动情后期30-48角化上皮细胞及白细胞黄体生成动情间期36-42大量白细胞及少量粘液黄体退化（四）妊娠鉴定1、阴道栓法（大、小鼠、豚鼠）2、外部检查法3、摸胎法4、阴道检查法5、直肠检查法6、超声波检查法7、孕酮含量测定法阴道栓五、编号和标记1、染色法：浅色动物3.5-5％苦味酸溶液（黄

7、色）0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）煤焦油酒精溶液（黑色）龙胆紫溶液（紫色）2、打耳孔法：小型动物3、剪趾法：小型动物4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分5、烙印法：刺号钳，中、大型动物6、针刺法：中、大型动物7、号牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物8、剪毛法：大动物9、笼子标号六、分组随机化分组：避免人为影响例：将14只小鼠随机分成两组。①先将小鼠编为I～14号，②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄14个随机数字。