第十章 动物实验的基本技术和方法

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1、第十章动物实验的基本技术和方法在医学教学、科研和医疗工作中，不论是从事基础医学还是临床医学或预防医学，都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物实验的观察、分析，来研究需要解决的问题，动物实验方法已成为研究工作中必不可少的重要手段。动物实验动物实验整体实验:LD50、活存时间、活存率离体实验:器官灌注、组织切片、细胞培养急性实验：急毒，1～2天亚急性实验：药效，1～4周慢性或长期实验：长毒、“三致”、转基因动物,>3～6个月动物实验前的准备一、动物的购入购入或领取实验动物时，实验人员应向供应部门索取所用动物相应等级的由国家主管部门所颁发的质量合格证书，动物的遗传背景资料、动物微生物

2、检查资料及动物年龄和健康等方面的资料。若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。动物外观健康检查主要内容：①皮毛：有无光泽、出血、干燥；②眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等；③耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；④四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；⑤肛门：有无下痢、血便、脱肛等。二、动物饲养室及饲养器具准备饲养室面积应根据所购入动物的数量来确定。饲养动物的器具等，应在动物购入前准备好。垫料、饲料应按购入动物数量准备。各笼箱的编号及卡片、饲喂动物所用器材，如给饵器、粪便托盘、搬运车、台秤、饲料桶、电源插板等也应准

3、备放好。动物饲养室的环境应根据所计划使用动物的微生物控制级别来进行准备，属于屏障系统的应调整好送排风系统、空气净化系统，控制好温度、湿度、风速、噪声等环境因素。动物饲养室在启用前，应对设施、笼具及用具等统一进行彻底消毒。编号标记目的：为了分组要求：清晰、耐久、简便、适用颜料标记颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有5%苦味酸溶液(黄色)2%硝酸银溶液(咖啡色)0.5%中性品红溶液(红色)煤焦油的酒精溶液(黑色)。编号原则：先左后右，从上而下。小鼠和大鼠标号示图烙印用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在

4、臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。纹身用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤)刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编号。号牌将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。毛色利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。剪毛用剪刀在狗背上剪出号码，此方法简单，字迹清楚、可靠，便于观察。打孔用打孔器在兔耳上打孔或剪口。动物被毛的去除为了排除动物被毛对实验操作和观察结果的影响，实验中需要去除或剪短动物的被毛。剪毛法拔

5、毛法剃毛法脱毛法脱毛剂1)8%NaSNaS8g+水至100ml；也可用硫化钠8克、淀粉7克、甘油4克、硼砂1克，用自来水加至100ml。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液5～7ml可用于15×12cm2皮肤的脱毛。2)10%NaS硫化钠10克、氧化钙15克，自来水加至100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤脱毛。3)硫化硷染土布用硫化硷10克，生石灰15克，加自来水至100ml溶解后即可应用。常用于实验狗的皮肤脱毛，涂上脱毛剂2～3分钟狗毛即可成糊状，迅速用自来水将局部脱毛皮肤冲洗干净。此方法脱毛干净，脱毛后局部皮肤不充血。目的：防止动物挣扎，保持安静防止意外损伤，便

6、于操作麻醉全身麻醉1%硫喷妥钠:15mg/kg，iv/ip2%戊巴比妥:40mg/kg，iv/ip盐酸氯胺酮:40mg/kg，sc/im复方氯胺酮:0.01ml/kg，sc/im麻醉剂动物给药方法剂　量（mg/kg）常用浓度%维持时间戊巴比妥纳犬、猫、兔静脉1.032～4小时，中途加上1/5量，可维持1小时以上，麻醉力强，易抑制呼吸。腹腔、皮下1.4～1.73大、小鼠、豚鼠腹腔2.0～2.52鸟类肌肉2.5～5.02异戊巴比妥钠犬、猫、兔静脉0.8～1.054～6h肌肉、腹腔0.8～1.010直肠1.010鼠类腹腔1010氨基甲酸乙酯（乌拉坦）犬、猫、兔静脉、腹腔2.5～3.330

7、2～4小时，应用安全，毒性小，主要适用小动物的麻醉。直肠5.030大、小鼠、豚鼠肌肉7.020鸟类肌肉6.32.0蛙类皮下淋巴结2～320硫喷妥钠犬、猫、兔静脉、腹腔1.3～2.5215～30min，麻醉力强，宜缓慢注射，维持注射剂量按情况掌握大鼠静脉、腹腔5.0～101巴比妥钠犬静脉1～1.2204～6h，麻醉诱导期较长，深度不易控制猫腹腔4.05口服4.010兔腹腔4.05鸽腹腔、肌肉6.13鼠类皮下210苯巴比妥钠犬、猫腹腔、静脉2.2～3.03.54～6h，麻