动物实验中的基本技术和方法

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时间:2019-05-10

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1、1第七讲动物实验中的基本技术和方法2第一节实验动物的抓取与固定抓取与固定是动物实验的一项基本技术,其目的是使动物保持在安静的状态下,顺利地进行各项实验。同种动物不同实验目的、实验内容,抓取与固定方法也可以不同。一、小鼠的抓取保定:器材:小鼠饲养盒+面罩1套。方法步骤:1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起,放在饲养合的面罩上。2、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及颈背部的皮肤,将小鼠提起。3、翻转左手掌,以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。4、用左手无名指压住小鼠背部的皮肤,小指压住小鼠的尾巴根部。5、松开捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。此法

2、适用于肌注、腹腔注射、灌胃等52、固定板(器)固定(1)将小鼠麻醉后,用细绳捆住小鼠四肢。(2)准备一个15-20cm,边缘钉有5个钉子的方木板。(3)将四肢用细绳固定在木版两侧的钉子上,在上颚切齿处用细绳固定在木版前方的钉子上。固定板固定适用于大多数动物手术。小鼠固定器适用于尾静脉注射。6二、大鼠和地鼠(一)抓取1、周龄较小的大鼠和地鼠,可以像小鼠一样抓住尾部提起。72、周龄较大的大鼠可张开左手虎口,迅速将拇、食指插入大鼠的腋下,虎口向前,其余三指及掌心握住大鼠身体中段,并将其保持仰卧位,然后调整左手拇指的位置,紧抵在下颌骨上即可进行实验操作。8注意:操作者第一次抓取大鼠时,最

3、好戴防护手套;不能捉提尾尖,也不能长时间将大鼠悬在空中。9(二)固定1、徒手固定:对体重较小的大鼠可用拇指、食指捏住大鼠耳部及颈部皮肤,余下三指紧捏住背部皮肤,置于掌心,调整好大鼠在手中的姿势即可进行实验操作。如:灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等实验。102、固定板固定:方法与小鼠固定板固定相同,只是需选择更大一些的固定板。3、固定器(盒)固定:方法与小鼠固定器(盒)固定相同,只是固定器较小鼠的大。同样适用于大鼠尾静脉注射。11三、豚鼠(一)抓取抓取幼龄豚鼠时,用两手捧起;成熟豚鼠可以用左手大把抓起。12注意:豚鼠性情温和,但胆小易惊,易造成自伤。抓取时,不能太粗野,更不能抓

4、腰腹部,在操作过程中,如果豚鼠挣扎,手不要越握越紧,否则会造成豚鼠呼吸困难,甚至死亡。13(二)固定1、徒手固定:用左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧,拇指和无名指放在肋部,分别用手指挟住左右前肢抓起,然后反转左手,用右手的拇指和无名指挟住右后肢,用中指和无名指挟住左后肢,使鼠体成为一条直线。2、固定板(器)固定:与大、小鼠,豚鼠固定板固定基本一致。四、兔的抓取保定:(一)方法1:步骤:1、用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤,轻轻把兔提起。2、用左手托住兔的臀部。(二)方法2:器材:兔保定架1个。步骤:1、打开保定架的上盖,抓取并将兔放进架内,迅速关上保定架的上盖。2、右手抓住兔耳朵将

5、头部拉过保定架的卡栓,将兔的脖子保定。3、如果兔挣扎,可用手在它的背上轻轻抚摸,使其安静。16注意:家兔温顺,一般不会咬人,但脚爪较锐利,要防止被抓伤。另外抓取时不能只提兔耳或四肢,也不能用单手只抓颈背部皮肤。17五、实验犬(一)抓取可用特制的长柄铁钳夹住犬的颈部,由另一人用布带或粗绳缚其嘴,并将布带、绳固定在狗耳后颈部,防止脱落。注意:狗性情凶恶、咬人,避免被其咬伤。在缚嘴时,动作要迅速,捆绑松紧要适中。18(二)固定实验台固定:用特制的长柄铁钳夹住犬的颈部后,麻醉动物。将麻醉的犬放在实验台上,再用粗棉带(绳)固定四肢于实验台上。并将犬舌拉出。此固定方法仰卧位适用于口腔、颈、胸

6、、腹、四肢等部位的实验,俯卧位适用于脑、背部位的实验。19三、实验动物编号与标记方法(一)染色法:1、单色涂染法:在每组动物不超过l0只或一个实验不超过40只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:3-5%苦味酸溶液,可染成黄色②2%硝酸银溶液,涂染成咖啡色(涂后需光照10min);③0.5%中性红或品红溶液,涂染成红色;④煤焦油酒精溶液,涂染成黑色;⑤龙胆紫溶液,涂染成紫色方法步骤:(1)涂染原则:从左到右、从上到下。(2)左前肢为l号、左侧腹部2号、左后肢3号。(3)两耳后部4号、背中部5号、后肢背部6号。(4)右前肢7号、右侧腹部8号、右后肢9号。(5)尾巴根为10

7、号。(6)额部为20号2、双色涂染法:在每组动物不超过100只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:(1)3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。——作为“个”位数。(2)0.5%中性红或品红溶液,可染成红色。——作为“十”位数。方法步骤:(1)用两种颜色同时进行染色标记。(2)用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,个位数的染色标记方法同单色涂染法。(3)用品红(红色)染色标记作为十位数,(4)左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号,两耳后部40号、背部50号、后肢背部60

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