实验动物学课件--第十章.动物实验基本技术

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时间:2019-07-25

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1、第十章动物实验基本技术本章内容第一节小鼠第二节大鼠第三节豚鼠第四节兔第五节实验动物处死方法第六节实验动物的病理剖检一、实验动物标记编号的方法(一)染色法:1、单色涂染法:在每组动物不超过l0只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。第一节小鼠方法步骤:(1)涂染顺序:从左到右、从上到下。(2)左前肢为l号、左侧腹部2号、左后肢3号。(3)头部4号、背部5号、尾根部6号。(4)右前肢7号、右侧腹部8号、右后肢9号。(5)不作染色标记为10号。2、双色涂染法:在每组动物不超过10

2、0只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:(1)3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。——作为“个”位数。(2)0.5%中性红或品红溶液,可染成红色。——作为“十”位数。方法步骤:(1)用两种颜色同时进行染色标记。(2)用苦味酸(黄色)染色标记作为个位数,个位数的染色标记方法同单色涂染法。(3)用品红(红色)染色标记作为十位数,(4)左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号,头部40号、背部50号、尾根部60号,右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号第100号不作染色标记。二、小鼠的抓取保定:器材:小鼠

3、饲养盒+面罩1套。方法步骤:1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部将小鼠提起,放在饲养合的面罩上。2、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后、颈背部的皮肤,将小鼠提起。3、翻转左手掌,以左手掌心和中指夹小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。4、用左手无名指压住小鼠背部的皮肤,小指压住小鼠的尾巴根部。5、松开捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。三、小鼠的给药方法:(一)灌胃给药原理:将药液直接注入小鼠的胃内。器材:小鼠灌胃针1支、注射器1支、小鼠饲养盒+面罩1套、生理盐水、烧杯。方法步骤:1、将灌胃针连接在注射器上,吸

4、入一定量的药液。2、左手捉持小鼠,使小鼠头部向上。3、右手将灌胃针头尖端从小鼠口角处进针放进小鼠口咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入小鼠的胃内。灌胃针插入约3cm.4、用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入小鼠的胃中。剂量:约0.5ml/10g体重。注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。(二)注射给药1、皮下注射给药:原理:将药液注入皮下结缔组织,经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)注射部位:选小鼠项背部的皮下。(2)常规

5、消毒注射部位的皮肤,用注射针头取一锐角角度刺入皮下,(3)将针头轻轻向左右摆动,易摆动则表示已刺入皮下,再轻轻抽吸,如无回血,可缓慢地将药物注入皮下。注射量:0.01ml—0.03ml/g体重。2、肌肉注射给药原理:将药液注入动物的肌肉组织,经毛细血管吸收进入血液循环。器材:1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)操作时1人先将小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠的1条后肢,右手拿注射器,常规消毒注射部位的皮肤。(3)将注射器针头在动物后肢大腿外侧肌肉丰富处呈60度角迅速刺入后注入

6、药液。注射量:0.01m1/g体重。3、静脉注射给药原理:将药液注入小鼠的尾静脉。器材:1m1注射器1支、生理盐水、烧杯、金属笼或小鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)将小鼠放在金属笼或小鼠固定器中,通过金属笼或小鼠固定器的孔拉出小鼠尾巴。(2)用左手捏住小鼠尾巴中部,用75%酒精棉球反复擦拭尾部。(3)注射时,以左手拇指和中指捏住鼠尾两侧,用食指从下面托起尾巴,以无名指夹住尾巴的末梢。(4)右手持4号针头的注射器,使针头与静脉平行(小于30度角)。(5)从小鼠尾巴下1/4处进针,仔细观察,如果无阻力,无白

7、色皮丘出现,说明已刺入血管,即可注入药物。(6)拔出针头后,用干棉球压住注射部位约l、2min,防止出血。注射量:0.005m1—0.01m1/g体重。4、腹腔注射给药原理:将药液注入小鼠的腹腔。器材:注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、棉球。方法步骤:(1)用左手将小鼠捉持保定,使鼠腹部朝上,鼠头略低于尾部。(2)右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺。(3)针头刺入皮下后进针3mm左右,接着使注射针头与皮肤呈45度角刺入腹肌,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定针

8、头,保持针尖不动,回抽针栓,如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量:0.01m1—0.02m1/g体重。三、小鼠的采血——摘除眼球采血法:原理:将小鼠的眼球摘除后取血液的方法。器材:眼科弯镊、试管。方法步骤:(1)左手抓住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位;(2)左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球突出。(3)用眼科弯镊夹去眼球,将鼠倒立,用试

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