实验动物学的基本技术操作

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1、Basicoperatingtechniquesforanimalexperiments动物实验基本操作技术陈丽颖13015506893firebirdie@126.com这些规范和操作对动物实验室条件、工作人员素质、技术水平和操作方法都要求标准化，包括动物实验过程中消毒剂选择、消毒方法、动物实验前准备、动物实验技术操作、样品采集等各个环节。动物实验操作的总要求：达到良好实验室操作规范（goodlaboratorypractice，GLP）和标准操作程序（standardoperatingprocedure，

2、SOP）。动物实验操作是畜牧兽医学科研究生必须熟练掌握的基本功。由于研究目的不同，动物实验的操作技术方法多种多样，但其基本操作技术方法是一样的。中国农业出版社，2012第1版。定价：180内容提要一、实验动物的分组与编号二、实验动物的抓取与固定三、实验动物的被毛去除技术四、实验动物给药技术五、实验动物麻醉技术六、实验动物各种体液标本的采集方法七、实验动物安乐死技术八、尸体剖检及脏器标本采集原则及检验方法（详见《兽医实验动物学》第十章第二节“动物实验操作技术”）一、实验动物的分组与编号（一）实验动物性别的鉴定1

3、鉴别小、大鼠的性别2鉴别豚鼠的性别3鉴别家兔的性别4鉴别鸡的性别（二）实验动物编号和标记方法1染色法2挂牌法3耳号法4纹身法（黔刺法）5剪毛法6打孔或剪趾、剪耳、剪尾法7烙印法8电子标识（一）实验动物性别的鉴定鉴别小、大鼠的性别：根据外生殖器与肛门之间的距离来判断这些动物新生仔的性别。一般间隔短的是雄性。鉴别豚鼠的性别：雌性外生殖器阴蒂突起比较小；雄性外生殖器处有包皮覆盖的阴茎的小隆起。鉴别家兔的性别：新生仔兔是根据肛门和尿道口之间的距离以及尿道开口部形态来判断雌雄。雄性的肛门和尿道口间距是雌性的1.5～2倍

4、；雌的尿道口形态是裂缝、细长形，雄的则是圆筒形。鉴别鸡的性别：根据生殖突起来鉴别。常在雏鸡出壳后8～12小时之内进行。方法：将雏鸡握在手中，排除粪便，将头夹在中指与无名指之间，大拇指固定肛门上方，用右手大拇指和食指轻按肛门旁边使肛门翻开，在亮光下如看到很小的粒状阴茎突起就是雄性，无突起的是雌雏鸡。（二）实验动物编号和标记方法1染色法2挂牌法3耳号法4纹身法（黔刺法）5剪毛法6打孔或剪趾、剪耳、剪尾法7烙印法8电子标识标记的方法很多，但基本原则是：号码清楚、耐久、简便、易认和适用。染色法是用化学剂在动物身体明显

5、部位如被毛、四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。常用的标记溶液有：①3％~5％苦味酸溶液（黄色）；②0.5％中性红或品红溶液（红色）；③2％硝酸银溶液(咖啡色，涂后需光照10min)；④煤焦油酒精溶液（黑色）；⑤龙胆紫溶液（紫色）。1、染色法(Staining)1、染色法(Staining)编号的原则是：先左后右，从前到后。若动物编号是二位数或三位数，则采用2种或3种不同颜色分别代表不同位数（个位、十位、百位），标记的原则同上。左前肢：1号，左侧腹部：2号，左后肢

6、：3号，头顶部：4号，腰背部：5号，尾基部：6号，右前肢：7号，右侧腰部：8号，右后肢：9号。小鼠的染色标记方法若动物编号超过10或更大数字时，可使用上述两种不同颜色的溶液，即把一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数。这种交互使用可编到99号。(如红色为十位，黄色为个位)。NO.12染色法多用于实验周期较短、动物数量不多的情况，不宜用于长期实验。此法主要用于大、小鼠、豚鼠和白色家兔。挂牌法可用来标记多种动物，一般用于兔、豚鼠标记。犬、猴、猫等动物有时可挂在颈部或笼箱或链条上。使用自制的或购买的烙压有编号的圆

7、形或方形牌（铝、不锈钢或者塑胶等材料），或将号码按实验分组编号烙在动物颈圈皮带上，将其固定在动物颈部。也可挂在实验动物的耳部、肢体或笼具上。2、挂牌法3、耳号法用刺数钳（耳号钳）将号码打在动物耳朵上。打号前用蘸有酒精的棉球擦净耳朵，用耳号钳刺上号码，然后在烙印部位用棉球蘸上溶在食醋里的黑墨水擦抹。该法适用于耳朵比较大的兔、狗等动物。用7号或8号注射针头蘸取少量碳素墨水，在动物唇的内侧、耳部、前后肢以及尾部等少毛部位进行纹身，刺出相应数字。用黑墨涂在打号局部，数天后黑墨浸入皮下，显示出蓝黑色字号。该法适用于大小

8、鼠、豚鼠等。在实验动物数量少的情况下，也可用于兔、狗等动物。目前有市售的兔用打号器，原理与此相同，附带有不同数字和符号的针刺字号。4、纹身法（黔刺法）5、剪毛法该法适用于大、中型动物，如狗、兔等。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码，此法编号清楚可靠，仅适于短期观察。6、打孔或剪趾、剪耳、剪尾法☆耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号，根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少，来表示一定的号码。