非小细胞肺癌患者血中pin mrna的表达及肺血管处理顺序的影响

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1、非小细胞肺癌患者血中pin1mRNA的表达及肺血管处理顺序的影响中南大学学报医学版非小细胞肺癌患者血中的表达及肺血管处理顺序的影响艾正华,张位星中南大学湘雅医院心胸外科,长沙摘要】目的:检测在非小细胞肺癌患者循环血中的表达情况并探讨肺动静脉结扎顺序的影响及临床意义。方法:选择接受根治性手术的原发性患者例,按预定的结扎血管顺序术前将病例随机分为先结扎肺静脉组组和先结扎肺动脉组组。分另采集其术前麻醉后外周血标本、术中结扎肺静脉后近心端和远心端血标本及术后第天外周血标本。选择例需手术治疗的肺部良性疾病患者作为对照,以例健康人作为阴性对照。运用实时荧

2、光定量逆转录聚合酶链反应?法定量检测患者循环血中的表达。结果:肺癌患者循环血中表达量显著高于肺部良性病变患者和正常人分别为.~.,.一.,.;期患者的表达量高于一Ⅱ期分别为.±.,..,.;有淋巴结转移者表达量高于无淋巴结转移者分别为..,..,.;肺静脉远心端的表达量高于近心端的表达量分别为..,..,.;手术后周的表达情况显著低于术前分别为..,.±.,.;组的在肺静脉近心端表达低于组分别为..,.±.,.,在肺静脉远心端表达高于组分别为.±.,..,.。结论:在患者血液中有高表达,肺癌根治术术中先结扎肺静脉可在一定程度上减少在血中的表达

3、即减少癌细胞入血。【关键词】;非小细胞肺癌;逆转录聚合酶链反应;肺血管结扎顺序中图分类号.;.文献标识码文章编号?,,,,,:‘/????.???..,.?,收稿日期?一作者简介艾正华一,男,湖北黄冈人,硕士,主要从事肺癌的研究。通讯作者张位星,?:.非小细胞肺癌患者血中的表达及肺血管处理顺序的影响艾正华,等..,.~...?.,..~.±...±.,.;.±...±.,...±...±.,.;.±...±.,...±...±.,.;.±...±.,...,.:;?;?;,,:?肺癌的发病率正逐年上升,已成为城镇人口放疗的治疗措施。两组病例在

4、性别、年龄等各方恶性肿瘤死亡的第位原因,然而肺癌特别是非面均具有可比性。并以例需要接受手术治疗小细胞肺癌.,的的肺部良性疾病患者作为手术对照,以例健早期诊断仍然困难,术后年生存率不理想,且康志愿者的外周血标本作为阴性对照。按预定的结扎血管顺序术前将病例随机分成先结扎肺患者多因广泛远处转移而死亡。目前关于的标志物及早期诊断,减少远处转移已成为研究静脉组组和先结扎肺动脉组组。所有的手术操作均由同一外科小组完成。热点。/?.总提取首先用人淋巴细胞分离是肽基脯氨基异物酶的一种,的液天津市灏洋生物制品科技有限责任公司分催化反应是一条新的改变磷酸化蛋白功

5、能的信离出单核细胞,加入提取总。并严格号通路,在肿瘤的发生中起重要作用,被称为肿瘤发生的催化分子?。本研究探讨肺癌患者围手按照公司试剂说明书提取方法,无酶操作,%琼脂糖凝胶电泳检测的完整术期循环血中的表达情况,并在术中性,并应用紫外分光光度仪分别测定:卯和瑚结扎肺静脉后检测两端的肺静脉血中的表值,以确定所提取的含量的纯度,置一℃达的差异,旨在明确先结扎肺静脉的影响及其临保存待用。将得到的逆转录成。根据床意义。公司逆转录试剂盒说明:缓冲液;.逆转录酶混合液;.个碱材料与方法基随机引物/;.引物.标本采集所有标本均来自湘雅医院心/;加入总不超过,

6、和无胸外科年月至年月接受根治性酶双氢水,反应体系为。反应条件手术的例原发性非小细胞肺癌患者,其中鳞,℃。整过配置过程是在超净癌例,腺癌例。所有患者均已经签署知情台冰上无酶操作。反应产物储存于一℃待用。同意书,并得到我院伦理委员会的批准。分别采.?定量分析的序列设集手术前麻醉后外周血、手术中结扎肺静脉后计使用分析的非冗余数据库。上游两端的血及手术后周的外周血。所有病例均和下游引物分别设计在不同的外显子上,其跨越经过病理学诊断证实,并且术前未接受过化疗、的内含子足够大,以避免基因组的扩中南大学学报医学版,,增。并且通过程序选择特异性的引物对。.统

7、计学处理所有的数据均采用最终选择的引物扩增产物大小为,上游引.进行分析,不同组之间的差异运用?秩和检验方法检验,物序列为一,以.为差异具有统计学意义。下游引物序列为一,.。人?上游引物序列为一,下游引物序列为一?结果。所有模板均经过普通扩增,%的琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭.在不同人群的表达运用方法,检测例原发性非小细胞肺癌患染色照相,确保扩增产物单一,无杂带和引物二聚体。若有则重新,仍然有的情况下则者、例肺部良性疾病患者、例健康志愿者的重新逆转录。反应体系为,参照?的表达,反应过程中根据荧光信号检公司说明书,模板.,相当于测和.的扩增曲线及融合

8、曲线总;/;./引物;图,。以正常人的表达量为基./;.酶和×准,在非小细胞肺癌患者中有高表达缓冲液。在℃后,循环℃;℃.,而正常人和肺部良性病变患者的,℃,次循环

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