安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响

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1、安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响作者：张丹，黄萍，李俊，胡质毅，王艳丽【摘要】【目的】观察安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤及死亡率的影响。【方法】选用SD大鼠，随机分为正常对照组，模型组，安宫牛黄丸低、中、高剂量组(中药低、中、高剂量组，剂量分别为10、20、30g·kg-1·d-1)。除正常对照组外，其他组均采用盲肠结扎穿孔(CLP)法复制腹腔感染型脓毒症模型，中药低、中、高剂量组分别于造模前05h和造模后6h灌胃给药，观察24h大鼠死亡率，检测造模24h后各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶

2、(ALT)、总胆红素(TB)和肌酐(Cr)含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。【结果】模型组血清ALT、TB水平，肺组织MPO活性及24h死亡率均显著升高(P<005或P<001)。中药低、中、高剂量组可显著降低肺组织MPO活性(P<005或P<001)，其中低剂量组可显著降低血清TB水平(P<005)，低、中剂量组还可显著降低24h死亡率(P<005)。【结论】安宫牛黄丸可降低脓毒症大鼠的死亡率，并对肺、肝等重要器官有一定的保护作用。【关键词】安宫牛黄丸/药理

3、学;脓毒症/中药疗法;疾病模型，动物;大鼠9脓毒症(sepsis)是严重创(烧)伤、休克、外科大手术后常见的并发症，其本质上是一个失控的全身自我破坏性炎症反应过程[1-2]。脓毒症属于中医温热病范畴，是由于火毒炽盛、正气亏虚，正不胜邪、邪毒内陷，客入营血所致[3]。安宫牛黄丸是中医治疗温热病的“三宝”之一，也是中医危重病症急救要药。本文观察了安宫牛黄丸对盲肠结扎穿孔(CLP)法复制脓毒症模型大鼠重要器官功能及死亡率的影响，现报道如下。　　1材料与方法　　11主要药物、试剂与仪器安宫牛黄丸由北京同仁堂股份有限公司

4、同仁堂制药厂生产(批号：5010279)，水合氯醛由国药集团化学试剂有限公司生产(批号：20071210)，髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性检测试剂盒由南京建成科技有限公司提供(批号：071103)，AU5421全自动生化检测仪由日本Olympus公司生产。　　12动物模型制备清洁级SD大鼠90只，雌雄各半，体质量180~220g，购自广东省医学实验动物中心，合格证号：0031637。在Wichterman[4-5]方法的基础上进行改良，复制腹腔感染型脓毒血症。术前禁食12h，用100

5、mg/L水合氯醛按15mL/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠，常规消毒腹部，在下腹部正中央切口，长约29cm，打开腹腔寻找盲肠与小肠及大肠交界处，用灭菌4号丝线环形结扎，结扎完毕后仔细检查，保持肠道通路正常。在与肠系膜相对的盲端肠壁浆膜面用9号针头穿刺2次，2个针孔相距约3mm，第1针孔距盲端约3mm，同时在第2针孔处放置1条宽2mm的橡胶引流片，防止伤口愈合，轻轻将肠管放回原处，关闭腹腔，逐层缝合。术后即刻皮下注射生理盐水，补充手术过程中体液的丢失，剂量10mL/kg。　　13动物分组及给药将90只大鼠随机分为正常

6、对照组(10只)、模型组(20只)和中药低、中、高剂量组(各20只)。取中药临床剂量的10、20、30倍分别作为低、中、高剂量。中药低、中、高剂量组分别于术前05h和术后6h按10、20、30g·kg-1·d-1剂量灌胃安宫牛黄丸。正常对照组和模型组动物灌胃饮用水。观察记录24h动物死亡率，24h后各组动物活杀，检测血清及肺组织有关指标的变化。　　14标本的采集和处理无菌状态下腹主动脉采血，用肝素钠抗凝，3000r/min离心15min，取血浆于-20℃保存。无菌状态下取肺组织200mg，加入18mL

7、生理盐水在冰浴下匀浆，3000r/min离心15min，取上清液。　195指标检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TB)、肌酐(Cr)含量采用全自动生化分析仪测定，肺组织MPO活性检测采用酶学分光光度法。　　16统计学方法采用SPSS130统计软件包，对计量资料进行t检验和方差分析，计数资料进行χ2检验。　　2结果　　21安宫牛黄丸对脓毒症大鼠死亡率的影响与正常对照组比较，模型组死亡率显著增高(P<001)。中药低、中剂量组死亡率与模型组比较显著降低(P<005)，中药高剂量组死

8、亡率虽然低于模型组，但差异无显著性意义(P>005)。结果见表1。　　22安宫牛黄丸对脓毒症大鼠重要器官损伤的影响大鼠经CLP手术造模后，出现活动减少、反应迟钝、嗜睡、竖毛、进食减少、不饮水、腹泻及部分出现呼吸急促等现象，与临床所见的脓毒症表现比较相似。　　CLP术后24h模型组大鼠血清ALT、TB水平显著高于正常对照组(P<005)，表明脓毒症大鼠肝脏