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时间:2018-08-02
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1、子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶-2的表达及其临床意义【摘要】 目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在子宫内膜异位症(EM)发生发展中的作用及其临床意义。方法SP法检测EM36例异位内膜组、EM32例在位内膜组和22例正常子宫内膜组中MMP-2的表达。结果MMP-2在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中阳性率分别为36.36%、65.63%和86.11%,异位内膜组MMP-2阳性率高于在位内膜组和正常内膜组(P<0.05或P<0.01)。在位内膜组中,分泌期MMP-2表达强于增生期(
2、P<0.05);正常内膜组和异位内膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达差异无显著性(P均>0.05)。结论MMP-2的表达异常与EM的发病有关。【关键词】子宫内膜异位症明胶酶A免疫组织化学 子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)是生育期妇女的常见病,特点是子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长,包括内膜间质和上皮细胞在子宫腔以外部位的异位生长[1],其发病机制尚不明了。本研究检测EM患者异位及在位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,以探讨
3、MMP-2在EM发生发展中的作用及其临床意义。 1资料和方法8 1.1一般资料 选择2005年12月~2007年5月期间在广西田阳县人民医院及右江民族医学院附属医院就诊,经开腹手术后病理检查证实为EM的患者。其中异位内膜组织36例(异位内膜组),年龄(36.3±4.5)岁,增生期22例,分泌期14例。同时通过刮宫或切开手术取EM患者的在位子宫内膜组织共32例(在位内膜组),年龄(35.8±6.2)岁,增生期16例,分泌期16例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的22例正常子宫内膜组织作为对照(正常
4、内膜组),年龄(36.1±5.8)岁,增生期12例,分泌期10例。所有病例均无内分泌和感染性疾病,术前3个月无激素治疗史,手术均在增生期或分泌早期进行。三组年龄比较差异无显著性(P>0.05)。 1.2实验试剂 兔抗人MMP-2单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司。 1.3标本制备 所有组织术后立即取材,经4%多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,5μ8m连续切片5张,1张行常规HE染色进行病理形态学观察,其余用于免疫组织化学染色。 1.4免疫组织化学检
5、测 切片常规二甲苯脱蜡,梯度乙醇至水。采用StreptavidinPeroxdaseConjugatedMethod免疫组化方法,即SP法进行免疫组织化学染色,实验操作严格按说明书进行。以0.01MPBS代替一抗作为阴性对照,以已知阳性标本为阳性对照。 1.5结果判定 MMP-2阳性信号为腺上皮细胞胞浆呈棕黄色着色,间质中也有表达。按参考文献[2]半定量的方法评定每一张标本:随机选取高倍镜(×400)下至少5个视野,计数阳性细胞的百分率,并按以下方法进行计分:阳性细胞百分数为0%~4%者记为0分
6、,5%~24%者记为1分,25%~49%者记为2分,50%~74%者记为3分,75%~100%者记为4分。阳性细胞免疫染色强度按如下方法计分:无色为0分、浅黄色为1分、棕黄色为2分、棕褐色为3分;阳性细胞百分率评分和染色强度评分相乘产生每个病例的加权分数,即免疫组化染色评分=阳性细胞百分率评分×染色强度评分。0分为阴性(-),1~2分为弱阳性(+),3~4分为中等阳性(++),4分以上为强阳性(+++)。8 1.6统计学方法 应用SPSS11.0软件进行统计学处理,计数资料采用χ2检验。 2结果
7、 2.1三组内膜中MMP-2的表达情况 免疫组织化学检测结果显示,在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中均可检测到MMP-2的表达。三组阳性率比较:异位内膜组高于在位内膜组和正常内膜组(P<0.05或0.01);在位内膜组高于正常内膜组(P<0.05),见表1。表1三组内膜中MMP-2的阳性率比较(略) 2.2MMP-2的表达与月经周期的关系 正常内膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达较低,两者差异无显著性(P>0.05);在位内膜组中,分泌期MMP-2表达强于增生期(P&l
8、t;0.05);异位内膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达较强,两者差异无显著性(P>0.05),见表2。表2MMP-2的表达与月经周期的关系(略)8 3讨论 EM病因和发病机制至今尚不完全清楚,目前内膜种植学说为大多数研究者推崇的理论,即脱落的内膜细胞经血逆流入腹腔并种植,完成粘附—侵袭—血管形成过程。 MMP是一锌离子依赖的中型蛋白酶家族,可以降解细胞外基质和基底膜成分,其活性可被TIMP和α-巨球蛋白抑制,MMP的活性调节在组织重建、炎
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