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时间:2018-11-23
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1、子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶【摘要】 目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在子宫内膜异位症(EM)发生发展中的作用及其临床意义。方法SP法检测EM36例异位内膜组、EM32例在位内膜组和22例正常子宫内膜组中MMP-2的表达。结果MMP-2在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中阳性率分别为36.36%、65.63%和86.11%,异位内膜组MMP-2阳性率高于在位内膜组和正常内膜组(P<0.05或P<0.01)。在位内膜组中,分泌期MMP-2表达强于增生期(P<0.05);正常内膜组和异位内
2、膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达差异无显著性(P均>0.05)。结论MMP-2的表达异常与EM的发病有关。【关键词】子宫内膜异位症明胶酶A免疫组织化学 子宫内膜异位症(Endometriosis,EM)是生育期妇女的常见病,特点是子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长,包括内膜间质和上皮细胞在子宫腔以外部位的异位生长[1],其发病机制尚不明了。本研究检测EM患者异位及在位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,以探讨MMP-2在EM发生发展中的作用及其临床意义。 1资料和
3、方法 1.1一般资料 选择2005年12月~2007年5月期间在广西田阳县人民医院及右江民族医学院附属医院就诊,经开腹手术后病理检查证实为EM的患者。其中异位内膜组织36例(异位内膜组),年龄(36.3±4.5)岁,增生期22例,分泌期14例。同时通过刮宫或切开手术取EM患者的在位子宫内膜组织共32例(在位内膜组),年龄(35.8±6.2)岁,增生期16例,分泌期16例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的22例正常子宫内膜组织作为对照(正常内膜组),年龄(36.1±5.8)岁,增生期12例,分泌期10例。所有病例均无
4、内分泌和感染性疾病,术前3个月无激素治疗史,手术均在增生期或分泌早期进行。三组年龄比较差异无显著性(P>0.05)。 1.2实验试剂 兔抗人MMP-2单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司。 1.3标本制备 所有组织术后立即取材,经4%多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,5μm连续切片5张,1张行常规HE染色进行病理形态学观察,其余用于免疫组织化学染色。 1.4免疫组织化学检测 切片常规二甲苯脱蜡,梯度乙醇至水。采用StreptavidinPeroxdaseConjug
5、atedMethod免疫组化方法,即SP法进行免疫组织化学染色,实验操作严格按说明书进行。以0.01MPBS代替一抗作为阴性对照,以已知阳性标本为阳性对照。 1.5结果判定 MMP-2阳性信号为腺上皮细胞胞浆呈棕黄色着色,间质中也有表达。按参考 2结果 2.1三组内膜中MMP-2的表达情况 免疫组织化学检测结果显示,在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中均可检测到MMP-2的表达。三组阳性率比较:异位内膜组高于在位内膜组和正常内膜组(P<0.05或0.01);在位内膜组高于正常内膜组(P<0.05
6、),见表1。表1三组内膜中MMP-2的阳性率比较(略) 2.2MMP-2的表达与月经周期的关系 正常内膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达较低,两者差异无显著性(P>0.05);在位内膜组中,分泌期MMP-2表达强于增生期(P<0.05);异位内膜组中,分泌期与增生期MMP-2表达较强,两者差异无显著性(P>0.05),见表2。表2MMP-2的表达与月经周期的关系(略) 3讨论 EM病因和发病机制至今尚不完全清楚,目前内膜种植学说为大多数研究者推崇的理论,即脱落的内膜细胞经血逆流入腹腔并种植,
7、完成粘附—侵袭—血管形成过程。 MMP是一锌离子依赖的中型蛋白酶家族,可以降解细胞外基质和基底膜成分,其活性可被TIMP和α-巨球蛋白抑制,MMP的活性调节在组织重建、炎症及肿瘤生长、侵袭、转移等过程中起重要作用[3]。子宫内膜细胞的侵袭与转移需要降解细胞外基质,其中MMP起重要作用。MMP-2又称明胶酶A,被活化的MMP-2可降解IV、V和X型胶原及纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、蛋白聚糖、弹性蛋白,并影响新生血管形成,调节细胞粘附,促使异位内膜细胞与腹膜接触,有利于种植。内异症的形成与MMP-2对细胞外基质和基底膜的降
8、解密切相关[4]。目前的研究显示[5,6],在EM患者的病灶组织中,异位内膜比在位内膜表达更高的MMP-2、MMP-3、MMP-9,同时MMP-3在异位病灶的表达不具有正常妇女在位内膜表达的周期性变化,而是呈持续性高表达。另外的研究则表明[7],间质细胞中的MMP-2可能在EM的进展中起重要作用。BraundmEier等[8]从内
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