子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶

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1、子宫内膜异位症患者基质金属蛋白酶【摘要】　　目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在子宫内膜异位症(EM)发生发展中的作用及其临床意义。方法SP法检测EM36例异位内膜组、EM32例在位内膜组和22例正常子宫内膜组中MMP-2的表达。结果MMP-2在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中阳性率分别为36.36%、65.63%和86.11%，异位内膜组MMP-2阳性率高于在位内膜组和正常内膜组（P<0.05或P<0.01）。在位内膜组中，分泌期MMP-2表达强于增生期（P<0.05）；正常内膜组和异位内

2、膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达差异无显著性（P均>0.05）。结论MMP-2的表达异常与EM的发病有关。【关键词】子宫内膜异位症明胶酶A免疫组织化学　　子宫内膜异位症(Endometriosis，EM)是生育期妇女的常见病，特点是子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长，包括内膜间质和上皮细胞在子宫腔以外部位的异位生长［1］，其发病机制尚不明了。本研究检测EM患者异位及在位子宫内膜组织、正常子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达，以探讨MMP-2在EM发生发展中的作用及其临床意义。　　1资料和

3、方法　　1.1一般资料　　选择2005年12月～2007年5月期间在广西田阳县人民医院及右江民族医学院附属医院就诊，经开腹手术后病理检查证实为EM的患者。其中异位内膜组织36例（异位内膜组），年龄(36.3±4.5)岁，增生期22例，分泌期14例。同时通过刮宫或切开手术取EM患者的在位子宫内膜组织共32例（在位内膜组），年龄(35.8±6.2)岁，增生期16例，分泌期16例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的22例正常子宫内膜组织作为对照（正常内膜组），年龄(36.1±5.8)岁，增生期12例，分泌期10例。所有病例均无

4、内分泌和感染性疾病，术前3个月无激素治疗史，手术均在增生期或分泌早期进行。三组年龄比较差异无显著性(P＞0.05)。　　1.2实验试剂　　兔抗人MMP-2单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自深圳晶美生物工程有限公司。　　1.3标本制备　　所有组织术后立即取材，经4%多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋，5μm连续切片5张，1张行常规HE染色进行病理形态学观察，其余用于免疫组织化学染色。　　1.4免疫组织化学检测　　切片常规二甲苯脱蜡，梯度乙醇至水。采用StreptavidinPeroxdaseConjug

5、atedMethod免疫组化方法，即SP法进行免疫组织化学染色，实验操作严格按说明书进行。以0.01MPBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性标本为阳性对照。　　1.5结果判定　　MMP-2阳性信号为腺上皮细胞胞浆呈棕黄色着色，间质中也有表达。按参考　　2结果　　2.1三组内膜中MMP-2的表达情况　　免疫组织化学检测结果显示，在正常内膜组、在位内膜组和异位内膜组中均可检测到MMP-2的表达。三组阳性率比较：异位内膜组高于在位内膜组和正常内膜组（P<0.05或0.01）；在位内膜组高于正常内膜组（P<0.05

6、），见表1。表1三组内膜中MMP-2的阳性率比较（略）　　2.2MMP-2的表达与月经周期的关系　　正常内膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达较低，两者差异无显著性(P>0.05)；在位内膜组中，分泌期MMP-2表达强于增生期（P<0.05）；异位内膜组中，分泌期与增生期MMP-2表达较强，两者差异无显著性(P>0.05)，见表2。表2MMP-2的表达与月经周期的关系（略）　　3讨论　　EM病因和发病机制至今尚不完全清楚，目前内膜种植学说为大多数研究者推崇的理论，即脱落的内膜细胞经血逆流入腹腔并种植，

7、完成粘附—侵袭—血管形成过程。　　MMP是一锌离子依赖的中型蛋白酶家族，可以降解细胞外基质和基底膜成分，其活性可被TIMP和α-巨球蛋白抑制，MMP的活性调节在组织重建、炎症及肿瘤生长、侵袭、转移等过程中起重要作用［3］。子宫内膜细胞的侵袭与转移需要降解细胞外基质，其中MMP起重要作用。MMP-2又称明胶酶A，被活化的MMP-2可降解IV、V和X型胶原及纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、蛋白聚糖、弹性蛋白，并影响新生血管形成，调节细胞粘附，促使异位内膜细胞与腹膜接触，有利于种植。内异症的形成与MMP-2对细胞外基质和基底膜的降

8、解密切相关［4］。目前的研究显示［5，6］，在EM患者的病灶组织中，异位内膜比在位内膜表达更高的MMP-2、MMP-3、MMP-9，同时MMP-3在异位病灶的表达不具有正常妇女在位内膜表达的周期性变化，而是呈持续性高表达。另外的研究则表明［7］，间质细胞中的MMP-2可能在EM的进展中起重要作用。BraundmEier等［8］从内