barrett食管组织中cox2和bcl2的表达与癌变风险

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1、Barrett食管组织中COX2和Bcl2的表达与癌变风险作者：向明确，谢文义，袁晓英，王志宁，王旭东，李智泉，陈诗奉【摘要】目的：研究COX2和Bcl2在Barrett食管（BE）相关病变组织中的表达意义.方法：胃镜下采用Lugol液染色，活检获得实验标本，HE染色观察病理特征.用SP免疫组织化学方法检测正常食管上皮10例、中重度反流性食管炎23例、BE45例和食管腺癌14例组织中COX2和Bcl2的表达，进行半定量分析，并预测BE的癌变风险.结果：COX2在正常食管上皮、中重度反流性食管炎、BE、食管腺癌组织中

2、的表达呈逐渐增强趋势.BE和食管腺癌组织中呈强阳性表达，表达率接近100%，且两种组织的表达强度无明显差异(P=0.334).Bcl2的表达变化与COX2基本一致.COX2在全周型的表达明显强于舌型和岛型两种形态的BE，但差异无统计学意义（P>0.05）.LSBE黏膜中COX2的表达明显强于SSBE；重度肠化时COX2的表达显著强于无肠化和中低度肠化组织，差异有统计学意义（P<0.05）.低度、高度异型性增生的BE黏膜COX2均呈高表达，尤其在后者的组织中最强，两者间差异显著.LSBE，重度肠化生及高度异

3、型增生BE组织中的表达与腺癌差异无统计学意义（P>0.05）.而腺癌与其余各类型BE的表达差异均有统计学意义（P<0.05）.Bcl102在不同类型BE及腺癌组织中的表达差异与COX2基本一致.结论：BE与腺癌中Bcl2与COX2的表达最强，不同程度肠化生时，Bcl2的表达变化无显著差异.【关键词】Barretts食管；环氧化物酶2；基因，Bcl20引言Barrett食管（Barrettesophagus,BE）是重要的食管腺癌的癌前病变.BE的癌变率约为每年1/104人，较一般人群高30～125倍，8

4、0%的食管腺癌发生于BE，而40%的食管胃交界处腺癌与BE有关［1］，机制目前还不清楚.环氧合酶2（cyclooxygenase2,COX2）是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，可促进细胞恶变的进程，导致BE上皮过度增生甚至癌变.Bcl2是一种凋亡蛋白，常见的功能是抑制凋亡，引起细胞存活增加.COX2激活后，可通过前列腺素诱导其下游的Bcl2表达升高，增强抗凋亡作用.我们采用免疫组织化学技术检测COX2和Bcl2在各类型BE、反流性食管炎、食管癌及正常食管组织中的表达变化情况，并结合临床实际，初步探讨二者表达变

5、化的意义以及预测BE发生癌变风险高低的可能性.1材料和方法1．1材料根据20051012重庆首届BE会议达成的诊治共识(草案)［2］，200403/200712胃镜活检或心胸外科手术获得符合要求的病理标本92（男56，女36）例，年龄19～72（平均48.2）岁.分类：①正常食管上皮组10例；②中重度反流性食管炎组23例；③BE组45例；④食管腺癌组14例.BE分型：舌型15例，岛型18例，全周型12例；长节段型BE（longsegmentBarrettesophagus，LSBE）8例，短节段型BE（shortsegme

6、ntBarrettesophagus，SSBE）37例；无肠化13例，低/中度肠化24例，重度肠化8例；不伴异型性增生19例，低度异型性增生21例，高度异型性增生5例.COX2兔抗人mAb,Bcl2鼠抗人mAb,二抗(即用型第二代免疫组化ElivisionTMPlus广谱试剂盒)均购于福建迈新公司.1．2方法胃镜下，采用Lugol液染色，钳取橘红色病变组织，甲醛中常温固定保存备用.常规石蜡包埋、切片及HE染色；标本漂洗、脱蜡；30mL/LH2O2阻断内源性过氧化物酶，微波抗原修复，非免疫血清封闭；分别滴加COX2和Bcl

7、2一抗抗体（工作浓度1∶150），4℃孵育过夜；滴加即用型第二代免疫组化ElivisionTMPlus广谱试剂盒试剂A，37℃孵育，然后滴加试剂B；DAB复合物显色，苏木素复染；室温干燥后，乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片.阴性对照：以PBS代替一抗.阳性对照：结肠癌组织.细胞核膜或胞质内出现棕黄物质者为阳性细胞.分别对每张切片的阳性细胞率和阳性细胞着色强度进行分级记分.阳性细胞率：至少计数5个高倍视野的细胞,计算阳性细胞比例.0分：阳性细胞≤5%；1分：6%～30%；210分：31%～70%；3分：≥71%.阳性细胞着色强度

8、：0分：阴性；1分：弱阳性；2分：阳性；3分：强阳性.根据两项积分之和确定阳性程度，1～3分为低表达，4～6分为高表达.统计学处理：应用SPSS11.0统计软件,采用等级分组秩和检验.P<0.05为差异有统计学意义.2结果2．1COX2和Bcl2在食管