urocortin 致大鼠心肌细胞肥大由pka信号通路介导

《urocortin 致大鼠心肌细胞肥大由pka信号通路介导》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、Urocortin致大鼠心肌细胞肥大由PKA信号通路介导作者：梁春光，王洪新，刘春娜，刘杰,黄雷【摘要】　　目的通过观察PKA拮抗剂H-89和CRF受体拮抗剂Astressin抑制UCN诱导乳大鼠心肌细胞肥厚的作用，研究UCN诱导的大鼠心肌细胞肥厚的信号转导机制。方法以体外培养的乳大鼠心肌细胞为模型，应用UCN0.1μmol·L-1诱导心肌肥大，观察H-890.1μmol·L-1和Astressin1μmol·L-1的作用，探讨UCN0.1μmol·L-1对心肌肥厚的作用机制。用消化分离法及计算机图像分析系统检测心肌细胞体积；［3H］亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白

2、的合成；用Western蛋白印迹法测定ANP表达。结果UCN0.1μmol·L-1使心肌细胞体积、蛋白合成和ANP表达明显增加，H-890.1μmol·L-1和Astressin1μmol·L-1抑制UCN诱导的心肌肥大。结论Urocortin可能通过CRF-R2并通过PKA信号通路诱导乳大鼠心肌细胞肥大。【关键词】Urocortin心肌肥大PKAH-89　　Abstract:ObjectiveToobservetheinhibitiveeffectsandsignaltransductionbyH-89andCRFreceptorantagonistAstre

3、ssinonhypertrophicmyocardialcellsinducedbyUCNinneonatalratsandstudythesignaltransductionmechanismof12hypertrophicmyocardialratsinducedbyUCN.MethodsUsingthemyocardialcellsofneonatalratsculturedinvitroasmodels,andinducingmyocardialhypertrophybyusingUCN0.1μmol·L-1toobservetheeffectofH-8

4、90.1μmol·L-1andAstressin1μmol·L-1anddiscussthemechanismofeffectofUCN0.1μmol·L-1onmyocardialhypertrophy.Thecardiomyocytesvolumesweremeasuredbycomputerphotographanalysissystem.Theproteinsyntheticratewasobtainedthroughmeasuringtheincorporationof[3H]-leucineintomyocyteproteinbyliquidscin

5、tillationmethod.TheexpressionofANPwasdeterminedbywestern-blot.ResultsUCNenhancedthecardiomyocytevolume,thesynthesisandtheexpressionofANP.H-890.1μmol·L-1andAstressin1μmol·L-1caninhibitmyocardialcellshypertrophyinducedbyUCN.ConclusionsThehypertrophiceffectofUCNinneonatalrats'cardiomyoc

6、ytesismediatedviaCRF-R2andactivationofthePKApathway.　　Keywords：Urocortin;myocardialcellshypertrophy;PKA;H-8912　　Urocortin(UCN)是在1995年新发现的一个神经肽，研究发现UCN在心脏中［1］有表达，是一个很重要的心血管活性肽。UCN可以使新生大鼠心肌细胞ANP和BNP分泌显著增加［2］，而且UCNmRNA在肥大心肌上的表达数量明显比在正常心脏上的表达数量高［3］，均说明UCN参与心肌肥大作用。UCN与CRF-R2具有很高亲和力［4，5］，实

7、验表明UCN能够使心肌细胞内cAMP积聚增加［2］300。大量实验也表明PKA信号通路参与心肌肥厚作用。　　为了进一步探讨UCN诱导心肌肥厚的作用机制，本研究在UCN体外诱导心肌肥大基础上，重点观察应用PKA抑制剂H-89和CRF-R拮抗剂Astressin对心肌肥大的影响。　　1材料与方法　　1.1实验动物　　生后2～3d的SD乳大鼠，雌雄不拘，由辽宁医学院试验动物中心提供，动物合格证号：SCXK（辽）2003-0007。　　1.2药品与试剂　　胰蛋白酶、十二烷基硫酸钠（sodiumdodecyl12sulfate,SDS）、DMEM培养基、Urocortin

8、、H-89(PKA抑制剂