bcl-2核酶诱导smmc7721细胞凋亡与p16,p21蛋白表达的关系研究

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1、Bcl-2核酶诱导SMMC7721细胞凋亡与p16,p21蛋白表达的关系研究　　摘要：目的　观察bcl-2核酶对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的作用,并检测p16和p21的表达情况。探讨bcl－2核酶在肝癌治疗中的意义。方法经脂质体介导的方法，将PMTr－neo(正向bcl－2核酶真核表达载体)导入SMMC7721细胞中。细胞克隆转移扩大培养后,采用TUNEL法、免疫组化技术结合图像分析，在检测SMMC7721/PMTr－neo细胞凋亡的同时，检测p16,p21的表达。结果与对照组相比较,在b

2、cl－2核酶诱发SMMC7721细胞发生凋亡的同时,p16和p21基因的表达水平显著增高。结论　bcl-2核酶通过封闭bcl-2的表达可促进SMMC7721细胞凋亡,同时伴发p21和p16表达水平的增高。　Relationshipbetweenapoptosisinducedwithbcl-2ribozymeandexpressionofp16,p21inSMMC7721cells　　Abstract:AimToobservetheeffectofbcl-2ribozymeonSMMC7721ce

3、llsandtheexpressionofp16,p21,soto12investigatetheroleofbcl-2ribozymeinhepatocarcinomatreatment.MethodsPMTrneo(sensebcl-2ribozymeeucaryoticexpressionvector)wasintroducedintoSMMC7221cellsthroughlipofectinmediation.Aftercloning,TUNELandIHCincombinationw

4、ithimaginganalysiswereusedtosimultaneouslydetermineapoptosisandp16,p21expressionsoftheSMMC7721/PMTrneocells.ResultsComparedwithcontrol,inthecourseofapoptosisinducedbybcl-2ribozymep16andp21expressionsrosesignificantlyinSMMC7721cells.Conclusionbcl-2rib

5、ozymecanpromoteSMMC7721cellapoptosisbyblockingbcl-2expression,whichisaccompaniedbyanincreasedp16andp21expressions.Thisresultcouldbeofvalueforstudyinghepatocarcinomagenesisandprobingtherapeuticprocedure.neo(sensebcl-2ribozymeeucaryoticexpressionvector

6、)wasintroducedintoSMMC7221cellsthroughlipofectinmediation.Aftercloning,TUNELandIHCincombinationwithimaginganalysiswereusedtosimultaneouslydetermineapoptosisandp16,p21expressionsoftheSMMC7721/PMTrneocells.ResultsComparedwithcontrol,inthecourseofapopto

7、sisinducedbybcl-2ribozymep16andp21expressionsrosesignificantlyinSMMC7721cells.Conclusionbcl-2ribozymecanpromoteSMMC7721cellapoptosisbyblockingbcl-2expression,whichis12accompaniedbyanincreasedp16andp21expressions.Thisresultcouldbeofvalueforstudyinghepa

8、tocarcinomagenesisandprobingtherapeuticprocedure.　　Keywords:hepaticcarcinoma;bcl-2;ribozyme;p16;p21▲　　抗凋亡蛋白bcl-2在肿瘤发生过程中具有着重要的意义。自从Vaux首次提出bcl-2高表达可诱发肿瘤后，人们深入研究发现，bcl-2可延长细胞的生存期,抑制细胞凋亡〔1－3〕。人们已对bcl-2与肝癌的关系进行了探讨,认为它与肝癌的发生存在密切的关系。我们应用脂质体介导的基因转移方