多波长uvrb相干作用对视网膜光感受器损伤特点及损伤后的恢复

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1、多波长UVRB相干作用对视网膜光感受器损伤特点及损伤后的恢复作者：李亚萍李光宇刘早霞苏冠方孙大军【摘要】目的研究不同波段UVRB相干作用对视杆细胞损伤的特点。方法6w龄albinoSpragueDawley大鼠随机分成4组，每组20只。UVRB辐射光来自于与单色器相连的高压银汞灯，最大的输出能量在300nm(UVRB300nm)和310nm(UVRB310nm)。每只动物暴露1只眼，2组只暴露于UVRB300nm,剂量:8kJ/m2,时间为70min;另2组先暴露于UVRB300nm,剂量4kJ/m2,时间35min;然后同一只眼再暴露于UVR

2、B310nm,剂量42kJ/m2,时间35min。于暴露后第3、8天，处死动物。分别行光镜和电镜检查。结果与其他2组比较，UVRB300nm+310nm暴露后第8天部分视杆细胞丧失，但同时视杆细胞外节盘膜(ROS)却逐渐恢复（P<0.05）。UVRB300nm+310nm组暴露后第8天与第3天比较，ROS水肿明显减轻，ROS变短；内节盘膜长短和排列恢复；视网膜外核层染色质密度多数恢复，少数发生核固缩；RPE内空泡状吞噬小体已不见。结论不同波段UVRB相干作用后，视网膜视杆细胞可能存在恢复机制，但这种损伤修复过程相当缓慢。其机制可能是细胞适应性反应，也可

3、能是慢性细胞损伤。【关键词】视网膜视杆细胞；UVRB；相干作用；生物学效应9太阳光中300nm左右UVRB的生物学效应很强，Laube〔1〕报道其可以穿过透明晶体到达视网膜。随UVRB辐射强度的增加，对人视网膜的损伤也逐渐加重。光损伤首先引起光感受器的改变，然后是视网膜色素上皮(RPE)的损害，但损伤视杆细胞还是视锥细胞取决于不同的物种，在大鼠主要损伤视杆细胞。视杆细胞光损伤开始于内、外节盘膜，如果损伤严重可导致视杆细胞死亡；如损伤轻微，通过损伤修复机制，其结构将恢复〔2〕。本研究旨在探讨视杆细胞外节盘膜(ROS)是否可从UVRB的损伤中恢复。　　1材料与方法　

4、　1.1材料　　1.1.1动物　　所有shalbinoSpragueDawley雌性大鼠购自M&BDenmark,保存在可调温动物室，每天12h灯光照明（平均照明度5lux），12h黑暗；动物适应喂养直到6周龄用于实验。所有大鼠都按ARVO的眼、视光学研究条例进行饲养和实验操作。　　1.1.2UVR光源9　　辐射光来自于350W的高压银汞灯，直射出的辐射线首先经过水冷却，然后经过两个单色器（λmax=300nmwith10.1nmfullwidthathalfmaximum〔FWHM〕;λmax=310nmwith13.5nmFWHM）。最后辐射光照在角膜上。

5、在角膜水平，辐射光被热电器(model7101;Oriel,Stratford,CT)测量。热电器测量标准由美国国家计量局建立。　　1.2分组　　80只6w龄大鼠随机分成4组。其中2组的每只大鼠右眼活体暴露于UVRB300nm，剂量8kJ/m2，时间70min；一组在暴露后3d被处死，另一组在暴露后8d被处死。另2组中的每只大鼠右眼活体暴露于UVRB300nm，剂量4kJ/m2，时间35min；然后同一只眼再暴露于UVRB310nm，剂量42kJ/m2，时间35min；一组在暴露后3d被处死，另一组在暴露后8d被处死。每一只大鼠左眼没有光暴露。　　1.3方法

6、　　每只大鼠为以95mg/kgketamine和14mg/kgxylazine混合腹腔注射麻醉5min后，1%散瞳剂tropicamide1滴滴双眼。5min后，固定动物右眼上下眼睑，右眼暴露于UVR9B。分别于光暴露后第3、8天以过量的CO2处死大鼠，剜出双眼，去除眼球前节组织和玻璃体，以视盘为中轴纵形垂直剖开眼球，再以视盘为中心水平将颞侧半眼球剖开成2份（各1/4眼球大小），一份置于10%中性福尔马林溶液中，另一份置于3%戊二醛溶液中固定。分别行光镜和电镜检查。　　1.4光镜和电镜检查　　光镜观察的标本用10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜进行观

7、察。电镜观察的标用1%四氧化锇后固定，切片，双氧铀醋酸铅柠檬酸盐环氧染色后，用JEM100电镜进行观察。　　1.5统计学方法　　采用SAS软件，数据处理采用秩和检验。　　2结果　　2.1组织形态学变化　　UVRB300nm暴露后3d组，颞侧ROS与非暴露眼无明显差别（图1A、1B）。UVRB300nm+310nm暴露后3d组，颞侧ROS明显水肿，外节盘膜间的空隙增大；内节盘膜略短，并有空泡形成；视网膜外核层（ONL）染色质密度增浓（核固缩早期）；RPE内见空泡状吞噬小体形成（图1C）。UVRB300nm暴露后89d组，颞侧R