兔角膜碱烧伤后lyve-1的表达及意义

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1、兔角膜碱烧伤后LYVE-1的表达及意义作者：刘彦红高莉莉郑利民【摘要】目的：研究探讨新西兰大白兔角膜碱烧伤后LYVE-1(淋巴管内皮透明质酸盐受体1)的表达及意义，进一步证实角膜新生淋巴管的存在，揭示其与角膜碱烧伤损伤修复的关系。方法：饲养24只健康新西兰大白兔，左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组，右眼不做手术作为对照组。术后1天、3天、7天、14天分别处死6只兔，免疫组化测定两眼LYVE-1的表达情况。结果：实验组于术后第3天出现表达，第7天、第14天表达增加；实验组术后3天、7天和14天LYVE-1表达均高于对照组。结论：角膜新生

2、淋巴管在角膜碱烧伤中扮演重要角色。【关键词】角膜碱烧伤；新生淋巴管；LYVE-1　　AbstractObjective:ToexaminetheexpressionofLYVE-1inthecorneaofNewZealandrabbitundergoingalkaliburnsoastoconfirmtheonsetofcornealneolymphangiogenesisaswellasitscorrelationwithpost-burncornealrestoration.Methods:Thelefteyesof24hea

3、lthyNewZealandrabbitswereallsubjectedtoalkaliburnastheexperimentalgroup,whiletheuntreatedrighteyeswerechosenasthecontrolgroup.Everysix6rabbitschosenrandomlywerekilledatt=1day,3day,7dayand14dayafteroperationrespectively.ThecornealexpressionofLYVE-1wasthenexaminedthrough

4、immunohistochemistrymethod.Result:LYVE-1expressionintheexperimentalgroupexhibitsprogressiveincreasestartingfromthethirddayafteroperationandreachesitspeakpresumablyaroundthe7thdayafteroperation.LYVE-1expressionintheexperimentalgroupexhibitsmuchhigherlevelthanthecontrolg

5、roupateachtimepoint(t=3day,7dayand14day)examined.Conclusion:Cornealneolymphangiogenesisplaysanimportantroleinpost-burncornealrestoration.　　KeywordsCornealalkaliburn;Neolymphangiogenesis;LYVE-1　　角膜碱烧伤是临床上复杂而难以治愈的眼病之一,碱性物质既溶于水又溶于脂肪，因而进入细胞后，能迅速与细胞结构中的脂类发生皂化反应，故极易渗入眼组织深层，破

6、坏眼内组织。本实验建立兔角膜碱烧伤的模型,通过免疫组化测定淋巴管内皮透明质酸盐受体1（LYVE-1)的表达，为进一步证实角膜碱烧伤后角膜新生淋巴管的存在提供有力的证据。6　　1材料与方法　　1.1动物及分组选择内蒙古农业大学动物中心提供的3～4月龄健康新西兰大白兔24只，体重2～3kg，复合饲料喂养。将24只新西兰大白兔分为两组：左眼制作角膜碱烧伤模型作为实验组，右眼不做手术作为对照组　　1.2动物模型的制备角膜碱烧伤模型的制作：用5mm圆形滤纸在1N的NaOH溶液中充分浸透，取出滤纸吸取溶液，贴于角膜中央烧灼30秒，移去滤纸后立即

7、用无菌生理盐水冲洗结膜囊，以0.25%氯霉素滴眼。依Hughes分度法为中度碱烧伤模型。　　1.3免疫组化检查将实验组及对照组术后1天、3天、7天、14天各组分别取6只兔的术眼及空白眼1/3膜（边缘带巩膜组织），浸入10%中性甲醛固定液中固定24小时，酒精梯度脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，免疫组化测定LYVE-1值，阳性结果呈棕黄色背景无色或者淡黄色。　　1.4统计学方法实验数据用x±s表示，使用SPSS13.0统计软件包，采用方差分析，α=0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。　　2结果6　　每个标本做2张切片，每张切片随机取5

8、个不同的高倍视野（×100），计算每个高倍镜视野的平均灰度值（平均灰度值与阳性表达程度成反比关系）。免疫组化阳性结果判定：胞浆内有黄色或棕黄色颗粒即为阳性表达部位。详见表1。　　表1不同时间不同组别大白兔LYVE-1的平均灰度值比较（