体外微团培养兔骨髓间充质干细胞形成软骨细胞

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1、体外微团培养兔骨髓间充质干细胞形成软骨细胞作者：李斌　张伟　王健　孙水　吴帅【摘要】［目的］探讨兔骨髓间充质干细胞（bonemesenchymalstemcells，BMSCs）体外诱导形成软骨细胞的方法，以及转化生长因子-β1（transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1）、胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-likegrowthfactor-Ⅰ，IGF-Ⅰ)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor，bFGF)之间的相互作用。［方法］对兔骨髓间充质干细胞体外进行原代和传代培养，按加

2、入诱导条件不同分为四组：A组：TGF-β1+bFGF；B组：TGF-β1+IGF-Ⅰ；C组：TGF-β1；D组：空白对照组。3周后分别做四唑盐（methylthiazolyltetrazolium，MTT）比色试验、糖胺聚糖（glycosaminoglycan，GAG）检测和免疫组织化学染色。［结果］A、B、C三组Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性；MTT吸光度值和GAG含量检测结果均为：A组>C组>D组，B组>C组>D组，统计学有显著差异。［结论］兔BMSCs在一定条件下可以诱导成软骨细胞，TGF-β1和IGF-Ⅰ、bFGF在

3、BMSCs向软骨细胞分化和增殖时起协同作用。【关键词】骨髓间充质干细胞　软骨细胞　转化生长因子-β1　胰岛素样生长因子-Ⅰ　碱性成纤维细胞生长因子14　　Abstract:［Objective］Tostudythemethodsofinducingbonemesenchymalstemcells（BMSCs）ofrabbitsintochondrocytesinvitroandtheinteractionoftransforminggrowthfactorβ1（TGF-β1）,insulin-likegrowthfactor-Ⅰ（IGF-Ⅰ)an

4、dbasicfibroblastgrowthfactor（bFGF).［Methods］BMSCsofrabbitswereprimarilyculturedandsubculturedinvitro,andthendividedintofourgroupsaccordingtothedifferenceoffactors:groupAreceivingTGF-β1andbFGF;groupBreceivingTGF-β1andIGF-Ⅰ;groupCreceivingTGF-β1;groupDreceivingnocellgrowthfacto

5、r.Afterthreeweeksallthefourgroupsweredetectedbymethylthiazolyltetrazolium（MTT）assay,measurementofglycosaminoglycan(GAG)andimmunohistochemistry.［Results］ImmunohistochemicaldetectionofcollagenⅡwaspositiveingroupsA,BandC.TheresultsoftheMTTassayandtheGAGcontentingroupsAandBwereob

6、viouslyhigherthanthoseingroupsCandD.［Conclusion］RabbitBMSCscanbeinducedintochondrocytesundercertainconditions.TGF-β1,IGF-ⅠandbFGFhavesynergyeffectinthedifferentiationfromBMSCsintochondrocytes.　Keywords：bonemesenchymalstemcells;chondrocytes;14transforminggrowthfactor-β1;insuli

7、n-likegrowthfactor-Ⅰ;basicfibroblastgrowthfactor　　由于软骨内没有血管，成熟软骨细胞有丝分裂能力低下等原因，软骨的自我修复能力非常有限，所以由创伤和退变等所引起的关节软骨损伤成了临床上无法解决的难题。在传统的关节软骨钻孔、自体软骨膜、骨膜移植和自体的骨软骨移植都没有取得良好效果的情况下，组织工程为关节软骨损伤的修复带来了一线曙光。骨髓间充质干细胞（bonemesenchymalstemcells，BMSCs）取材简单，体外增殖能力强，并且具有多向分化潜能，成为了软骨组织工程理想的种子细胞。本研究旨在

8、探讨骨髓间充质干细胞体外向软骨细胞分化的条件以及转化生长因子-β1（transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1）