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1、丹参多酚盐治疗多脏器功能不全的实验研究作者：穆德广金发光楚东岭孙瑞琳【摘要】目的：探讨丹参多酚盐体内治疗多脏器功能不全的作用。方法：健康大耳白兔24只，随机分为正常对照组、内毒素组、丹参多酚盐干预组，每组8只。内毒素组经耳缘静脉静推LPS(1ml/kg)，12h后再由耳缘静脉注射一次LPS(1ml/kg)，复制SIRS/MODS动物模型;对照组耳缘静脉静推等量生理盐水;丹参多酚盐干预组于0h,12h经耳缘静脉推注LPS(1ml/kg)并于第一次注入内毒素后6h，12h，18h静推丹参多酚盐(50mg/kg)。于24h时间点测定各组动物血清肿瘤坏死因子α(TNFα
2、)、白细胞介素1(IL1)、白细胞介素6(IL6)、血小板活化因子(PAF)。光镜下观察各组动物脏器病理学变化。结果：丹参多酚盐干预组与内毒素组相比,IL1、IL6、PAF、TNFα均较内毒素组有不同程度降低。丹参多酚盐干预组脏器损伤组织学改变较内毒素组明显减轻。结论：丹参多酚盐具有治疗多脏器功能不全的作用，为防治MODS提供了实验依据。【关键词】多脏器功能不全综合症;丹参多酚盐注射液;内毒素;炎症介质在全身性炎症反应综合症/多器官功能障碍综合症(SIRS/MODS)发病过程中，机体产生大量有害炎症介质，其中白细胞介素1(IL81)、肿瘤坏死因子
3、α(TNFα)发挥核心作用，造成组织器官病理变化。我们通过内毒素所致感染性多器官功能障碍综合症动物模型，观察丹参多酚盐治疗多脏器功能不全的作用。 1材料与方法 1.1材料 丹参多酚酸盐购于上海绿谷集团。大耳白兔(购自第四军医大学动物中心)，内毒素(LPS)购于Sigma公司;兔TNFα、IL1、PAF定量ELISA试剂盒购于上海森雄科技实业有限公司，IL6定量ELISA试剂盒购于第四军医大学免疫教研室。 1.2方法 健康雄性兔24只,平均体重2kg。随机分为3组,正常对照组、内毒素组、丹参多酚盐干预组。3组动物均从耳静脉给相应药物。内毒素组于第0h
4、及12h分别给予脂多糖(LPS)1mg/kg;正常对照组推注等量生理盐水;丹参多酚盐组:第一次静推LPS后6、12、18h分次静推丹参多酚盐50mg/kg。 1.3观察指标与检测方法8 分别在正常对照组注入生理盐水，内毒素组及丹参多酚盐干预组注入内毒素后于24h时间点将全部动物放血活杀,采集静脉血，离心分离上清，血清采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1(IL1)、白细胞介素6(IL6)、血小板活化因子(PAF)。取出肺、肾、各一小块组织,将标本置入4%的多聚甲醛液中固定,石蜡包埋、切片,HE染色后光镜观察并照相
5、。 1.5统计学处理 数据用均数±标准差(±s)表示,用SPSS11.OR软件进行统计分析，组间比较采用t检验。2结果 2.1肉眼观察结果 正常对照组:兔外观及各项体征正常;内毒素组:兔出现皮温升高、呼吸窘迫、反应迟钝、口唇发绀,部分动物口唇有粉红色泡沫液体溢出,各脏器均有不同程度肿胀、表面大小不等暗红色斑片状病灶,部分动物腹腔内有血性积液，SIRS/MODS动物模型复制成功。8 2.2血清TNFα和IL6水平检测结果 表1显示,与正常对照组比较,内毒素组TNFα及IL6有明显升高,丹参多酚盐干预组与内毒素组比较IL6和TNFα均有不同程度降
6、低,但仍高于对照组。表1血清中TNFα、IL6含量变化 注：*P<0.05，与对照组比较;#P<0.05，与致伤组比较。 2.3血清IL1和PAF水平检测结果 表2显示,与正常对照组比较,内毒素组IL1、PAF有明显升高,丹参多酚盐干预组与内毒素组比较IL1和PAF均有不同程度降低,但仍高于对照组。表2血清中IL1、IL6、PAF含量变化注：*P<0.05，与对照组比较;#P<0.05，与致伤组比较。 2.4病理学改变 内毒素组:光镜下肺、肾等脏器微血管内红细胞聚集,微血栓形成。丹参多酚盐干预组：镜下肺、肾等脏器炎症反应
7、较致伤组明显改善，微血栓明显减少。8 光镜下，内毒素组肺组织肺泡壁增厚，肿胀，肺泡萎陷闭合，大量炎症细胞侵润，微血管内红细胞聚集，微血栓形成。丹参多酚盐干预组肺泡壁增厚及肺泡萎陷程度较内毒素组减轻，炎症细胞侵润及微循环障碍明显改善。 光镜下内毒素组可见肾小球毛细血管丛扩张充血，肾小管上皮浊肿，透明变性，整个肾脏组织伴有中性粒细胞和单核细胞浸润，同时伴有广泛的微血栓形成。肾间质可有水肿及灶状炎性细胞浸润。丹参多酚盐干预组见肾脏组织充血，水肿减轻明显，炎性细胞浸润较轻。 3讨论 研究表明,TNFα在SIRS/MODS发病机制中起重要作用[1～4]。TNF
