一氧化氮在吗啡后处理对心肌缺血再灌注损伤保护中的作用

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1、一氧化氮在吗啡后处理对心肌缺血再灌注损伤保护中的作用作者：王志，赵惠娟，金冬梅，车月娟，李玉娟，王飞，彭书崚【摘要】【目的】探讨吗啡后处理对急性心肌缺血/再灌注损伤的保护作用以及对信号通路eNOS/NO的影响。【方法】SD大鼠56只随机分成4组，每组14只：S组(假手术，只穿线，不结扎)，I/R组(单纯缺血再灌注)，M组(吗啡后处理+缺血再灌注)，L+M组(L-NAME+吗啡后处理+缺血再灌注)。除S组外，所有大鼠心脏都经历45min缺血和120min再灌注。观察血流动力学指标，于再灌注120min时，各组随机取9只大鼠，用TTC法染色，计算心肌缺血梗死区(IA/AR);其余5只大鼠，取心肌，

2、用WesternBlot技术分析总eNOS和磷酸化eNOS的蛋白表达，硝酸盐还原酶法测定心肌NO含量。运用SPSS12.0统计软件，统计学分析采用方差分析及SNK检验。【结果】与I/R组比较，M组梗死面积明显缩小，(32±2.8)%vs(49±2.9)%(P<0.01);磷酸化eNOS的蛋白表达明显增加;心肌组织内NO含量也明显增加。非选择性一氧化氮合成酶抑制剂，l-NAME完全消除吗啡后处理对心肌的保护作用，明显降低吗啡后处理所诱导的心肌组织内NO含量的增加，但并没有抑制吗啡后处理所诱导的磷酸化eNOS蛋白表达的增加。【结论】大鼠在体心脏缺血模型，吗啡后处理可通过eNOS/NO信号通路

3、，抗心肌缺血/再灌注损伤。13【关键词】心肌再灌注损伤;后处理;吗啡;一氧化氮　Abstract：【Objective】ToinvestigatethecardioprotectiveeffectofmorphinepostconditioningonischemicreperfusedratheartandtotestthehypothesisthatphosphorylationofeNOSbymorphinemayparticipateinthecardioprotectiveeffectofmorphineaftermyocardialischemiaandreperfusion.【M

4、ethods】Ratssubjectedto45minofmyocardialischemiafollowedby120minofreperfusionwereassignedtothefollowinggroups：sham-operated(Sgroup)，ischemia-reperfusion(I/Rgroup)，morphinepostconditioning+I/R(Mgroup)，morphinepostconditioning+l-NAME+I/R(L+Mgroup).Infarctsizewasassessedbytriphenyltetrazoliumchloridesta

5、ining.Aktphosphorylationexpressionwasassessedbyimmunoblotting.Thenitricoxideconcentrationsincardiactissuewerequantifiedbyachemiluminescencedetector.StatisticalanalysiswasperformedusingSPSS12.0forWindowssoftware.ThestatisticalsignificancewasdeterminedbyanalysisofvariancefollowedbytheStudent-Newman-Ke

6、ulstest.【Results】MorphinepostconditioningreducedinfarctsizecomparedwiththatintheI/Rgroup：32±2.8%versus49±132.9%(P<0.01).eNOSphosphorylationexpressionincreasedaftermorphinepostconditioning.MorphinepostconditioningalsoresultedinmarkedincreaseinNOcontent.ThecardioprotectiveeffectsandincreasedNOprodu

7、ctionofmorphine近年来的研究表明，直接靶向再灌注期的心肌缺血后处理(ischemicpostconditioning)能产生明显的心肌保护效果。Zhao等[1]提出了心肌缺血后处理的概念，即心肌缺血再灌注前，短时间重复几个循环的结扎和开放冠脉，可以明显减轻再灌注损伤。在Langendorff心脏灌流离体模型上，有研究表明，吗啡后处理对心肌缺血/再灌注损伤有保护作用[2]。NO在维持血